N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的结晶形式及其合成方法

摘要

本发明公开了N‑(1‑((2‑(二甲基氨基)乙基)氨基)‑2‑甲基‑1‑氧代丙‑2‑基)‑4‑(4‑(2‑甲基‑5‑((2S,3R,4R,5S,6R)‑3,4,5‑三羟基‑6‑(甲硫基)四氢‑2H‑吡喃‑2‑基)苯甲基)苯基)丁酰胺及其盐、溶剂化物和共晶体的制备方法和固体形式。

说明书

技术领域

本公开涉及N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的结晶固体形式。

背景技术

2型糖尿病是一种以高血糖为特征的慢性疾病，由肝葡萄糖生成、胰岛素分泌不足和/或外周胰岛素抗性引起。近年来，钠葡萄糖共转运蛋白(SLGT)的抑制成为治疗糖尿病的一种有吸引力的方法，所述SLGT存在两种类型(SGLT1和SGLT2)。尽管目前市场上的SGLT抑制剂(例如坎格列净、达格列净和恩格列净)靶向SGLT2，但靶向SGLT1的药物前景可观。例如，已显示靶向SGLT1和2两者的索格列净在1型糖尿病的治疗中具有潜在功效。参见，例如Garg,S.K.等，“在1型糖尿病患者中添加到胰岛素的索格列净的效应”(EffectsofSotagliflozin Added to Insulin in Patients with Type 1Diabetes)，NewEnglandJ.Med.,9月13日,2017。

在美国专利号9,200,025中公开了在给药到小鼠时表现出HbA1c的剂量依赖性降低的其他SGLT1抑制剂。尽管此类测试可以帮助鉴定先导药物开发候选物，但必需进行大量另外的研究，以将在实验室规模上制备的化合物变成可以大规模制造的具有允许商业化药物配制的一致性、纯度和物理特性的化合物。

同一化合物的不同固体形式可以具有实质上不同的性质。例如，药物的无定形形式可能表现出与其结晶形式不同的溶解和生物可利用性特性，结晶形式的同质异像体也可能在它们的溶解度、热稳定性和其他特性方面有所不同，并且化合物的不同盐和共晶体可能比其他盐和共晶体更容易以更高纯度制造。药物的不同固体形式可能具有不同的操作性质(例如流动性、可压缩性)、溶解速率、溶解度和稳定性，所有这些性质都可影响剂型的生产。

化合物可能以一种或多种盐、结晶形式或共晶体存在，但是它们的存在和特性无法确定地预测。作为晶格中分子或离子的排布或构象的结果，不同的形式可能具有不同的物理性质例如熔化温度、熔化热、溶解度、溶解速率和/或振动光谱。同质异像体表现出的物理性质差异可能影响药物参数例如储存稳定性、可压缩性、密度(在制剂和产品制造中重要)和溶解速率(生物可利用性的重要因素)。稳定性的差异可能由化学反应性变化(例如差异氧化，使得剂型在由一种同质异像体组成时比与由另一种同质异像体组成时变色更快)、力学变化(例如由于动力学上有利的同质异像体转变成热力学上更稳定的同质异像体，片剂在储存时粉碎)或两者(例如一种同质异像体的片剂在高湿度下更容易崩解)引起。另外，结晶形式的物理性质在加工中可能是重要的；例如，一种同质异像体可能更容易形成溶剂化物或可能难以过滤和洗掉杂质(例如同质异像体之间粒子形状和尺寸分布可能不同)。同质异像体可以通过本领域已知的各种不同方法来表征，包括X-射线粉末衍射和熔点。

不存在用于制备化合物的所有可能的固体形式的标准程序，并且一种形式的影响其用作药物的化学和物理性质(例如稳定性、流动性)不能被确定地预测。然而，这些特性在药物制剂中发挥至关重要的作用。例如，抗反转录病毒药物利托那韦的胶囊，在发现制成的所述药物的同质异像体形式在胶囊内转变成热力学上更稳定但治疗有效性较差的形式后，在1990年代后期撤出了市场。参见例如S.L.Morisette等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.100(5):2180–84。由于诸如此类的原因，在批准含有新药物质的产品之前，监管机构(例如美国食品和药物应对局)可能要求鉴定所述新药物质的固体(例如同质异像体)形式。

发明内容

本公开涉及固体形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺：

及其可药用盐、溶剂化物和共晶体。

具体的固体形式包括N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的氨基酸共晶体。具体的氨基酸是L-脯氨酸。

本公开还涉及包含本文中描述的固体形式的药物组合物。

本公开还涉及制造N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺及其可药用盐、溶剂化物和共晶体的方法。

本公开还涉及治疗、应对和预防各种不同疾病和病症的方法，所述方法包括使用本文中描述的固体形式。具体的方法包括使用固体形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺来治疗、预防或应对代谢疾病或障碍。其他方面包括固体形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的用途，其用于制造在治疗、预防或应对代谢疾病或障碍中使用的药物。

附图说明

图1是在本文中被称为II型N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的X-射线粉末衍射(XRPD)图。所述衍射图使用Bruker D8系统，使用铜Kα辐射(40kV/40mA)、2-50°的2θ范围、37s的步进时间和具有3°窗口的LynxEye检测器，在室温下获得。

图2是在本文中被称为III型N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的XRPD图。所述衍射图使用Bruker D8系统，使用铜Kα辐射(40kV/40mA)、2-50°的2θ范围、37s的步进时间和具有3°窗口的LynxEye检测器，在室温下获得。

具体实施方式

本公开部分涉及固体(例如结晶)形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺及其可药用盐、溶剂化物和共晶体。所述化合物是1型钠葡萄糖共转运蛋白(SGLT1)的强力抑制剂，并且可能在糖尿病和其他代谢障碍的治疗中有用。参见例如美国专利9,200,025的实施例6.39、6.40。

定义(5.1)

除非另有指明，否则术语“烷基”意味着具有1至20个(例如1至10或1至4个)碳原子的直链或支链烃。具有1至4个碳原子的烷基组成部分被称为“短链烷基”。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4,4-二甲基戊基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基和十二烷基。

除非另有指明，否则术语“芳基”意味着由碳或氢原子构成的芳香环或芳香族或部分芳香族的环系统。芳基组成部分可能包含结合或稠合在一起的多个环。特定芳基组成部分在它们的环中包含6至12个碳原子，并且被称为C

除非另有指明，否则术语“卤素”和“卤”涵盖氟、氯、溴和碘。

除非另有指明，否则术语“钯预催化剂”是指当与适合的配体组合时形成钯催化剂的钯化合物。

还应该指出，图中示出的任何具有未满足的化合价的原子均被假设附连有足够的氢原子以满足所述化合价。此外，如果化合价允许，用与一条虚线平行的一条实线描绘的化学键涵盖单键和双键两者(例如芳香族键)。表示具有一个或多个立体中心的化合物但未指明立体化学(例如用粗线或虚线)的结构涵盖了纯的立体异构体及其混合物(例如外消旋混合物)。同样地，具有一个或多个立体中心但未指定那些中心的立体化学的化合物的名称，涵盖了纯的立体异构体及其混合物。

“溶剂化物”是指本文中提供的化合物或其盐或共晶体，其还包含化学计算量或非化学计算量的通过非共价分子间力结合的溶剂。在所述溶剂是水的情况下，所述溶剂化物是水合物。

术语“无定形”或“无定形形式”意指所讨论的物质、组分或产物当例如通过XRPD确定时基本上不是结晶的，或者所讨论的物质、组分或产物当例如通过显微镜观察时不是双折射的。在某些实施方式中，包含无定形形式的物质的样品可能基本上不含其他无定形形式和/或结晶形式。

术语“反溶剂”是指添加到溶剂以降低化合物在该溶剂中的溶解度，在某些情况下引起所述化合物沉淀的液体。

术语化合物的“结晶形式”可以是指作为游离酸的所述化合物、作为游离碱的所述化合物、作为所述化合物的酸加成盐、所述化合物的碱加成盐、所述化合物的络合物、所述化合物的溶剂化物(包括水合物)、所述化合物的笼形包合物或所述化合物的共晶体的任何结晶形式。术语化合物的“固体形式”是指所述化合物的任何结晶形式或作为游离酸的所述化合物、作为游离碱的所述化合物、作为所述化合物的酸加成盐、所述化合物的碱加成盐、所述化合物的络合物、所述化合物的笼形包合物、共晶体、所述化合物的溶剂化物(包括水合物)或所述化合物的共沉淀物的任何无定形形式。在许多情况下，术语“结晶形式”和“固体形式”可以是指可药用的那些形式，包括例如可药用加成盐、可药用络合物、可药用溶剂化物、所述化合物的笼形包合物、可药用共晶体和可药用共沉淀物的那些形式。

除非另有指明，否则术语“约”或“大约”意味着在1、2、3或4个标准偏差之内。在某些实施方式中，术语“约”或“大约”意味着在给定值或范围的50％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.05％以内。

除非另有指明，否则术语“局部作用”是指具有不良的系统性暴露但仍产生所需的药效作用的化合物。特定的局部作用化合物当以10mg/kg的剂量口服给药到小鼠、大鼠或人类时，具有低于20或10nM的最高血浆浓度(Cmax)。系统性暴露(例如Cmax)可以通过本领域中公知的方法包括液相色谱质谱术来测量。

除非另有指明，否则术语“应对”涵盖了在已患有特定疾病或障碍的患者中阻止所述疾病或障碍的复发，和/或延长已患有所述疾病或障碍的患者仍处于缓解状态的时间。所述术语涵盖了调节所述疾病或障碍的阈值、发展和/或持续时间或改变患者对所述疾病或障碍响应的方式。

除非另有指明，否则术语“预防”是指在患者开始患有特定疾病或障碍之前发生的抑制或减轻所述疾病或障碍的严重性的行动。换句话说，所述术语涵盖疾病预防。

除非另有指明，否则化合物的“预防有效量”是足以预防疾病或病症或与所述疾病或病症相关的一种或多种症状或预防其复发的量。化合物的“预防有效量”意味着单独或与其他药剂相组合的治疗剂在所述疾病的预防中提供预防性益处的量。术语“预防有效量”可以涵盖改善总体预防或增强另一种预防药剂的预防效能的量。

除非另有指明，否则化合物的“治疗有效量”是足以在疾病或病症的治疗或应对中提供治疗性益处或延迟或最小化与所述疾病或病症相关的一种或多种症状的量。化合物的“治疗有效量”意味着单独或与其他疗法相组合的治疗剂在所述疾病或病症的治疗或应对中提供治疗性益处的量。术语“治疗有效量”可以涵盖改善总体疗法、减轻或避免疾病或病症的症状或病因或增强另一种治疗剂的治疗效能的量。

除非另有指明，否则术语“治疗”是指在患者正患有特定疾病或障碍时发生的减轻所述疾病或症状的严重性或迟滞或减缓所述疾病或障碍的进展的行动。

当在本文中使用时，术语“对象”和“患者”可互换使用。术语“对象”是指动物，例如哺乳动物包括非灵长动物(例如奶牛、猪、马、猫、狗、大鼠和小鼠)和灵长动物(例如猴如食蟹猴、黑猩猩和人类)和例如人类。

除非另有指明，否则术语“包括”具有与“包括但不限于”相同的含义。同样地，术语“例如”具有与“例如但不限于”相同的含义。

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的形式(5.2)

本公开涉及固体形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺：

及其可药用盐、溶剂化物和共晶体。N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的特定盐包括萘-1,5-二磺酸盐、磷酸盐、L-酒石酸盐和盐酸盐。特定的共晶体是氨基酸的共晶体。

在本发明之前，没有已知的结晶形式的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺：使用各种潜在的盐、共晶体和反应条件的广泛筛选得到粘稠的焦油或无定形材料。

旨在发现所述化合物的有用且稳定的固体形式的大量进一步研究最终导致发现了游离碱、溶剂化物和共晶体的几种结晶形式。特别令人感兴趣的是N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的L-脯氨酸共晶体。尽管同质异像现象的研究鉴定出所述共晶体的11种不同拉曼光谱类别，但其中3种以无定形材料为主，并且大多数在干燥后不稳定(即失去其结晶性或转变成其他形式)。只有两种形式的L-脯氨酸共晶体——在本文中被称为II型和III型——足够稳定，可用于药物制剂。

因此，本发明的一个方面涉及N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的结晶形式：

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的一种特定结晶形式是II型，其在通过差示扫描量热术(DSC)测定时具有大约147℃(即147±5.0℃)的熔点。在提到熔点时，本文中使用的术语“大约”意味着±5.0摄氏度。还应该指出，当形式从溶剂(例如乙醇)制备时，除非另有指明，否则熔点在干燥后测量。

II型的一个实例在室温下使用铜Kα辐射获得的X-射线粉末衍射(XRPD)图在4.5、5.3、10.5、12.1、17.1、18.8、19.3、22.3、26.1和26.2±0.5°2θ中的一者或多者处包含峰。(在几个°2θ值的列举结束处叙述的误差值例如±0.5°2θ意指对于每个列出的°2θ值来说大约±0.5°2θ的值)。特定衍射图在大约4.5、5.3和/或10.5°2θ处含有峰。另一个衍射图在大约10.5、12.1和/或17.1°2θ处含有峰。另一个衍射图在大约18.8、19.3和/或22.3°2θ处含有峰。II型的特定实例具有与图1中所示基本上相同的XRPD图。

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的另一种结晶形式是III型，其在通过DSC测定时具有,大约150℃(即150±5.0℃)的熔点。

III型的一个实例在室温下使用铜Kα辐射获得的X-射线粉末衍射(XRPD)图在4.2、7.5、8.3、10.9、12.5、14.7、16.6、17.7、19.8和20.6±0.5°2θ中的一者或多者处包含峰。当在室温下使用铜Kα辐射获得时，III型的特定实例的XRPD图在大约(即±0.5°2θ)4.2、7.5、8.3、10.9、12.5、14.7、16.6、17.7和/或19.9°2θ处含有峰。特定衍射图在大约4.2、7.5和/或8.3°2θ处含有峰。另一个衍射图在大约8.3、10.9和/或12.5°2θ处含有峰。另一个衍射图在大约14.7、16.6和/或17.7°2θ处含有峰。III型的特定实例具有基本上如图2中所述的XRPD图。

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的结晶形式II和III与所述化合物的无定形形式相比提供了显著优点，所述无定形形式可能难以以药物制造所必需的纯度和规模获得。不像所述化合物的其他形式，II和III型可以以高纯度大规模获得。由于其稳定性，III型对用作活性药物成分来说是特别优选的。

本公开涵盖了作为无定形和结晶形式两者的混合物的固体。某些此类固体包含结晶的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺或其可药用盐，其量为至少大约50、75、80、85、90、95或99重量％。

本公开还涵盖了N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的结晶形式的混合物，例如II和III型的混合物。在本发明的一个实施方式中，所述II型或III型的化合物是基本上纯的。对于特定形式来说指称“基本上纯的”意味着所述形式构成存在的该化合物(例如化合物I)的至少50％。在其他实施方式中，特定形式构成存在的化合物(例如化合物I)的至少75％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％、至少99％或约94％-98％。

合成方法(5.3)

本公开涵盖了N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺游离碱及其盐、溶剂化物和共晶体的制备方法。

本发明的一个实施方式涵盖了N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺：

或其可药用盐、溶剂化物或共晶体的一种制备方法，所述方法包括：

(i)通过将式(II)的化合物与式(III)的化合物在钯催化剂和碱存在下相接触来提供混合物：

其中Q是离去基团；R

(ii)从所述混合物分离式(IV)的化合物：

和

(iii)将所述式(IV)的化合物去保护。

在某些实施方式中，Q是卤化物、三氟甲磺酸酯、磷酸酯、乙酸酯、碳酸酯或氮离去基团(例如N,N-二甲苯磺酰基苯甲胺)。在一个实施方式中，卤化物是F、Cl、Br或I。在另一个实施方式中，卤化物是Br或I。在另一个实施方式中，卤素是Br或Cl。在一个实施方式中，Q是三氟甲磺酸酯。在另一个实施方式中，Q是–OC(＝O)OR或OP(＝O)O(R)

保护基团R

所述式(II)的化合物与式(III)的化合物的钯催化的反应是Suzuki偶联反应，其可以在任何适合的碱存在下进行。在一种情况下，所述碱被选择成使得R

所述用于式(II)的化合物与式(III)的化合物的Suzuki偶联的钯催化剂由钯预催化剂和二膦配体形成。在一个实施方式中，所述钯预催化剂是[Pd(烯丙基)Cl]

在某些实施方式中，对于上述方法来说，R

在上述方法的实施方式中，通过将式(IV)的化合物与碱和醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇)相接触将所述式(IV)的化合物去保护。在一种情况下，所述碱是甲醇钠，并且所述醇是乙醇。

在另外的实施方式中，上述方法还包括将所述去保护的式(IV)的化合物与L-脯氨酸在乙醇和水中的溶液在足以获得N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的条件下相接触。在某些此类情况下，所述N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸以晶体形式获得。在某些此类情况下，以晶体形式获得的N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸是III型。

反应路线1示出了一种制备式(IV)的化合物并将所述式(IV)的化合物转化成III型N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸的方法。

反应路线1

为了获得式(IV)的化合物的式(II)的化合物与式(III)的化合物的Suzuki偶联描述在实施例6.9中。选择反应条件以最小化式(IV)的化合物中保护基团的水解。仅为举例说明，在实施方式中，对于Suzuki偶联来说，较弱的碱例如K

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸可以通过将L-脯氨酸添加到N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺的溶液中，搅拌并过滤得到的沉淀物来制备。在特定实施方式中，所述溶剂包含甲醇、乙醇或异丙醇。在特定实施方式中，将所述包含游离碱的溶液维持在大约35–50℃的温度下，并在添加L-脯氨酸溶液后冷却。

对于上述方法的任何实施方式来说，本文中提供了一种制备式(II)的化合物的方法，

所述方法包括：

(i)将式11的化合物与化合物8在足以获得式9的化合物的条件下相接触：

其中R

(ii)将式9的化合物去保护以获得化合物9b

(iii)将化合物9b与Q-Cl或Q-OMe在碱存在下，在足以获得所述式(II)的化合物的条件下相接触。

在上述用于制备式(II)的方法的实施方式中，所述足以提供式9的化合物的条件可以包括适合于形成酰胺键的任何条件。在某些实施方式中，所述反应在新戊酰氯和三甲胺存在下，在非质子溶剂中进行。在某些情况下，所述反应在约–25℃至约35℃范围内的温度下进行。在此类情况下，所述非质子溶剂包括但不限于四氢呋喃、甲苯、乙腈、二甲基甲酰胺及其组合。在某些情况下，所述溶剂是甲苯和四氢呋喃的混合物。在某些情况下，式9的化合物从甲基叔丁基醚(MTBE)和正庚烷的混合物结晶。在某些实施方式中，R

在某些实施方式中，所述足以用于化合物9b与Q-Cl的反应的条件包括适合的碱例如吡啶，并且还包括另外的牺牲性胺类，例如二乙胺或二丙胺。在某些实施方式中，Q-Cl是氯甲酸甲酯。

在其他实施方式中，所述足以用于化合物9b与Q-OMe的反应的条件包括适合的酯交换反应条件。在某些实施方式中，所述适合于Q-OMe与化合物9b的反应的条件包括碱例如叔丁醇钾或甲醇钠。在特定实施方式中，Q-OMe是碳酸甲酯(MeO-C(＝O)-OMe)。

所述式11的化合物可以通过包含锌的原位活化的方法来制备，所述方法包括：

(i)将化合物29与锌粉和至少一种添加剂相接触，以原位形成化合物28：

(ii)将化合物28与式26的化合物在钯催化剂存在下相接触，以获得式27的化合物：

在本发明的特定实施方式中，所述用于合成式11的化合物的方法还包括式27的化合物中的酯的水解。

在某些实施方式中，所述至少一种添加剂是TMSCl和LiCl。在某些情况下，所述至少一种添加剂是TMSCl和LiCl；或TMSCl。在某些此类情况下，R

在实施方式中，所述化合物28与式26的化合物的反应包括向包含式26的化合物的混合物分批添加化合物28。在某些实施方式中，所述用于式27的化合物的形成的反应温度为约35℃至约60℃。

化合物8优选地通过包含下述步骤的方法来制备：

(i)通过在过量的化合物31中加热化合物32，将化合物31与化合物32反应：

(ii)将步骤(i)的反应混合物冷却，将所述冷却的反应混合物与固体氢氧化钾相接触，过滤所述混合物并用甲苯清洗所述固体残留物，以获得滤液；和

(iii)通过与甲苯共蒸馏从步骤(ii)的滤液中除去过量的化合物31，以获得化合物8。

可选地，化合物8可以通过将化合物30与化合物31在1,1′-羰基二咪唑(CDI)存在下相接触并分离化合物8-boc来制备：

除去化合物8-Boc中的Boc保护基团提供了化合物8。

反应路线2示出了一种制备式(II)的化合物的方法。

反应路线2

原位进行锌的活化，并且所述锌试剂不需分离即用于Negishi偶联反应中。对于Negishi偶联来说，如实施例6.6中所述将烷基锌的溶液分批添加到催化剂和芳基溴的混合物中。所述胺8如实施例6.5中所述来制备，并优选地不使用水性后处理来分离。化合物11a与胺8的酰胺偶联在本领域技术人员已知的任何适合的酰胺偶联条件下进行。在一个实例中，化合物11a与胺8的酰胺偶联如实施例6.7中所述在新戊酰氯和碱存在下进行。化合物9b向式(II)的化合物的转化如实施例6.7中所述来进行。在一个实例中，将化合物9b在过量碳酸二甲酯存在下转变成化合物9c。

一种特定的式(III)的化合物是(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物10)：

在本发明的一个实施方式中，化合物10通过将(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物20)硼基化来制备：

下面的反应路线3示出了一种制备式(III)的化合物的方法。

反应路线3

如实施例6.1中所述将化合物13用格里纳德试剂处理以制备芳基格里纳德试剂，然后将其添加到用第二格里纳德试剂预处理的化合物1中，以给出酮14。将14立体选择性还原然后去保护、扩环并保护，给出四乙酸酯17。如实施例6.3中所述通过引入硫脲进行硫甲基化以形成加成物，然后将其转变成游离硫醇并用甲基碘原位处理。

本文中提供了一种通过化合物20的硼基化来制备化合物10的方法，所述方法包括将化合物20与二硼基化合物、钯预催化剂和选自SPhos(2-环己基-膦基-2’,6’-二甲氧基联苯)和XPhos(2-环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基联苯)的配体相接触。在某些实施方式中，所述钯预催化剂是Pd(OAc)

治疗方法(5.4)

本文提供了一种治疗、预防或应对代谢疾病或障碍的方法，所述方法包括向需要此类治疗、预防或应对的患者给药治疗或预防有效量的结晶N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺L-脯氨酸。在某些实施方式中，所述代谢疾病或障碍是糖尿病。在某些情况下，所述糖尿病是1型糖尿病。在其他情况下，所述糖尿病是2型糖尿病。

在本文提出的实施方式的范围内还设想了治疗或应对心血管疾病和障碍、代谢疾病和障碍、肠疾病和障碍和某些类型的癌症的方法。

本公开的一个实施方式涵盖了治疗心血管或代谢疾病或障碍的方法，所述方法包括向需要的患者给药安全有效量的本公开的SGLT1抑制剂(即本文公开的化合物)。特定的心血管疾病和障碍包括动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、糖尿病(1型和2型)、与血浓缩相关的障碍(例如血色素沉着症、真性红细胞增多症)、高血糖、高血压、低镁血症、低钠血症、脂质障碍、肥胖症、肾衰竭(例如1、2或3期肾衰竭)和X综合征。特定的患者患有2型糖尿病，或有患2型糖尿病的风险。

本公开的另一个实施方式涵盖了治疗或应对以便秘为主的肠易激综合症(IBS-C)或慢性便秘的方法，所述方法包括向需要的患者给药安全有效量的本公开的SGLT1抑制剂。

本公开的另一个实施方式涵盖了在患者中治疗或应对癌症的方法，所述方法包括向需要的患者给药安全有效量的本公开的SGLT1抑制剂。特定的癌症类型是其中癌细胞表现出增强的SGLT基因表达的癌症类型。参见例如Calvo,M.B.等，Int.J.Endocrinology,第2010卷，文章ID 205357。

在本公开的某些实施方式中，本公开的化合物与另一种药物或药理活性成分(“治疗剂”)联合给药。在心血管或代谢疾病或障碍的治疗中，第二治疗剂的实例包括已知在其治疗中有用的治疗剂，例如抗糖尿病药剂、抗高血糖药剂、降血脂/降脂药剂、抗肥胖药剂、抗高血压药剂和食欲抑制剂。

抗糖尿病药剂的实例包括双胍类(例如二甲双胍、苯乙双胍)、葡萄糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖、米格列醇)、胰岛素类(包括胰岛素促分泌素和胰岛素敏化剂)、美格列奈类(例如瑞格列奈)、磺酰脲类(例如格列美脲、格列本脲、格列齐特、氯丙酰胺和格列吡嗪)、双胍/格列本脲组合(例如Glucovance)、噻唑烷二酮类(例如曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮)、PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、糖原磷酸化酶抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)的抑制剂、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)或GLP-1受体的其他激动剂以及二肽基肽酶IV(DPP-4)抑制剂。

美格列奈类的实例包括那格列奈(Novartis)和KAD1229(PF/Kissei)。

噻唑烷二酮类的实例包括Mitsubishi的MCC-555(公开在美国专利号5,594,016中)、Glaxo-Welcome的GL-262570、恩格列酮(CP-68722，Pfizer)、达格列酮(CP-86325，Pfizer)、伊萨列酮(MIT/J&J)、JTT-501(JPNT/P&U)、L-895645(Merck)、R-119702(Sankyo/WL)、NN-2344(Dr.Reddy/NN)或YM-440(Yamanouchi)。

PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂和PPARα/γ双重激动剂的实例包括muraglitizar、peliglitazar、AR-HO39242(Astra/Zeneca)、GW-409544(Glaxo-Wellcome)、GW-501516(Glaxo-Wellcome)、KRP297(Kyorin Merck)以及由Murakami等，Diabetes 47,1841-1847(1998)、WO01/21602和美国专利号6,653,314中所公开的那些激动剂。

aP2抑制剂的实例包括在1999年9月7日提交的美国申请序列号09/391,053和2000年3月6日提交的美国申请序列号09/519,079中所公开的那些抑制剂，使用本文中阐述的剂量。

DPP-4抑制剂的实例包括西他列汀(

抗高血糖药剂的实例包括胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、GLP-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-36)酰胺、GLP-1(7-37)(如美国专利号5,614,492中所公开的)、艾塞那肽(Amylin/Lilly)、LY-315902(Lilly)、利拉鲁肽(Novo Nordisk)、ZP-10(Zealand PharmaceuticalsA/S)、CJC-1131(Conjuchem Inc)和在WO 03/033671中公开的化合物。

降血脂/降脂药剂的实例包括MTP抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂、鲨烯合成酶抑制剂、纤维酸衍生物、ACAT抑制剂、脂氧合酶抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、Na

MTP抑制剂的实例包括在美国专利号5,595,872、美国专利号5,739,135、美国专利号5,712,279、美国专利号5,760,246、美国专利号5,827,875、美国专利号5,885,983和美国专利号5,962,440中公开的那些。

HMG CoA还原酶抑制剂的实例包括美国专利号3,983,140中所公开的美伐他汀和相关化合物、美国专利号4,231,938中所公开的洛伐他汀(维诺林)和相关化合物、美国专利号4,346,227中所公开的普伐他汀和相关化合物、美国专利号4,448,784和4,450,171中所公开的辛伐他汀和相关化合物。可以在本文中使用的其他HMG CoA还原酶抑制剂包括但不限于美国专利号5,354,772中所公开的氟伐他汀、美国专利号5,006,530和5,177,080中所公开的西立伐他汀、美国专利号4,681,893、5,273,995、5,385,929和5,686,104中所公开的阿托伐他汀、美国专利号5,011,930中所公开的atavastatin(Nissan/Sankyo的尼伐他汀(NK-104))、美国专利号5,260,440中所公开的维沙他汀(Shionogi-Astra/Zeneca(ZD-4522))和美国专利号5,753,675中公开的相关他汀类化合物、美国专利号4,613,610中所公开的甲羟戊酸内酯衍生物的吡唑类似物、PCT申请WO 86/03488中所公开的甲羟戊酸内酯衍生物的茚类似物、美国专利号4,647,576中所公开的6-[2-(取代的-吡咯-1-基)-烷基)吡喃-2-酮及其衍生物、Searle的SC-45355(3-取代的戊烷二酸衍生物)二氯乙酸酯、PCT申请WO 86/07054中所公开的甲羟戊酸内酯的咪唑衍生物、法国专利号2,596,393中所公开的3-羧基-2-羟基-丙烷-膦酸衍生物、欧洲专利申请号0221025中所公开的2,3-二取代的吡咯、呋喃和噻吩衍生物、美国专利号4,686,237中所公开的甲羟戊酸内酯的萘基类似物、例如美国专利号4,499,289中公开的八氢萘类、欧洲专利申请号0142146A2中所公开的维诺林(洛伐他汀)的酮基类似物以及美国专利号5,506,219和5,691,322中所公开的喹啉和吡啶衍生物。

降血脂药剂的实例包括普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀和瑞舒伐他汀。

在抑制HMG CoA还原酶中有用的膦酸化合物的实例包括在GB2205837中公开的那些。

鲨烯合成酶抑制剂的实例包括在美国专利号5,712,396中所公开的α-膦酰基磺酸酯、由Biller等，J.Med.Chem.1988,第31卷,第10期,第1869-1871页所公开的抑制剂包括类异戊二烯(氧膦基-甲基)膦酸酯以及其他已知的鲨烯合成酶抑制剂，例如在美国专利号4,871,721和4,924,024以及Biller,S.A.等，Current Pharmaceutical Design,2,1-40(1996)中所公开的。

适合在本文中使用的其他鲨烯合成酶抑制剂的实例包括由P.Ortiz deMontellano等，J.Med.Chem.,1977,20,243-249公开的萜类焦磷酸酯、由Corey和Volante，J.Am.Chem.Soc.1976,98,1291-1293所公开的法呢基二磷酸酯类似物A和原鲨烯焦磷酸酯(PSQ-PP)类似物、由McClard,R.W.等，J.A.C.S.,1987,109,5544报道的氧膦基膦酸酯和由Capson,T.L.,PhD论文(1987年6月,Dept.Med.Chem.U of Utah,摘要，目录，第16、17、40-43、48-51页，概述)所报道的环丙烷类。

可以与本公开的化合物相组合使用的纤维酸衍生物的实例包括非诺贝特、吉非罗齐、氯贝特、苯扎贝特、环丙贝特、克利贝特等，美国专利号3,674,836中所公开的普罗布考和相关化合物，普罗布考和吉非罗齐是优选的，胆汁酸螯合剂例如消胆胺、考来替泊和DEAE-葡聚糖凝胶(Secholex，Policexide)，以及lipostabil(Rhone-Poulenc)、Eisai E-5050(N-取代的乙醇胺衍生物)、伊马昔尔(HOE-402)、四氢利普司他汀(THL)、豆甾烷基磷酸胆碱(istigmastanylphos-phorylcholine)(SPC，Roche)、氨基环糊精(Tanabe Seiyoku)、Ajinomoto AJ-814(甘菊环衍生物)、美林那胺(Sumitomo)、Sandoz 58-035、AmericanCyanamid CL-277,082和CL-283,546(双取代的脲衍生物)、烟酸、阿昔莫司、阿昔呋喃、新霉素、对氨基水杨酸、阿司匹林、例如美国专利号4,759,923中所公开的聚(二烯丙基甲基胺)衍生物例、例如在美国专利号4,027,009中所公开的季铵盐聚(二烯丙基二甲基氯化铵)和紫罗烯类，以及其他已知的降血清胆固醇药剂。

可以与本公开的化合物相组合使用的ACAT抑制剂的实例包括在下述文献中所公开的：Drugs of the Future 24,9-15(1999)，(阿伐麦布)；Nicolosi等，Atherosclerosis(Shannon,Irel).(1998),137(1),77-85；Ghiselli,Giancarlo,Cardiovasc.Drug Rev.(1998),16(1),16-30；Smith,C.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1996),6(1),47-50；Krause等主编，Ruffolo,Robert R.,Jr.；Hollinger,Mannfred A.，《炎症：介导物途径》(Inflammation:Mediators Pathways)(1995),173-98,Publisher:CRC,Boca Raton,Fla.；Sliskovic等，Curr.Med.Chem.(1994),1(3),204-25；Stout等，Chemtracts:Org.Chem.(1995),8(6),359-62，或TS-962(Taisho Pharmaceutical Co.Ltd)。

降血脂药剂的实例包括LD2受体活性的上调物，例如MD-700(TaishoPharmaceutical Co.Ltd)和LY295427(Eli Lilly)。

胆固醇吸收抑制剂的实例包括SCH48461(Schering-Plough)以及在Atherosclerosis 115,45-63(1995)和J.Med.Chem.41,973(1998)中所公开的那些。

回肠Na

脂氧合酶抑制剂的实例包括15-脂氧合酶(15-LO)抑制剂，例如WO 97/12615中所公开的苯并咪唑衍生物、WO 97/12613中所公开的15-LO抑制剂、WO 96/38144中所公开的异噻唑酮类，以及由Sendobry等，Brit.J.Pharmacology(1997)120,1199-1206和Cornicelli等，Current Pharmaceutical Design,1999,5,11-20所公开的15-LO抑制剂。

适合与本公开的化合物相组合使用的抗高血压药剂的实例包括β-肾上腺素能阻断剂、钙通道阻断剂(L-型和T-型；例如地尔硫卓、维拉帕米、硝苯地平、氨氯地平和米贝地尔)、利尿剂(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟甲噻嗪、苄氟甲噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯甲噻嗪、泊利噻嗪、苯并噻嗪、依他尼酸替尼酸、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、氨苯喋啶、阿米洛利、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、ceranopril、cilazopril、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦、厄贝沙坦、缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如西他生坦、阿曲生坦以及美国专利号5,612,359和6,043,265中公开的化合物)、双重ET/AII拮抗剂(例如WO 00/01389中公开的化合物)、中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(双重NEP-ACE抑制剂)(例如奥帕曲拉和格莫曲拉)和硝酸酯类。

抗肥胖药剂的实例包括β3肾上腺素能激动剂、脂肪酶抑制剂、血清素(和多巴胺)再摄取抑制剂、甲状腺受体β药物、5HT

β3肾上腺素能激动剂的实例包括AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)或CP331648(Pfizer)，或美国专利号5,541,204、5,770,615、5,491,134、5,776,983和5,488,064中所公开的其他已知β3激动剂。

脂肪酶抑制剂的实例包括奥利司他和ATL-962(Alizyme)。

血清素(和多巴胺)再摄取抑制剂(或血清素受体激动剂)的实例包括BVT-933(Biovitrum)、西布曲明、托吡酯(Johnson&Johnson)和阿索开(Regeneron)。

甲状腺受体β化合物的实例包括甲状腺受体配体，例如在WO97/21993(U.Cal SF)、WO99/00353(KaroBio)和GB98/284425(KaroBio)中公开的那些。

单胺再摄取抑制剂的实例包括芬氟拉明、右芬氟拉明、氟伏沙明、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、对氯苯丁胺、氯福雷司、邻氯苯丁胺、匹西雷司、西布曲明、右旋安非他明、芬特明、苯丙醇胺和马吲哚。

厌食药的实例包括右旋安非他明、芬特明、苯丙醇胺和马吲哚。

药物组合物(5.5)

本公开涵盖了药物组合物，其包含N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺(化合物I)和化合物I的形式例如上文在第5.3节中描述的形式，任选地与一种或多种第二活性成分例如上文在第5.4节中描述的第二活性成分相组合。在某些实施方式中，所述药物组合物包含本文中所描述的III型。在某些实施方式中，所述药物组合物包含本文中所描述的II型。在某些实施方式中，所述药物组合物包含本文中所描述的I型。

某些药物组合物是适合于口服给药到患者的单一单位剂型。适合于口服给药的分立剂型包括片剂(例如咀嚼片剂)、囊片、胶囊和液体(例如调味糖浆)。此类剂型包含预定量的活性成分，并且可以通过本领域技术人员公知的药学方法来制备。参见例如《Remington制药学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版)(Mack Publishing,EastonPA:1990)。

典型的口服剂型通过按照常规的药物混合技术将活性成分与至少一种赋形剂密切混合来制备。由于易于给药，片剂和胶囊剂代表最有利的口服剂量单位形式。如果需要，可以通过标准的水性或非水性技术将片剂包衣。此类剂型可以通过常规的药学方法制备。通常，药物组合物和剂型通过将活性成分与液体载体、细分的固体载体或两者均匀且密切地混合，然后如有必要将产品成型为所需外观来制备。崩解剂可以并入到固体剂型中以促进快速溶解。也可以并入润滑剂以便于剂型(例如片剂)的制造。

实施例(6.)

在本文中提供的合成例中，除非另有注明，否则试剂和材料以接收时的原样使用。除非另外的GC或GCMS分析有必要，否则反应通过反相HPLC(Shimadzu组件，在220nm处UV检测)来监测，通常使用C18或苯基-己基柱，使用水/MeCN或水/MeOH流动相并使用TFA作为改性剂。熔点信息使用差示扫描量热器收集(峰值温度)。NMR波谱在Bruker AV 400MHz(

化合物14的制备(6.1)

(3-氯-4-甲基苯基)((3αS,5R,6S,6αS)-6-羟基-2,2-二甲基四氢呋喃并[2,3-d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)甲酮(14)

在-15至-3℃下，在1.5h内向吗啉酰胺1(1.25kg)在THF(4.5L)中的溶液添加叔丁基氯化镁(在THF中～1M，5.45L)，然后保持在-15℃下。在分开的反应器中，在-15℃下，在1.5h内向芳基碘13(1.29kg)在THF(3.5L)中的溶液添加THF中的异丙基氯化镁(2.65L，2.11M)并陈放，直至转金属作用完成。然后在≤3℃下，在10min内将得到的芳基格里纳德溶液添加到去质子化的吗啉酰胺1的溶液中，在-10℃下陈放直至反应完成，然后在柠檬酸(1.08kg)在水(6.75L)中的冷(～5℃)溶液中淬灭。分离有机层，用25％盐水清洗两次(2x2.5L)并浓缩至～4L。将得到的悬液升温至50–55℃，添加正庚烷(6L)并将混合物缓慢冷却至0℃，陈放1h并过滤。将滤饼用正庚烷/THF的混合物(4:1，2.5L)，然后用正庚烷(2L)洗涤。将湿滤饼在减压下，在40–45℃和轻柔氮气吹扫下干燥，得到1.30kg酮14：得率为91％，熔点153℃(DSC峰值温度)，LC-MS：M+H计算值为313，实测值为m/z 313；

化合物17的制备(6.2)

(2R,3S,4R,5S,6S)-6-(3-氯-4-甲基苯基)四氢-2H-吡喃-2,3,4,5-四基四乙酸酯(17)

Luche还原以得到二醇15。在-19至-17℃下，在1.5h内向酮14(2.00kg)、七水三氯化铈(1.19kg)和乙醇(14L)的混合物添加硼氢化钠(93.95g)在1.0N氢氧化钠(582mL)中的溶液。将反应混合物陈放直至反应完成(二醇15的非对映异构体比例＝96:4，HPLC)。将它升温至0℃，用水(8L)淬灭并浓缩至～11L。添加乙酸乙酯(8L)，并用6N HCl(～535mL)将pH调整到2.5。分离有机层，用0.25N氢氧化钠(2x 4.5L)和25％盐水(4L)顺序洗涤，蒸馏至小体积，然后将溶剂交换成乙腈。

去保护以得到四醇16。将水(3.5L)和6N HCl(260mL)添加到二醇溶液15中，并将混合物在65–70℃陈放3.5h，然后冷却至25℃。将它用2-MeTHF(10L)萃取。将有机相用25％盐水(2x 4L)洗涤，浓缩至～5L，然后与乙腈共蒸馏。过滤掉沉淀物，给出四醇16在乙腈中的溶液。

乙酰化以得到四乙酸酯17。将所述四醇16溶液用乙腈稀释至～11.5L，然后添加三乙胺(7.15L)，随后缓慢添加乙酸酐(3.62L)并在34–36℃陈放，直至反应完成。将反应混合物冷却至15℃，在≤30℃下用水(18L)淬灭。将得到的悬液冷却至10–15℃，陈放并过滤。将收集到的固体用2-丙醇(3x 4L)和正庚烷(4L)顺序洗涤，然后在40–45℃在减压下干燥，给出2.11kg作为灰白色固体的四乙酸酯17：得率为72％(从14起的3个步骤)，熔点181℃(DSC峰值温度)，LC-MS：M+NH

化合物20的制备(6.3)

(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-氯-4-甲基苯基)-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(20)

向四乙酸酯17(2.09kg)、硫脲(394g)在乙酸乙酯(14L)中的混合物添加三氟化硼二乙醚合物(1.46L)。将所述混合物在55℃搅拌4h，以给出硫脲加成物19。将反应混合物冷却至0℃，添加甲醇(4L)和甲基碘(358mL)，然后缓慢添加N,N-二异丙基乙基胺(3.59kg)。将反应混合物在20-25℃下搅拌直至反应完成，然后浓缩至8–9L并用IPA冲洗(终体积～11L)。在0.5h内添加水(11L)，将所述悬液在35℃陈放0.5h，在10–12℃陈放4h。将产物过滤，用IPA/水(2:1，6L)、IPA(3L)和正庚烷(4L)顺序洗涤。在40–45℃在减压下干燥，给出1.88kg作为灰白色固体的芳基氯20：得率为92.7％，熔点170℃(DSC峰值温度)，LC-MS：M+NH

化合物10的制备(6.4)

(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(10)

将SPhos(76.2g)、乙酸钯(20.44g)、芳基氯20(2.00kg)、双(频哪醇基)二硼(B

化合物10的可选制备：

将乙酸钯(II)(0.14kg)和S-phos(0.5kg)、芳基氯20(12.8kg)、双(频哪醇基)二硼(11.4kg)、乙酸钾(8.9kg)在2-甲基四氢呋喃(2-MeTHF，108kg)中的混合物在65–75℃陈放，直至反应完成。将它冷却至15–25℃，通过硅胶垫过滤，通过活性炭盒再循环，然后在低于50℃下减压浓缩至大约25L。在40–50℃缓慢添加正庚烷(106kg)，将混合物陈放1–2小时，冷却至5–15℃并陈放6–8小时，然后将产物过滤。将滤饼用正庚烷(26kg)洗涤，然后在40–50℃下减压干燥，给出13.5kg作为白色粉末的化合物10(得率为86％)。

化合物8的制备(6.5)

2-氨基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-2-甲基丙酰胺(8)

在20–30℃下，在0.5h内向1,1’-羰基二咪唑(CDI，2.56kg)在二氯甲烷(21L)中的悬液分批添加Boc-α-氨基异丁酸(Boc-AiB-OH)(30)(3.00kg)。在20-25℃搅拌0.5h后，在<30℃下在1h内添加N,N-二甲基乙二胺(1.56kg)。将所述混合物搅拌0.5h，用碳酸氢钠水溶液(7.5％，2x 15L)、然后用水(2x 15L)洗涤。将各个水性层用二氯甲烷(15L)顺序萃取。将合并的有机层浓缩至～6L，用乙腈(12L，分批)冲洗，并用乙腈(24L)稀释。在<40℃下缓慢添加HCl(4.0N，在二噁烷中，9.2L)，并将得到的浓稠悬液在20-25℃搅拌。在0.5h内添加碳酸钾(5.10kg)(放出CO

胺8的可选制备

将N,N-二甲基乙二胺(4.0mL)和α-氨基异丁酸甲酯盐酸盐(AiB-OMe

化合物11a的制备(6.6)

4-(4-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)苯基)丁酸(11a)

烷基锌28的制备。向无水LiCl(196g)、锌粉(726g)、4-溴丁酸乙酯(29，1.80kg)在THF(2.5L)中的混合物添加TMSCl(50.1g)。将所述混合物在0.3h内加热至55℃，并在50-65℃陈放2h，在60–65℃陈放19h，然后冷却至25℃。沉降残留的锌粒子，并将上清液(～4L)直接用于Negishi偶联。

THP-保护的4-溴苯甲醇26c。将4-溴苯甲醇(26a，1.16kg)、对甲苯磺酸吡啶鎓(32.0g)和3,4-二氢吡喃(0.571kg)在THF(3.7L)中的混合物在50℃陈放直至反应完成，冷却，直接用于Negishi偶联。

Negishi偶联产物27d。向26c的溶液添加0.4–0.5L所述烷基锌28溶液，并将混合物在35-40℃搅拌0.5h。同时，通过将Pd(OAc)

酯水解以得到11a。将粗品酯(27d，2.20kg)用MeOH(1L)稀释，然后在0.3h内添加30％NaOH(0.92L)。在30–40℃下陈放0.5h后，添加甲苯(2.30L)和水(2.30L)，并将得到的混合物冷却至20℃。分离水性层，与甲苯(3.5L)混合，冷却至2℃，并在<5℃下用6N HCl(～1.45L)缓慢酸化至pH 4.1。分离有机层，用水(1.2L)、1:1盐水/水(1.2L)洗涤，浓缩至小体积并用甲苯(～3L，分批)冲洗，给出粗产物11a(～3L)，其被直接用于酰胺化以得到9a。

化合物9b的制备(6.7)

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)苯基)丁酰胺(9a)

在-20至-30℃下向新戊酰氯(823g)在甲苯(2.6L)和THF(0.86L)中的溶液缓慢(2h)添加粗品11a(2.64kg)在甲苯(0.6L)、THF(0.6L)和Et

N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4–(4–(羟甲基)苯基)丁酰胺(9b)

在<25℃下向9a(2.36kg)在MeOH(7.1L)中的溶液缓慢添加浓HCl(37％，544mL)。将混合物在35℃陈放直至反应完成(1h)，然后冷却至0–5℃。在5–10℃下缓慢添加NaOH水溶液(50wt％，365mL)，直至pH 10–12。将所述反应混合物浓缩至～3L，在45–50℃用MeOH(1.5L x4)、然后用THF(2L x 4)冲洗。在40–45℃过滤出沉淀物，并将滤饼在40℃用THF(～2L)漂洗。向合并的滤液添加正庚烷(9L)，将所述混合物在30℃陈放0.5h，在10-15℃陈放3h。将产物过滤，用2:1正庚烷/THF(6L)洗涤，并在45℃在减压下干燥，给出1.83kg作为白色固体的9b：得率为96.2％；熔点92℃(DSC峰值温度)；LC-MS：[M+H]的计算值为350，实测值为m/z 350；

化合物9c的制备(6.8)

4-(4-((1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氨基)-4-氧代丁基)苯甲基碳酸甲酯(9c)

向9b(2.50kg)在碳酸二甲酯(5.0L)和THF(2L)中的悬液添加NaOMe(25wt％，在MeOH中)，并将所述混合物在减压下缓慢蒸馏。添加THF(2L)和碳酸二甲酯(2L)并继续蒸馏，然后用DMC(～4L)稀释。重复所述蒸馏和稀释操作直至获得令人满意的转化率。将所述反应用Et

化合物35的制备(6.9)

(2S,3S,4R,5S,6R)-2-(3-(4-(4-((1-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氨基)-4-氧代丁基)苯甲基)-4-甲基苯基)-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(35)

在搅拌下，向芳基硼酸酯10(651g)、苯甲基碳酸酯9c(560g)和碳酸钾(518g)在异丙醇(IPA，6.5L)中的混合物缓慢添加水(22.4mL)。然后添加如下所述分开制备的催化剂溶液，将反应混合物在50℃陈放，直至反应完成(10–20h)。

催化剂溶液的制备：将[Pd(烯丙基)Cl]

改进的催化剂制备：将[Pd(烯丙基)Cl]

在Suzuki偶联反应完成后，添加丙酮(7.8–8.0L)和Darco G-60(32.5g)，并将所述混合物在40℃搅拌2–4h，过滤。将滤液在40℃在减压下浓缩至9–10L。添加35的种晶(3.03g)，并将混合物搅拌0.5–1h，浓缩至～10L，用IPA(3L)冲洗，在40℃陈放2h，在室温陈放2h，然后过滤。将滤饼用IPA(2.0L+1.0L)、正庚烷(1.0L)洗涤，并在40–45℃在减压下干燥，得到819g作为白色固体的三乙酸酯35，得率为84.5％，熔点143℃(DSC峰值温度)；LC-MS：M+H的计算值为728，实测值为m/z 728；

35的可选制备：将硼酸酯10(12.9kg)、苯甲基碳酸酯9c(11.4kg)、碳酸钾(0.73kg)、双(二苯基膦)二茂铁(DPPF，0.67kg)、乙酸钯(II)(0.23kg)和2-丙醇(113kg)的混合物在60℃陈放，直至反应完成(12–16h)。将反应混合物用丙酮(104kg)稀释，冷却至40–45℃并过滤。将滤液通过活性炭盒再循环，在低于50℃下在减压下浓缩至～140L，在低于50℃下用IPA(48kg+72kg)冲洗，终体积为～210L。将得到的悬液在40–45℃搅拌4h，在15–25℃搅拌3h并过滤。将滤饼用IPA(53kg)、然后用正庚烷(46kg)洗涤，然后在20-45℃在减压下干燥，得到15.2kg作为白色固体的35(得率为82％)。

化合物I的游离碱的制备(6.10)

向三乙酸酯35(6.5g)在MeOH(89mL)中的混合物添加NaOMe(0.5M，在MeOH中，8.9mL)，并将所述混合物在20-25℃搅拌2h，以完成去保护。将所述反应用乙酸(1.53mL)淬灭，并将反应混合物在减压下浓缩，溶解在水(32mL)中，通过制备性HPLC纯化并冷冻干燥，给出化合物I的甲酸盐。将后者用1N NaOH处理，用二氯甲烷萃取并浓缩至干。然后将蒸馏残留物(2.0g)在50℃下溶解在MeOH(4mL)和MTBE(11mL)中。缓慢添加更多MTBE(25mL)，并将混合物在50℃搅拌2天，冷却至20-25℃并过滤。将滤饼用MTBE(8mL)洗涤，在50℃在减压下干燥，给出1.9g式I化合物的游离碱。

I型和II型化合物I L-脯氨酸共晶体的制备(6.11)

将N-(1-((2-(二甲基氨基)乙基)-氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)-4-(4-(2-甲基-5-((2S,3R,4R,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(甲硫基)四氢-2H-吡喃-2-基)苯甲基)苯基)丁酰胺游离碱(50mg)和L-脯氨酸(9.5mg)在乙醇(0.5mL)中的混合物在室温搅拌16h，以给出浓稠悬液。将所述悬液过滤，并将湿滤饼干燥。所述湿滤饼被鉴定为I型(乙醇溶剂化物)，其在50℃干燥后转变成II型(DSC峰为147℃)。使用所述固体作为种晶，以相似的方式制备另外0.7g所述L-脯氨酸共晶体的II型同质异像体。

III型化合物I L-脯氨酸共晶体的制备(6.12)

将三乙酸酯35(1.207kg活性物质)在EtOH(6.04L)中的混合物用甲醇钠在MeOH中的溶液(25w％，19.4mL)在45℃处理3-5h。然后在40℃添加～50％的L-脯氨酸(220g)在水(102mL)和EtOH(485mL)中的溶液，然后添加化合物I L-脯氨酸共晶体的III型种晶(11.9g)。将所述混合物在40℃搅拌1h，并在1h内缓慢添加剩余的L-脯氨酸溶液(355mL)。将所述混合物在40℃陈放1h，在30℃陈放16h，然后缓慢添加MTBE(10L)。将所述混合物在30℃陈放1h，在20℃陈放2-5h，然后过滤。将滤饼用2:1MTBE/EtOH(3.6L)、MTBE(7L)洗涤，并在30-60℃在减压下干燥，给出1.1kg III型化合物I L-脯氨酸共晶体，得率为91.0％，熔点150℃(DSC峰值温度)；结晶(XRPD)。LC-MS：[M+H]的计算值为602，实测值为m/z 602；化合物I:L-脯氨酸摩尔比为1.0:1.0(NMR)；

上文引用的所有参考文献整体通过参考并入本文。上文描述的实施方式和实施例仅打算是说明性而不是限制性的。本领域技术人员仅使用常规实验就将认识到或能够确定特定化合物、材料和程序的大量等同物。所有此类等同物都被认为在权利要求书的范围之内并被其涵盖。