一种基于RNA连接标签的低样本量m6A高通量测序方法

摘要

本发明公开了一种基于RNA连接标签的低样本量m6A高通量测序方法，属于RNA的高通量测序领域。本发明方法包括以下步骤：将含有不同barcode标签序列的3’linker进行磷酸化处理、腺苷化处理；腺苷化处理后的3’‑linker分别连接到不同来源的打断后的RNA样品上，混合样品后留出input对照样品用于RNA‑seq，剩余混合样品进行m6A抗体免疫沉淀得到IP样品用于m6A‑seq，最终得到二代测序文库并测序；根据barcode序列对测序数据进行拆分和分析，得到初始单个样本的RNA‑seq及m6A‑seq信息。本发明可同时实现多个临床低样本量样品的m6A抗体免疫沉淀以及建库测序。