一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒及工程菌

摘要

本发明提供了的一种适于大肠杆菌高效表达的IsDNA序列、制备方法、重组表达质粒及工程菌，其表达产物具有高效催化吲哚促进靛蓝形成的作用；基于马蓝植株细胞色素P450mRNA序列(GenbankID：MG857655.1)的核酸和氨基酸序列信息，经过大肠杆菌(E.coli)密码子偏好优化获得；该IsDNA序列经化学合成后，运用亚克隆技术将合成的IsDNA序列插入到质粒pET‑22b中构建重组表达质粒，将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)，获得基因工程菌BL21(DE3)/IsDNA。该工程菌可在大肠杆菌中实现靛蓝色素生物合成，为后续应用生物合成技术实现靛蓝的工业化生产奠定基础。