一种药疹血浆外泌体circRNA标志物及其检测引物试剂盒

摘要

本发明公开了一种药疹血浆外泌体circRNA标志物，包括药疹血浆外泌体长RNA标志物和miRNA标志物组合的引物和探针，所述长RNA标志物包括circ_0047921、hsa_circ_0006773或circ_0056285中的一种或多种，所述miRNA标志物包括miR‑375‑3p、miR‑200a‑3p、miR‑122‑5p、miR‑27a‑3p中的一种或多种。本发明提供了药疹血浆外泌体circRNA标志物，经临床验证之后，具有较高的特异性和敏感值，有较高的诊断参考价值；分析这些circRNA在血浆外泌体的表达情况，可以较大概率准确判断受试者的是否罹患药疹，为疾病的早期发现提供依据，为患者早期治疗提供契机，提高诊断准确率，简化诊断过程，具有较大的应用前景。

说明书

技术领域

本发明属于circRNA标志物技术领域，更具体地说，尤其涉及一种药疹血浆外泌体circRNA标志物及其检测引物试剂盒。

背景技术

环状RNA(circRNA)是一种新型的非编码RNA，可形成共价闭合的连续环。CircRNA没有3'和5'末端，但是具有大量的miRNA结合位点。大多数circRNA是外显子circRNA，它们是通过反向剪接从已知蛋白质编码基因的外显子区域衍生而来的。

CircRNA在外泌体和血浆中含量丰富且稳定，为检测提供了更方便的方法。外泌体是直径为30-100nm的纳米级双层膜囊泡，通常以杯形出现。多种人类细胞可以通过细胞外分泌释放外泌体，这些囊泡广泛分布于血液，唾液，尿液和其他体液中。

药疹，指药物通过各种途径进入人体后引起的皮肤及(或)粘膜的不良反应，它是最为常见的药物不良反应，既往报道发病率1-3％。随着药疹在我国发病率的逐年上升，不但对个人健康及经济损失造成严重危害，更成为公共卫生中阻碍临床用药安全及新药研发的障碍，已成为国内外研究热点。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种药疹血浆外泌体circRNA标志物及其检测引物试剂盒。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种药疹血浆外泌体circRNA标志物，包括药疹血浆外泌体长RNA标志物和miRNA标志物组合的引物和探针，所述长RNA标志物包括circ_0047921、hsa_circ_0006773或circ_0056285中的一种或多种，所述miRNA标志物包括miR-375-3p、miR-200a-3p、miR-122-5p、miR-27a-3p中的一种或多种。

优选的，所述标志物为circ_0047921、hsa_circ_0006773和miR-375-3p三者的组合。

优选的，所述标志物为circ_0047921、miR-375-3p和miR-200a-3p三者的组合。

优选的，所述标志物为circ_0047921、hsa_circ_0006773、miR-375-3p、miR-200a-3p和miR-122-5p五者的组合。

优选的，所述标志物为circ_0056285、hsa_circ_0006773、miR-27a-3p、miR-375-3p和miR-122-5p五者的组合。

一种药疹血浆外泌体circRNA标志物的检测引物试剂盒，还包含反转录反应所需试剂、荧光定量PCR反应所需试剂、DEPC处理水、阳性对照和阴性对照、样本外泌体分离及RNA提取所需试剂，所述外泌体来源为药疹血浆。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的一种药疹血浆外泌体circRNA标志物及其检测引物试剂盒，本发明提供了药疹血浆外泌体circRNA标志物，经临床验证之后，具有较高的特异性和敏感值，有较高的诊断参考价值；分析这些circRNA在血浆外泌体的表达情况，可以较大概率准确判断受试者的是否罹患药疹，为疾病的早期发现提供依据，为患者早期治疗提供契机，提高诊断准确率，简化诊断过程，具有较大的应用前景。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：一种药疹血浆外泌体circRNA标志物，包括药疹血浆外泌体长RNA标志物和miRNA标志物组合的引物和探针，所述长RNA标志物包括circ_0047921、hsa_circ_0006773或circ_0056285中的一种或多种，所述miRNA标志物包括miR-375-3p、miR-200a-3p、miR-122-5p、miR-27a-3p中的一种或多种。

具体的，所述标志物为circ_0047921、hsa_circ_0006773和miR-375-3p三者的组合。

具体的，所述标志物为circ_0047921、miR-200a-3p和miR-122-5p三者的组合。

具体的，所述标志物为circ_0047921、hsa_circ_0006773、miR-375-3p、miR-200a-3p和miR-122-5p五者的组合。

具体的，所述标志物为circ_0056285、hsa_circ_0006773、miR-27a-3p、miR-375-3p和miR-122-5p五者的组合。

一种药疹血浆外泌体circRNA标志物的检测引物试剂盒，还包含反转录反应所需试剂、荧光定量PCR反应所需试剂、DEPC处理水、阳性对照和阴性对照、样本外泌体分离及RNA提取所需试剂，所述外泌体来源为药疹血浆、唾液、尿液或者其他体液。

环状RNA(circRNA)是一类特殊的非编码RNA分子(在活体中有时也有表达)，也是RNA领域最新的研究热点。

与传统的线性RNA(linear RNA，含5’和3’末端)不同，circRNA分子呈封闭环状结构，不受RNA外切酶影响，表达更稳定，不易降解。在功能上，近年的研究表明，circRNA分子富含microRNA(miRNA)结合位点，在细胞中起到miRNA海绵(miRNA sponge)的作用，进而解除miRNA对其靶基因的抑制作用，升高靶基因的表达水平；这一作用机制被称为竞争性内源RNA(ceRNA)机制。通过与疾病关联的miRNA相互作用，circRNA在疾病中发挥着重要的调控作用。

综上所述：本发明提供的一种药疹血浆外泌体circRNA标志物及其检测引物试剂盒，本发明提供了药疹血浆外泌体circRNA标志物，经临床验证之后，具有较高的特异性和敏感值，有较高的诊断参考价值；分析这些circRNA在血浆外泌体的表达情况，可以较大概率准确判断受试者的是否罹患药疹，为疾病的早期发现提供依据，为患者早期治疗提供契机，提高诊断准确率，简化诊断过程，具有较大的应用前景。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。