一种东革阿里提取物及其在防治前列腺炎药物中的应用

摘要

本发明公开了一种东革阿里提取物及其在防治前列腺炎药物中的应用，所述东革阿里提取物的所述东革阿里提取物的宽缨酮的含量在30‑65wt％，Eurycomanol的含量在11％‑37wt％，其余为不可避免的杂质。本发明从天然资源东哥阿里中得到的提取物具有防治前列腺炎的作用。

说明书

技术领域

本发明是关于东革阿里提取物的医药新用途，具体的说是东革阿里提取物在制备前列腺炎疾病药物中的应用，也涉及该药物的药物制剂，本发明属于医药技术领域。

背景技术

前列腺是男性的主要附属性腺之一，而前列腺炎是骨盆区域的疼痛或伴排尿不适症状的一组疾病，主要发生在20-40岁的男性青年人中，发病率在泌尿外科中约占25％～30％，是一种多发性疾病。非细菌性前列腺炎(chronic non-bacterialprostatitis，CNP)是最常见的前列腺炎类型，占临床前列腺炎发病率的90％以上，尽管有多种治疗方法，但很难治愈且容易复发，给患者带来极大的痛苦，成为世界性关注的难治疾病之一。因此，一个安全有效的治疗前列腺炎疾病的药物，正是前列腺炎患者所需要的。

东革阿里(Eurycoma longifoliajack)为苦木科东革阿里属植物，广泛分布于马来西亚、印度尼西亚、越南等东南亚国家。在原产地被称为马来西亚人参等，与燕窝、漆器一起并称为马来西亚三大国宝。东革阿里除了具有抗癌、抗疟疾、改善男性性功能障碍等功效外，还能提升人体机能、抗焦虑、抗骨质疏松、镇痛抗炎、抗菌、抗寄生虫、调节免疫、抗血管生成及治疗糖尿病。因此，东革阿里具有极好的应用前景和开发前途。

本发明完成前未发现有关东革阿里提取物作为防治前列腺炎的药物的报道，也未发现东革阿里提取物用于防治前列腺炎的临床方面应用。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种可以防治前列腺炎的药物，具体地说，东革阿里提取物具有在制备前列腺炎药物中的新用途。更具体地东革阿里提取物在预防和治疗前列腺炎药物及保健品中的应用。

一种东革阿里提取物，所述东革阿里提取物的宽缨酮的含量在30-65wt％，Eurycomanol的含量在11％-37wt％，其余为不可避免的杂质。

进一步的改进，所述东革阿里提取物的提取方法如下所示：

步骤一、将东革阿里药材粉碎；

步骤二、用含水乙醇或含水甲醇溶液浸泡东革阿里药材，得到浸泡液，浸泡液过滤得到滤液；其中含水乙醇或甲醇溶液与东革阿里药材的体积质量比5-30:1ml/g，浸泡温度为80-100℃；含水乙醇或含水甲醇溶液中乙醇或甲醇的体积浓度为60％-100％；

步骤三、将滤液浓缩至滤液原体积的1/10-1/20，得到粗提取物；

步骤四、将粗提取物用硅胶粉拌样；粗提取物与硅胶粉的体积质量比为1-10：1-50ml/g，在硅胶柱上依次用以下溶剂进行梯度洗脱：(a)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的体积比例小于50％；(b)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为60-85％；(c)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为90-100％，得到洗脱液浓缩；

步骤五、得到的洗脱液浓缩后，在凝胶色谱柱上采用甲醇溶剂进行洗脱，薄层色谱追踪宽缨酮，合并含有宽缨酮的洗脱液，浓缩干燥回收溶剂得东革阿里提取物。

进一步的改进，所述步骤二中，含水乙醇或含水甲醇溶液浸泡时用量为东革阿里药材重量的5-25倍；浸泡时间为1-3小时。

上述的东革阿里提取物在制备防治前列腺炎疾病药物中的应用。

进一步的改进，所述药物包括东哥阿里提取物和医药辅料。

进一步的改进，所述医药辅料包括药用赋形剂，药用赋形剂包括填充剂、崩解剂、黏合剂、润湿剂和润滑剂；填充剂包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙中的一种或多种；崩解剂包括羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联聚维酮中的一种或多种；药用赋形剂与东哥阿里提取物混合形成片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸剂，膏剂或栓剂直肠给药制剂中的一种。

本发明突出贡献在于：从天然资源东革阿里中得到的提取物具有防治前列腺炎的作用。提供一种东革阿里提取物的制备方法及新医药用途，这是本发明最突出的贡献及最显著的创新性。

由于本发明首次公开了东革阿里具有防治前列腺炎的作用，因此，将东革阿里提取物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂具有治疗前列腺炎的作用，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，均具有防治前列腺炎的作用，均在本发明的保护范围。

附图说明

图1为实施例3东革阿提取物的HPLC图谱；

图2为东革阿里提取物对前列腺H&E染色的影响图；

图3为宽缨酮的化学结构式；

图4为Eurycomanol的化学结构式。

具体实施方式

实施例1

将东革阿里药材粉碎，用70％乙醇溶液浸泡东革阿里药材，乙醇用量为东革阿里药材重量的20倍，浸泡时间为2小时，浸泡温度为90℃，过滤得浸泡滤液，将滤液浓缩至滤液原体积的1/10，得到粗提取物；将粗提取物用硅胶粉拌样，在硅胶柱上依次用以下溶剂进行梯度洗脱：(a)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为85％，(b)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为90％；(b)得到的洗脱液浓缩后，在凝胶色谱柱上采用甲醇溶剂进行洗脱，薄层色谱追踪宽缨酮，合并含有宽缨酮的洗脱液，浓缩回收溶剂得东革阿里提取物。HPLC色谱检测其中宽缨酮和Eurycomanol的含量分别为65％和11％。

实施例2

将东革阿里药材粉碎，用70％乙醇溶液浸泡东革阿里药材，乙醇用量为东革阿里药材重量的25倍，浸泡时间为2小时，浸泡温度为80℃，过滤得浸泡滤液，将滤液浓缩至滤液原体积的1/10，得到粗提取物；将粗提取物用硅胶粉拌样，在硅胶柱上依次用以下溶剂进行梯度洗脱：(a)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯占60％，(b)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为100％；(b)得到的洗脱液浓缩后，在凝胶色谱柱上采用甲醇溶剂进行洗脱，薄层色谱追踪宽缨酮，合并含有宽缨酮的洗脱液，浓缩回收溶剂得东革阿里提取物。HPLC色谱检测其中宽缨酮和Eurycomanol的含量分别为32％和11％。

实施例3

将东革阿里药材粉碎，用70％乙醇溶液浸泡东革阿里药材，乙醇用量为东革阿里药材重量的25倍，浸泡时间为2小时，浸泡温度为80℃，过滤得浸泡滤液，将滤液浓缩至滤液原体积的1/10，得到粗提取物；将粗提取物用硅胶粉拌样，在硅胶柱上依次用以下溶剂进行梯度洗脱：(a)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯占85％，(b)二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，乙酸乙酯的比例为95％；(b)得到的洗脱液浓缩后，在凝胶色谱柱上采用甲醇溶剂进行洗脱，薄层色谱追踪宽缨酮，合并含有宽缨酮的洗脱液，浓缩回收溶剂得东革阿里提取物。HPLC色谱检测其中宽缨酮和Eurycomanol的含量分别为30％和37％。HPLC图谱见1。

实施例4

东革阿里提取物具有防治前列腺炎的作用，通过以下药效学试验例得到证实。

1.东革阿里提取物的抗炎作用

1.1对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响

取小鼠50只，雄性，体重(20±2)g，随机分成5组，按照表1灌胃给药，每天1次，连续7天，于末次给药1h后，将二甲苯0.3mL滴于小鼠右耳，左耳不涂做对照。2h后将小鼠颈部脱臼处死，用直径9mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，称重，计算左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较组间差异。结果见表1。

表1对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05，与对照组比较

从表1可见，实施例1，实施例2，实施例3获得的东革阿里提取物对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀均具有抑制作用，表明它们均具有抗炎作用。同样，阳性对照药物吲哚美辛灌胃后，也具有显著的抗炎作用。

1.2东革阿里提取物对动物实验性非细菌性前列腺炎的治疗作用

取雄性大鼠60只，随机分为6组，用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，无菌条件下，切开下腹部，用微量注射器于前列腺左右侧腹叶中各注射完全弗氏佐剂50微升，正常对照组在前列腺左右侧腹叶中各注射生理盐水50微升，用可吸收缝合线逐层缝合，关闭腹腔，大鼠置37摄氏度实验台上复苏。大鼠每日灌胃给东革阿里提取物一次(东革阿里提取物，用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液配制成混悬液，置4摄氏度冰箱保存)，实验分组及给药剂量见表2，共给药28天。第29天，所有大鼠称重，然后用1％戊巴比妥钠腹腔麻醉，负压管腹股动脉取血，分离包绕在前列腺表面脂肪组织和包膜，以及后面的输精管，将前列腺完整取下，用生理盐水冲洗干净，无菌纱布拭干，称重。样本处理：血液样本静置数小时后，离心留取上清即为血清，于-80摄氏度冷冻保存备用；前列腺组织称重后，用干净的剪刀剪成小块，大部分置于冻存管，立即放入液氮中速冻半个小时，之后转移至-80摄氏度冷冻保存备用；一部分留作石蜡包埋用，于备好的4％多聚甲醛溶液中固定。

表2东革阿里提取物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺指数的影响(n＝10，X±SD)

*P＜0.05，与模型组比较；△P＜0.05，与空白组比较。

从表2可看出，与正常对照组相比，模型组大鼠前列腺指数明显升高，说明此种造模方法给实验小鼠的前列腺的正常生长带来影响。与模型组相比，前列康组和实施例1、实施例2、实施例3的东革阿里提取物组前列指数显著低于模型对照组(P＜0.05)。

表3东革阿里提取物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠血清中TNF-α和IL-6的影响(n＝10，X±SD)

*P＜0.05，与模型组比较；△P＜0.05，与空白组比较。

从表3可看出，与正常对照组组相比，模型组大鼠血清中TNF-α和IL-6水平显著增加(P＜0.05)。与模型组相比，实施例1、实施例2、实施例3的东革阿里提取物组均可以显著减少模型大鼠血清中TNF-α和IL-6水平(P＜0.05)，前列康组也可以明显减少模型大鼠血清中TNF-α和IL-6水平(P＜0.05)。

由图2可见，空白组大鼠前列腺实质内腺体排列及分布正常，数量多；腺泡形态不规则，多皱裙，腔内可见粉红色分泌物，即前列腺凝固体；间质内结缔组织可见平滑肌，未见炎细胞浸润。模型组大鼠前列腺实质内腺泡数量明显减少，腔体减少，腺腔内前列腺凝固体明显减少，甚至消失不见，腺上皮局灶性坏死脱落，腺腔基膜被破坏，有大量炎症细胞及脱落的腺上皮细胞。前列康组大鼠前列腺实质内腺泡数量明显减少，腔体减少，腺腔内前列腺凝固体明显减少，有较多炎症细胞浸润。东革阿里提取物组鼠前列腺整体的组织学结构有所改善，且呈剂量相关性，炎性细胞浸润数目显著下降。

由以上实施例可以得出，东革阿里提取物能够有效的治疗非细菌性前列腺炎，本发明提供了东革阿里提取物的一种新的用途。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。