一种化妆品中PHMB的检测方法及其应用

摘要

本发明涉及化妆品检测技术领域，尤其涉及一种化妆品中PHMB的检测方法及其应用。具体步骤包括：S1.对样品进行预处理，得到待测液；S2.配制显色剂和PHMB标准液；S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；S4.将显色后的待测液和PHMB标准液放入紫外‑可见分光光度计中进行检测。本发明提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，该方法重现性、灵敏度高，检测限低，且在测定过程中既改善了曙红Y本身颜色对显色结果的干扰，同时抑制了化妆品复杂配方中杂质的干扰，达到精确、有效检测化妆品中PHMB的效果；同时本方法简单易行，实用性强。

说明书

技术领域

本发明涉及化妆品检测技术领域，尤其涉及一种化妆品中聚氨丙基双胍(PHMB)的检测方法及其应用。

背景技术

防腐剂是指加入食品、药品、颜料、生物标本等产品中，达到延迟微生物生长或化学变化引起的腐败的天然或合成的化学成分。引起化妆品变质的主要原因是微生物的污染，在日常生活环境中存在着大量微生物，如空气中的微生物达8～35×10

化妆品中防腐剂的品种繁多，化妆品配方的功能性、复杂性发展对于化妆品防腐剂的测定方法提出了更高的要求。化妆品卫生规范(2007版)中规定了常用的12种防腐剂的高效液相色谱检测方法，具体为甲基氯异噻唑啉酮，2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇，甲基异噻唑啉酮，苯甲醇，苯氧乙醇，4-羟基苯甲酸甲酯，苯甲酸，4-羟基苯甲酸乙酯，4-羟基苯甲酸异丙酯，4-羟基苯甲酸丙酯，4-羟基苯甲酸异丁酯，4-羟基苯甲酸丁酯。聚氨丙基双胍(PHMB)的分子结构中含有活性胍基基团，可以与生物体中的基团或元素相互作用，破坏其正常的物质和能量代谢，从而达到广谱、快速杀菌的效果，同时聚氨丙基双胍还有除臭效果，这些特征使其广泛应用于化妆品中，但是对于产品中聚氨丙基双胍的检测方法还鲜见报道。基于此，探究一种化妆品中PHMB的有效检测方法成为本领域亟待解决的问题之一。

发明内容

本发明通过提供一种化妆品中聚氨丙基双胍(PHMB)的检测方法，解决了现有技术中对于化妆品中PHMB检测方法的薄弱覆盖，实现了一种化妆品中PHMB的有效检测方法。

本发明第一方面提供了一种化妆品中聚氨丙基双胍(PHMB)的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液放入紫外-可见分光光度计中进行检测。

在一种优选的实施方式中，所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.05-0.2g样品于具塞比色管中，加入5-15mL去离子水，振荡，超声提取10-20min，得到分散液；使用0.45-0.7um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

在一种优选的实施方式中，所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.2-0.5g曙红Y，加入10-20mL去离子水，于25-40℃条件下溶解，溶解后冷却至15-24℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取5-20mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

在一种优选的实施方式中，所述S2步骤还配制了醋酸盐水溶液。

在一种优选的实施方式中，所述醋酸盐水溶液的质量浓度为8-14％。

在一种优选的实施方式中，所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取15-25mL待测液，加入2-7.5mL显色剂和1-5mL醋酸盐水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

在一种优选的实施方式中，所述待测液，显色剂和醋酸盐水溶液的重量比为(6-15)：(1-4)：1。

在一种优选的实施方式中，所述待测液，显色剂和醋酸盐水溶液的重量比为(8-12)：(2-3)：1。

在一种优选的实施方式中，所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为500-600nm。

本发明第二方面提供了一种化妆品中PHMB的检测方法的应用，该检测方法应用于防晒乳，隔离霜，粉底液，洁面乳，眼霜，润肤水中PHMB的检测。

有益效果：

本发明提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，该方法重现性、灵敏度高，检测限低，且在测定过程中既改善了曙红Y本身颜色对显色结果的干扰，同时抑制了化妆品复杂配方中杂质的干扰，达到精确、有效检测化妆品中PHMB的效果；同时本方法简单易行，实用性强。

具体实施方式

参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。

如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。

当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。

单数形式包括复数讨论对象，除非上下文中另外清楚地指明。“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。

说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量，表示本发明并不限定于该具体数量，还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相应的，用“大约”、“约”等修饰一个数值，意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中，近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中，范围限定可以组合和/或互换，如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。

此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。

“聚合物”意指通过聚合相同或不同类型的单体所制备的聚合化合物。通用术语“聚合物”包含术语“均聚物”、“共聚物”、“三元共聚物”与“共聚体”。“共聚体”意指通过聚合至少两种不同单体制备的聚合物。通用术语“共聚体”包括术语“共聚物”(其一般用以指由两种不同单体制备的聚合物)与术语“三元共聚物”(其一般用以指由三种不同单体制备的聚合物)。其亦包含通过聚合更多种单体而制造的聚合物。“共混物”意指两种或两种以上聚合物通过物理的或化学的方法共同混合而形成的聚合物。

为了解决上述问题，本发明第一方面提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液放入紫外-可见分光光度计中进行检测。

在一些优选的实施方式中，所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.05-0.2g样品于具塞比色管中，加入5-15mL去离子水，振荡，超声提取10-20min，得到分散液；使用0.45-0.7um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

在一些优选的实施方式中，所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.2-0.5g曙红Y，加入10-20mL去离子水，于25-40℃条件下溶解，溶解后冷却至15-24℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取5-20mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

在一些优选的实施方式中，所述S2步骤还配制了醋酸盐水溶液。

在一些优选的实施方式中，所述醋酸盐水溶液的质量浓度为8-14％。

曙红Y显色剂与PHMB反应能够形成橙红色产物，使得分光光度法检测PHMB方法可行。但是曙红Y显色剂本身通常具有微黄橙色，对显色结果存在干扰，使得检测线性范围较窄；同时曙红Y显色剂对比色皿有染色作用，也有可能干扰测定。本发明发现，对待测样品进行显色的过程中，加入一定量醋酸盐水溶液，能够提升染色产物与曙红Y的颜色区分度，从而扩宽检测方法的线性范围；本发明进一步发现，当醋酸盐水溶液的质量分数为8-14％，尤其是10％时，还能够减弱化妆品产品杂质的干扰，提升本检测方法对于化妆品PHMB检测结果的重现性，将本方法应用于化妆品中PHMB检测时检出限下降至0.1μg/mL。

在一些优选的实施方式中，所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取15-25mL待测液，加入2-7.5mL显色剂和1-5mL醋酸盐水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

在一些优选的实施方式中，所述待测液，显色剂和醋酸盐水溶液的重量比为(6-15)：(1-4)：1。

在一些优选的实施方式中，所述待测液，显色剂和醋酸盐水溶液的重量比为(8-12)：(2-3)：1。

在一些优选的实施方式中，所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为500-600nm。

本发明第二方面提供了一种化妆品中PHMB的检测方法的应用，该检测方法应用于防晒乳，隔离霜，粉底液，洁面乳，眼霜，润肤水中PHMB的检测。

实施例

为了更好的理解上述技术方案，下面将结合具体的实施方式对上述技术方案进行详细的说明。有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的专业技术人员根据上述本发明的内容做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。另外，如果没有其它说明，所用原料都是市售的，所述提取物的提取方法均为常规的提取方法。

实施例1.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例2.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；用去离子水将分散液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例3.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取5min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例4.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例5.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例6.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于45℃条件下溶解，溶解后冷却至15℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例7.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

实施例8.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为5％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例9.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入5mL显色剂和5mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

实施例10.

本实施例提供了一种化妆品中PHMB的检测方法，具体步骤包括：

S1.对样品进行预处理，得到待测液；

S2.配制显色剂和PHMB标准液；

S3.对待测液和PHMB标准液进行显色操作；

S4.将显色后的待测液和PHMB标准液倒入1cm比色皿中，放入紫外-可见分光光度计中进行检测；根据PHMB标准液的吸光度作标准曲线，从标准曲线获得对应的待测液的PHMB浓度。

所述S1步骤中预处理的方法为：所述S1步骤中预处理的方法为：称取0.1g样品于具塞比色管中，加入10mL去离子水，振荡，超声提取15min，得到分散液；使用0.45um滤膜过滤分散液，收集滤液；用去离子水将滤液定容至50mL，得到待测液。

所述S2步骤中显色剂的配制方法为：称取0.3g曙红Y，加入15mL去离子水，于35℃条件下溶解，溶解后冷却至20℃，定容至50mL容量瓶中，得到初始显色剂；用移液管移取10mL初始显色剂，用去离子水定容至250mL容量瓶中，得到显色剂。

所述S2步骤还配制了醋酸钠水溶液，所述醋酸钠水溶液的质量浓度为10％。

所述S2步骤中PHMB标准液采用梯度稀释方法配制，具体为标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五，对应PHMB的质量浓度依次为0mg/L，0.8mg/L，1.6mg/L，5mg/L，10mg/L。

所述S3步骤中对待测液进行显色的操作具体为：称取20mL待测液，加入2mL显色剂和2mL醋酸钠水溶液，用去离子水定容至50mL容量瓶中，摇匀。

所述S4步骤中紫外-可见分光光度计的检测波长为545nm。

所述样品为粉底液，购买自广州丽彦妆药业科技有限公司。

性能测试方法

结果重现性：

测样时同一样品取样5份，对应每一实施例条件进行前处理、上机测定，记录测样结果中目标待测物质量浓度的RSD％。RSD％越低说明方法的重现性越好。标准曲线R

根据实施例中PHMB标准液(标准液一，标准液二，标准液三，标准液四和标准液五)的吸光度绘制标准曲线，计算标准曲线的拟合常数R

PHMB检出限：

取0.1gMilli-Q水作为空白试样，按照实施例1-10的方法进行检测。根据检出限＝3倍空白标准偏差，计算PHMB的检出限。

性能测试数据

表1.实施例1-10的性能测试结果

最后指出，前述的实例仅是说明性的，用于解释本发明所述方法的一些特征。所附的权利要求旨在要求可以设想的尽可能广的范围，且本文所呈现的实施例仅是根据所有可能的实施例的组合的选择的实施方式的说明。因此，申请人的用意是所附的权利要求不被说明本发明的特征的示例的选择限制。在权利要求中所用的一些数值范围也包括了在其之内的子范围，这些范围中的变化也应在可能的情况下解释为被所附的权利要求覆盖。