SIRT1激动剂在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途

摘要

本发明提供了SIRT1激动剂在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。本发明首次发现提高SIRT1表达水平及其活性在预防和治疗溃疡性结肠炎中起着重要作用，提高SIRT1表达水平及其活性能够明显改善小鼠结肠长度缩短现象，明显改善小鼠脾脏增大现象，明显改善小鼠直肠出血现象，明显改善小鼠结肠组织形态结构的损坏情况。因此，SIRT1激动剂、提高SIRT1表达水平的物质能够用来制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的药物。本发明为毒副作用小且能够有效治疗消化系统自身免疫性疾病(例如溃疡性结肠炎、克罗恩病)的药物提供了一种新的选择。

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及SIRT1激动剂在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。。

背景技术

自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织或器官损害所引起的疾病。根据其发病器官和发病机制的不同，自身免疫性疾病分为：(1)器官特异性自身免疫性疾病，其特点为组织器官的病理损害和功能障碍仅限于抗体或致敏淋巴细胞所针对的某一器官，例如溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)、克罗恩病(Crohn’sdisease,CD)等；(2)系统性自身免疫性疾病，其是由于抗原抗体复合物广泛沉积于血管壁等原因导致的全身多器官损害，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。

消化系统自身免疫性疾病多为器官特异性自身免疫性疾病，目前已知的由消化道系统本身引起的自身免疫性疾病有几十种，包括溃疡性结肠炎、克罗恩病等。这类疾病确切的发病机制尚不明确，可能是自身抗原发生改变、免疫隔离部位抗原的释放、性别、年龄、遗传等原因导致体内产生了自身抗体、免疫复合物沉着、补体减少等改变，从而导致消化系统靶器官损害。

溃疡性结肠炎作为一种消化系统自身免疫性疾病，仅在结直肠中发生，最常见的症状是直肠出血、腹泻和腹痛。轻度患者全身症状有限；中度患者有血性腹泻、腹部压痛、体重下降、发烧、贫血及频繁抽筋等症状；而重度患者除上述症状外，还可能有严重并发症，包括失血、中毒性巨结肠或结肠穿孔。一些溃疡性结肠炎患者还会有一些肠外表现，包括结节性红斑、化脓性肉芽肿、口腔溃疡、不对称性大关节炎、血清阴性脊柱关节炎、葡萄膜炎、硬化性胆管炎以及肾结石等。因其病程长，复发率高，治愈难度大，溃疡性结肠炎被世界卫生组织列为现代难治病之一。现代医学临床上治疗溃疡性结肠炎多采用水杨酸制剂、肾上腺皮质激素、免疫抑制剂等综合治疗，有一定效果，但是存在不良反应较大、价格昂贵等问题。因此，亟需开发出成本较低、毒副作用小且能够有效治疗溃疡性结肠炎的药物。

沉默信息调节因子2(silent information regulator 2，SIR2)是一种在酵母细胞中发现的能延缓酵母衰老、延长酵母寿命的基因。几乎所有物种中都存在与SIR2同源的基因，统一命名为Sirtuins。Sirtuins蛋白家族是一组第三类组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases,HDACs)，与第一和第二类HDACs不同，Sirtuins对曲古抑菌素(TrichostatinA,TSA)不敏感，且在其对赖氨酸残基去乙酰化的过程中，需要NAD

烟酰胺单核苷酸(NMN)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

发明内容

本发明的目的在于提供SIRT1激动剂和/或提高SIRT1表达水平的物质在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病(特别是溃疡性结肠炎)的药物中的用途。

本发明提供了SIRT1激动剂在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。

SIRT1激动剂是指能够增强SIRT1活性的物质。

进一步地，所述SIRT1激动剂为酰胺单核苷酸、白藜芦醇、白皮杉醇、SRT1720、SRT2104、1,4-DHP衍生物或UBCS039；其中1,4-DHP衍生物的结构为

本发明还提供了烟酰胺单核苷酸在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。

本发明还提供了提高SIRT1表达水平的物质在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。

进一步地，所述消化系统自身免疫性疾病为炎症性肠病。

进一步地，所述消化系统自身免疫性疾病为溃疡性结肠炎。

进一步地，所述消化系统自身免疫性疾病为克罗恩病。

进一步地，所述药物能够改善结肠长度缩短现象，和/或，所述药物能够改善脾脏增大现象，和/或，所述药物能够改善直肠出血现象，和/或，所述药物能够改善结肠组织形态结构的损坏情况。

进一步地，所述药物为口服制剂或注射制剂。

进一步地，所述口服制剂为汤剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂或片剂。

本发明还提供了一种预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物，它是以SIRT1激动剂和/或提高SIRT1表达水平的物质为活性成分，加上药学上可接受的辅料制得的制剂。

进一步地，所述SIRT1激动剂为烟酰胺单核苷酸、白藜芦醇、白皮杉醇、SRT1720、SRT2104、1,4-DHP衍生物或UBCS039；其中1,4-DHP衍生物的结构为

本领域公知的，白藜芦醇、白皮杉醇、SRT1720、SRT2104、1,4-DHP衍生物

白藜芦醇结构为：

白皮杉醇结构为：

SRT1720结构为：

本发明首次发现提高SIRT1表达水平及其活性在预防和治疗溃疡性结肠炎中起着重要作用。因此，SIRT1激动剂、提高SIRT1表达水平的物质能够用来制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的药物。

实验结果表明，烟酰胺单核苷酸(NMN)能够激活SIRT1。本发明首次发现，对溃疡性结肠炎小鼠施用NMN后，能够明显改善小鼠结肠长度缩短现象，明显改善小鼠脾脏增大现象，明显改善小鼠直肠出血现象，明显改善小鼠结肠组织形态结构的损坏情况。因此，NMN能够用来制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的药物。

本发明为毒副作用小且能够有效治疗消化系统自身免疫性疾病(例如溃疡性结肠炎、克罗恩病)的药物提供了一种新的选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1：DSS诱导SIRT1-TG小鼠溃疡性结肠炎及其表型分析示意图。

图2：各组对SIRT1-TG小鼠体重变化的影响(**p<0.01；***p<0.001)。

图3：各组对SIRT1-TG小鼠结肠长度的影响，上图为结肠照片，下图为结肠长度的定量分析结果(*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001)。

图4：各组小鼠抵抗DSS对结肠上皮结构的损伤的实验结果；HE染色显示结肠形态结构(比例尺＝100μm)。

图5：酶联免疫吸附法检测各组小鼠血液中IL-6的含量结果(*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001)。

图6：DSS诱导SIRT1

图7：各组小鼠体重的变化(***p<0.001)。

图8：各组小鼠直肠出血评分情况(0，无便血；1，极少便血；2，轻度便血；3，中度便血；4，严重便血；*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001)。

图9：各组小鼠结肠长度，左图为结肠照片，右图为结肠长度的定量分析(***p<0.001)。

图10：各组小鼠血液中FICT-Dextran含量的测试结果(**p<0.01；***p<0.001)。

图11：各组小鼠结肠组织石蜡切片HE染色结果(比例尺＝100μm)。

图12：体外检测DSS、NMN、Res对SIRT1蛋白活性的影响结果(**p<0.01；***p<0.001)。

图13：NMN干预DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎及其表型分析示意图。

图14：各组小鼠体重的变化(***p<0.001)。

图15：各组小鼠结肠长度，上图为结肠照片，下图为结肠长度的定量分析(***p<0.001；ns表示无显著差异)。

图16：各组小鼠脾脏重量变化；上图为脾脏照片，下图为脾脏重量的定量分析结果(*p<0.05；**p<0.01；ns表示无显著差异)。

图17：各组小鼠直肠出血评分情况(0，无便血；1，极少便血；2，轻度便血；3，中度便血；4，严重便血；**p<0.01；***p<0.001；ns表示无显著差异)。

图18：各组小鼠血液中FICT-Dextran含量的检测结果(*p<0.05；**p<0.01；ns表示无显著差异)。

图19：各组小鼠的结肠组织石蜡切片HE染色结果(比例尺＝100μm)。

图20：各组小鼠结肠组织石蜡切片进行免疫组织化学染色分析结果(比例尺＝100μm)。

图21：SIRT1-TG小鼠的构建与鉴定；(a)用于构建SIRT1-TG小鼠的重组DNA结构，包含牛角蛋白5启动子序列、兔β-珠蛋白内含子序列、小鼠SIRT1cDNA序列以及猿猴病毒40多聚腺苷酸序列；(b)SIRT1-TG小鼠基因型检测引物设计示意图；(c)PCR鉴定F0代SIRT1-TG小鼠，其中632bp大小的条带为内源性小鼠Rgs7基因片段，作为内参，216bp大小条带为外源小鼠SIRT1基因片段。

图22：SIRT1-TG小鼠各组织中SIRT1的表达情况；(a)PCR检测外源SIRT1 DNA；(b)RT-PCR检测SIRT1-TG小鼠肝脏、前列腺及皮肤中SIRT1 mRNA的表达；(c)免疫印迹检测SIRT1-TG小鼠肝脏、乳腺、皮肤及前列腺中SIRT1蛋白的表达情况；免疫组织化学分析检测野生型及SIRT1-TG小鼠皮肤(d)及结肠(e)中SIRT1蛋白的表达情况。

图23：SIRT1

具体实施方式

本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。

其中，硫酸葡聚糖(Dextran sulphate sodium,DSS)、烟酰胺单核苷酸(NMN)、白藜芦醇(Resveratrol，简称Res)均购买自市售产品。

本发明所有小鼠实验都是严格遵照国家科技委员会发布的《实验动物管理条例》执行的。

本发明实验用动物：

一、C57BL/6小鼠(购买于成都达硕生物科技有限公司)，体重20-22g，6周龄，作为野生型(WT)小鼠；

二、构建的上皮细胞特异性过表达鼠源SIRT1的转基因小鼠，命名为SIRT1-TG小鼠；构建方法如下：

构建前的小鼠：C57BL/6小鼠。

由牛角蛋白5(Bovine keratin 5,BK5)启动子系统驱动上皮细胞中特异表达SIRT1的转基因小鼠，其重组DNA结构模型如图21(a)所示。先构建SIRT1转基因重组载体，通过对C57BL/6小鼠进行显微注射、受精卵移植后得到F0代SIRT1转基因小鼠。提取鼠尾DNA，按照图21(b)所示的示意图设计引物(PCR产物为216bp)，通过PCR鉴定小鼠基因型(图21(c))，筛选出3只雄性及1只雌性共4只F0代SIRT1转基因阳性小鼠，分别编号为T(♀)、R(♂)、L(♂)、N(♂)。

将此4只F0代SIRT1转基因小鼠与野生型小鼠杂交，得到的F1代SIRT1转基因阳性小鼠(图22(a))再与野生型小鼠杂交，如此繁殖3代从而得到能稳定遗传基因型的SIRT1转基因小鼠。取这4个品系的第3代阳性小鼠皮肤、前列腺及肝脏组织，提取总RNA，经反转录后进行RT-PCR。结果如图22(b)所示，R(♂)品系小鼠的三种组织中均未检测到SIRT1 mRNA的表达，因此剔除R(♂)品系；而其他3个品系小鼠中都检测到SIRT1 mRNA的表达，但N(♂)品系小鼠SIRT1 mRNA的表达水平相对最高，因此选取这个品系的小鼠检测其SIRT1蛋白的表达。

取N(♂)品系SIRT1转基因小鼠皮肤、乳腺及肝脏组织，提取总蛋白，蛋白免疫印迹结果(图22(c))显示，转基因小鼠的这3种组织中SIRT1表达量均高于对照组。同样，皮肤及结肠组织的免疫组织化学结果(图22(d)、(e))显示，SIRT1转基因小鼠的皮肤及结肠中SIRT1的蛋白水平显著高于野生型小鼠。上述结果表明，SIRT1转基因小鼠构建成功。

综合SIRT1 mRNA及蛋白的表达水平，选取N(♂)品系用于作为实施例中的SIRT1-TG小鼠。

三、构建的去乙酰化酶活缺陷的SIRT1

构建前的小鼠：C57BL/6小鼠。

按照如图23(a)所示的CRISPR/Cas9基因打靶策略，将小鼠SIRT1蛋白的第169位苏氨酸(Thr/T)突变为谷氨酸(Glu/E)，相对应的碱基由ACT变为GAA，构建点突变基因敲入小鼠，命名为SIRT1

实施例1：SIRT1对DSS诱导的SIRT1转基因小鼠溃疡性结肠炎的作用

1、实验分组

本实施例中小鼠实验分为4组，每组5只，分别为：

(1)给与正常饮用水的野生型小鼠组(WT+H

(2)给与含3％DSS饮用水的野生型小鼠组(WT+DSS)；

(3)给与正常饮用水的SIRT1转基因小鼠组(SIRT1-TG+H

(4)给与含3％DSS饮用水的SIRT1转基因小鼠组(SIRT1-TG+DSS)。

2、构建DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型

根据文献(A.S.Wellman,M.R.Metukuri,N.Kazgan,et al.IntestinalEpithelial Sirtuin 1Regulates Intestinal Inflammation During Aging in Mice byAltering the Intestinal Microbiota[J].Gastroenterology,2017,153(3):772-786)报道，选取4个月大的野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠用于构建小鼠溃疡性结肠炎模型，具体操作如下：将分子量大小为40kDa的DSS以3％(质量/体积)的浓度溶于小鼠饮用水中，让其自由饮用，连续给药诱导8天后，更换为正常饮用水，在第9天参照实验动物处死标准操作规程处死小鼠，随后检测溃疡性结肠炎相关各项指标(图1)。实验分组如上所述。

3、实验结果

3.1、DSS对SIRT1-TG小鼠体重的影响显著小于对照小鼠

体重减轻是小鼠溃疡性结肠炎的一个典型表型。在DSS诱导小鼠结肠炎过程中，每天检测小鼠的体重变化。如图2所示，给与正常饮用水的野生型小鼠(WT+H

3.2、DSS对SIRT1-TG小鼠结肠长度的影响显著小于对照小鼠

结肠长度缩短也是小鼠溃疡性结肠炎的一个典型表型。在DSS诱导小鼠结肠炎后，取结肠测量其长度。如图3所示，给与正常饮用水的野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠的结肠长度没有明显差别；而给与含3％DSS饮用水的野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠的结肠长度均出现显著缩短，且SIRT1转基因小鼠结肠长度要显著长于野生型小鼠。

3.3、SIRT1-TG小鼠能够显著抵抗DSS对结肠上皮结构的损伤

取相同部位的结肠组织(距离小鼠肛门1厘米处)，石蜡包埋并切片，进行HE染色。如图4所示，给与正常饮用水的野生型小鼠(WT+H

3.4、SIRT1-TG小鼠中DSS诱导的IL-6表达显著减少

炎症细胞因子的增加也是小鼠溃疡性结肠炎的一个典型表型。利用酶联免疫吸附分析检测小鼠血液中炎症细胞因子白介素-6(IL-6)的水平以反映小鼠体内炎症情况，结果如图5所示，给与正常饮用水的野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠血液中IL-6水平都处在一个很低水平；而给与含3％DSS饮用水的野生型和SIRT1转基因小鼠血液中IL-6的含量显著上升，但是野生型小鼠血液中IL-6含量显著高于SIRT1转基因小鼠。

上述实验结果表明，在小鼠上皮细胞中特异性过表达SIRT1能够显著缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎症状，SIRT1在DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎中起着保护作用。

实施例2：SIRT1对DSS诱导的SIRT1

1、实验分组

本实施例中小鼠实验分为4组，每组5只，分别为：

(1)给与正常饮用水的野生型小鼠组(WT+H

(2)给与含3％DSS饮用水的野生型小鼠组(WT+DSS)；

(3)给与正常饮用水的SIRT1

(4)给与含3％DSS饮用水的SIRT1

2、构建DSS诱导SIRT1

用4个月龄的野生型小鼠或SIRT1

3、实验结果

3.1、DSS对SIRT1

在DSS诱导结肠炎过程中，每天检测小鼠的体重变化。结果如图7所示，比起给与正常饮用水的小鼠，给予含3％DSS饮用水的野生型和SIRT1

3.2、SIRT1

直肠出血是小鼠溃疡性结肠炎的一个重要表型，随着小鼠溃疡性结肠炎的发生发展，其直肠出血逐渐增加，体现在其粪便中的隐血含量逐渐增加，甚至后期出现肉眼可见的便血症状。在DSS诱导小鼠结肠炎过程中，每天利用便隐血检测试剂盒检测实验小鼠的便隐血情况。结果如图8所示，随着诱导时间的增长，3％DSS饮用水实验组的野生型和SIRT1

3.3、DSS对SIRT1

在DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎后，取结肠测量其长度。如图9所示，给与正常饮用水的野生型小鼠和SIRT1

3.4、DSS对SIRT1

肠道屏障功能损伤是导致肠道炎症反应的重要原因。为了探究SIRT1功能下调对肠道屏障功能的影响，通过检测小鼠血液中带异硫氰酸荧光素的葡聚糖(FITC-Dextran)含量，检测实验小鼠肠道通透性。检测方法为：各组小鼠禁食8个小时后，然后按每千克体重给药400mg的剂量以灌胃的方式给与FD4，4小时后收集血样，检测血液中的荧光强度。

检测结果如图10所示，3％DSS饮用水实验组的野生型和SIRT1

3.5、DSS对SIRT1

实验小鼠结肠组织石蜡切片HE染色结果(图11)显示，经DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎，野生型小鼠结肠组织形态结构损坏严重。而且，相对于野生型小鼠，SIRT1

上述实验结果表明，在小鼠体内原位敲入功能缺陷性的SIRT1

实施例3：NMN对SIRT1蛋白活性的影响

1、实验方法

在体外检测DSS、NMN(烟酰胺单核苷酸)、Res(白藜芦醇，一种已知的SIRT1激动剂)对SIRT1蛋白活性的影响，检测方法为：分别用0.8mM NMN或100mM Res处理经4％DSS预处理的Caco2细胞48h，裂解细胞并用SIRT1特异性抗体免疫共沉淀出SIRT1蛋白，添加等量SIRT1蛋白与底物p53的反应体系中，室温孵育1小时后，添加终止缓冲液，37℃孵育1小时终止反应。测量溶液中的荧光强度。

2、实验结果

检测结果(图12)显示，DSS能够显著降低SIRT1的活性，而NMN以及作为阳性对照的SIRT1激活剂白藜芦醇(Res)能够回复DSS下调的SIRT1活性。

上述实验结果表明，NMN能够上调SIRT1的活性，是一种SIRT1激动剂。

实施例4：NMN通过激活SIRT1改善DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎

1、实验分组

本实施例中小鼠实验分为9组，每组5只，分别为：

(1)给与正常饮用水的野生型小鼠组(WT+H

(2)给与含3％DSS饮用水的野生型小鼠组(WT+DSS)；

(3)给与含3％DSS饮用水并用NMN干预的野生型小鼠组(WT+DSS+NMN)；

(4)给与正常饮用水的SIRT1转基因小鼠组(SIRT1-TG+H

(5)给与含3％DSS饮用水的SIRT1转基因小鼠组(SIRT1-TG+DSS)；

(6)给与含3％DSS饮用水并用NMN干预的SIRT1转基因小鼠组(SIRT1-TG+DSS+NMN)；

(7)给与正常饮用水的SIRT1

(8)给与含3％DSS饮用水的SIRT1

(9)给与含3％DSS饮用水并用NMN干预的SIRT1

其中，NMN的干预策略为：将NMN溶于生理盐水中，配制为50mg/mL的母液，-80℃保存备用。在DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎过程中，每天腹腔注射0.3mg/g体重的NMN。

2、实验方法

选取4个月大的野生型小鼠、SIRT1转基因小鼠以及SIRT1

3、实验结果

3.1、NMN改善DSS诱导的小鼠体重减少

在DSS诱导小鼠结肠炎过程中，每天检测小鼠的体重变化。从图14可以看到，与对照组相比，3％DSS饮用水组小鼠体重显著减轻。在DSS诱导小鼠结肠炎过程中给与NMN干预，结果显示，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠体重减轻情况得到显著缓解；而SIRT1

3.2、NMN改善DSS诱导的小鼠结肠缩短

解剖小鼠，取结肠并测量其长度。如图15所示，与对照组相比，3％DSS饮用水组小鼠结肠长度显著缩短。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠结肠长度缩短现象得到显著改善；但是SIRT1

3.3、NMN改善DSS诱导的小鼠脾脏增大

解剖小鼠，取脾脏并测量其重量。如图16所示，与对照组相比，3％DSS饮用水组小鼠脾脏显著增大，表明小鼠体内炎症反应显著增强。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠脾脏增大现象得到显著改善；但是SIRT1

3.4、NMN改善DSS诱导的小鼠直肠出血

每天用便隐血试剂盒检测各组小鼠的便隐血情况，结果如图17所示，3％DSS饮用水组小鼠便隐血得分显著高于对照组，表明3％DSS饮用水组小鼠具有严重的直肠出血症状。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠便隐血得分显著降低，表明其直肠出血现象得到显著缓解；但是SIRT1

3.5、NMN改善DSS诱导的小鼠肠道通透性增加

检测方法：DSS诱导溃疡性结肠炎后，所有小鼠禁食8个小时，然后以灌胃的方式给与按每千克体重给药400mg的剂量给与FD4，4小时后收集血样，检测血液中的荧光强度。

FITC-dextran检测小鼠肠道通透性结果(图18)显示，3％DSS饮用水组小鼠血液中FITC-dextran含量显著高于对照组，表明3％DSS饮用水组小鼠肠道通透性增强。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠血液中FITC-dextran含量显著减少，表明其肠道通透性得到显著减弱；但是SIRT1

3.6、NMN改善DSS对小鼠结肠上皮结构的损坏

结肠组织石蜡切片HE染色结果(图19)显示，与对照组相比，3％DSS饮用水组小鼠结肠组织形态结构受损严重。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠结肠组织形态结构的损坏情况得到显著改善；但是SIRT1

3.7、NMN抑制DSS诱导的小鼠结肠组织中SIRT1,β-TrCP1,E-cadherin,Occludin蛋白下调和Snail蛋白上调

利用免疫组织化学分析检测小鼠结肠组织中SIRT1,β-TrCP1,Snail,E-cadherin和Occludin的表达情况。对结肠组织石蜡切片进行免疫组织化学染色分析(图20)发现，与对照组相比，3％DSS诱导溃疡性结肠炎后，小鼠结肠组织中的SIRT1,β-TrCP1以及紧密连接蛋白E-cadherin和Occludin的表达量显著下调，而Snail的表达量显著上调。NMN干预后，野生型小鼠和SIRT1转基因小鼠结肠组织中这些蛋白的表达量得到显著回复；但是SIRT1

上述实验结果表明，NMN通过激活SIRT1改善溃疡性结肠炎；对溃疡性结肠炎小鼠施用NMN后，能够明显改善小鼠结肠长度缩短现象，明显改善小鼠脾脏增大现象，明显改善小鼠直肠出血现象，明显改善小鼠结肠组织形态结构的损坏情况。NMN能够用于制备预防和治疗溃疡性结肠炎的药物。

综上，本发明提供了SIRT1激动剂在制备预防和/或治疗消化系统自身免疫性疾病的药物中的用途。本发明首次发现提高SIRT1表达水平及其活性在预防和治疗溃疡性结肠炎中起着重要作用，提高SIRT1表达水平及其活性能够明显改善小鼠结肠长度缩短现象，明显改善小鼠脾脏增大现象，明显改善小鼠直肠出血现象，明显改善小鼠结肠组织形态结构的损坏情况。因此，SIRT1激动剂、提高SIRT1表达水平的物质能够用来制备预防和/或治疗溃疡性结肠炎的药物。本发明为毒副作用小且能够有效治疗消化系统自身免疫性疾病(例如溃疡性结肠炎、克罗恩病)的药物提供了一种新的选择。