一种猪囊等孢球虫CsENO2蛋白与宿主细胞未知蛋白互作的方法

摘要

本发明公开了一种猪囊等孢球虫CsENO2蛋白与宿主细胞未知蛋白互作的方法。该方法是利用Enos引物并以pET30(a)‑enolase为模板进行PCR反应，获得猪囊等孢球虫CsENO2基因，然后将猪囊等孢球虫CsENO2基因以分子克隆的方式接到真核表达载体pcDNA3.1上，并利用转染的方式送到细胞内，通过真核表达CsENO2蛋白后,以CsENO2抗体利用免疫共沉淀的方法将细胞内互作蛋白抓下来，最终经由SDS‑PAGE分析增加的条带，蛋白质条带经由质谱仪分析后即可确认互作蛋白的身份。本发明方法的技术门坎较低，只需基本的转染技术以及免疫共沉淀技术即可进行分析；同时，本发明不易存在假阳性的问题。