一种冻存液组合物、冻存液及类器官冻存方法

摘要

本发明提供一种冻存液组合物、冻存液及类器官冻存方法。所述冻存液组合物包括：低级脂肪醇、低聚异麦芽糖、白蛋白、ROCK抑制剂、原代细胞抗生素。冻存液按照终浓度的组成包括：低级脂肪醇，10‑50％(v/v)；低聚异麦芽糖，0.01‑0.5g/ml；白蛋白，0.01‑0.2g/ml；ROCK抑制剂，0.1‑10μM；原代细胞抗生素，0.2‑20mg/ml；溶剂为Advanced DMEM/F12培养基。类器官冻存方法包括：将培养得到的类器官去掉原培养基后加入细胞回收液反应5‑10min；在体系中进一步加入无菌Hank’s平衡盐溶液混匀，离心后保留沉淀；在沉淀中加入上述类器官冻存液后程序性降温。采用本发明的冻存液及方法对类器官进行冻存，在冻存复苏条件下能维持类器官原始细胞干性，有效保留类器官的冻存前的分化特征。