用于通过吸入给药的包含RPL554的HFA-134A溶液的药物组合物

摘要

本发明涉及适于通过吸入给药的液体药物组合物，其包含：(i)包含9,10‑二甲氧基‑2‑(2,4,6‑三甲基苯基亚氨基)‑3‑(N‑氨甲酰基‑2‑氨基乙基)‑3,4,6,7‑四氢‑2H‑嘧啶并[6,1‑a]异喹啉‑4‑酮(RPL554)的颗粒的混悬液；和(ii)稀释剂，其为1,1,1,2‑四氟乙烷(HFA‑134a)，其中所述液体药物组合物基本上不含表面活性剂。本发明还涉及包含该液体药物组合物的压力定量吸入器。

说明书

发明领域

本发明涉及包含呼吸药物的液体药物组合物和包含液体药物组合物的压力定量吸入器(pMDI)。

发明背景

RPL554(9,10-二甲氧基-2-(2,4,6-三甲基苯基亚氨基)-3-(N-氨甲酰基-2-氨基乙基)-3,4,6,7-四氢-2H-嘧啶并[6,1-a]异喹啉-4-酮)是双PDE3/PDE4抑制剂并在WO 00/58308中描述。作为组合的PDE3/PDE4抑制剂，RPL554具有抗炎和支气管扩张活性，并用于治疗诸如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)的呼吸障碍。下面示出RPL554的结构。

鉴于其治疗呼吸障碍的功效，通常通过吸入来给予RPL554。通过喷雾器给予RPL554是已知的(WO 2016/042313)。然而，通常期望使用压力定量吸入器(pMDI)来给药呼吸药物。

在WO2015/173551中设想了包含RPL554的盐的pMDI制剂。在WO 2014/140648中描述了包含RPL554与第二活性剂和表面活性剂的组合的pMDI制剂。

已知的pMDI制剂策略能够涉及使用宽范围的不同推进剂、赋形剂、潜溶剂和表面活性剂，并且可以采用混悬液、溶液或其混合物的形式。例如，pMDI制剂可包括一种或多种推进剂，如烷烃(例如丙烷、正丁烷、异丁烷、正戊烷、异戊烷、新戊烷)、氢氟烷烃(HFA，例如HFA-227、HFA-134a和HFA 152a)、醚(例如二甲醚)和氢氟-烯烃(HFO，例如HFO-1234ze和HFO-1234yf)。诸如乙醇和水的潜溶剂通常包括在pMDI制剂中。通常包括在pMDI制剂中的赋形剂包括抗氧化剂、防腐剂、润湿剂、螯合剂、乳化剂、香料、缓冲剂、润滑剂、混悬剂和渗涨度调节剂。

通常将稀释剂中具有低溶解度的药物配制成混悬液。在这样的混悬液制剂中，重要的考虑因素是药物颗粒的均匀分散性。团聚、相分离和絮凝能够导致定量剂量的变异性。因此在混悬液制剂中通常使用诸如表面活性剂和潜溶剂的另外的赋形剂来改善悬浮特性。对于混悬液制剂的其他考虑是粒度分布。药物的粒度分布通常保持在可呼吸范围(通常小于5μm)内。

pMDI中包括的每一组份能够对制剂稳定性和功效有许多影响，这些影响高度取决于待配制的药物的同一性。不能提前可靠地预测这些影响。用于pMDI的药物的正确制剂是关键的，以确保制剂能够在临床环境中成功使用。

发明概述

本发明令人惊讶地发现，包含RPL554颗粒和作为稀释剂/推进剂的HFA-134a(1,1,1,2-四氟乙烷)且基本上不含表面活性剂的液体药物组合物对于通过压力定量吸入器递送RPL554特别有利。已发现许多益处与液体药物组合物有关。已发现RPL554和HFA-134a的特定组合导致具有有利的悬浮特性和减少的絮凝的混悬液pMDI制剂。还已经发现，可以不需要表面活性剂存在而实现化学和物理上稳定的制剂。

从本发明的组合物省去表面活性剂的能力是非常有利的。这是因为RPL554可能用于患有诸如COPD、哮喘的疾病状态的患者，这些患者对诸如表面活性剂的赋形剂发生过敏性炎症反应的风险增加。此外，考虑到WO 2014/140648中的教导，即需要表面活性剂来实现足够pMDI，令人惊讶的是，能够在没有表面活性剂的情况下实现足够的长期稳定性，而没有活性成分颗粒的聚集或絮凝。

还意料不到地发现，在诸如乙醇的潜溶剂的存在下，RPL554的颗粒易发生奥斯特瓦尔德熟化(悬浮过程中颗粒的生长)。重要的是避免奥斯特瓦尔德熟化，因为粒度增大能够减少存在于制剂中的颗粒的可吸入部分。发现本发明的液体药物制剂避免RPL554颗粒的奥斯特瓦尔德熟化。

本发明提供适于通过吸入给药的液体药物组合物，其包含：(i)包含9,10-二甲氧基-2-(2,4,6-三甲基苯基亚氨基)-3-(N-氨甲酰基-2-氨基乙基)-3,4,6,7-四氢-2H-嘧啶并[6,1-a]异喹啉-4-酮(RPL554)的颗粒的混悬液；和(ii)稀释剂，其为1,1,1,2-四氟乙烷(HFA-134a)，其中所述液体药物组合物基本上不含表面活性剂。

本发明还提供包括本发明的液体药物组合物的压力定量吸入器。

本发明还提供用于治疗人体或动物体的本发明的液体药物组合物。本发明的液体药物组合物可用于治疗或预防选自以下疾病或疾病状态：哮喘、过敏性哮喘、枯草热、过敏性鼻炎、支气管炎、肺气肿、支气管扩张、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、类固醇抵抗型哮喘、严重哮喘、耳科哮喘、囊性纤维化、肺纤维化(lung fibrosis)、肺部纤维化(pulmonary fibrosis)、间质性肺病、皮肤病、特应性皮炎、牛皮癣、眼部炎症、脑缺血、炎症性疾病和自身免疫疾病。

本发明还提供在个体中治疗或预防如本文所定义的疾病或疾病状态的方法，该方法包括向所述个体给予有效量的本发明的液体药物组合物。

附图简要说明

图1示出了额定压力的玻璃小瓶中悬浮性能的视觉评估的示意图。

图2示出了对于每一产品剂量针对推进剂混合物的沉降得分。

图3示出了24小时之后的具有浸管位置在液相中的测试罐的图示。

图4示出了具有增加的乙醇浓度、具有或不具有油酸的RPL554溶解度图。

图5示出了针对pMDI制剂产品剂量的平均细颗粒剂量。

发明详述

本发明的液体药物组合物包含9,10-二甲氧基-2-(2,4,6-三甲基苯基亚氨基)-3-(N-氨甲酰基-2-氨基乙基)-3,4,6,7-四氢-2H-嘧啶并[6,1-a]异喹啉-4-酮(RPL554)的颗粒的混悬液。为了避免疑惑，RPL554是游离碱的形式。虽然在液体药物组合物中存在的大多数颗粒通常悬浮在稀释剂中，也有这样的情况：本发明的液体药物组合物中的某些或全部颗粒可能已经沉降到容纳液体药物组合物的容器的底部，例如在储存一段时间后。可以任何合适的方式再悬浮颗粒，例如通过搅动液体药物组合物(例如通过摇动包含液体药物组合物的罐)。

液体药物组合物中的稀释剂为1,1,1,2-四氟乙烷，其被称为HFA-134a并具有式CH

该液体药物组合物基本上不含表面活性剂。如本文所用，如果相对于组合物的总重量，组合物包含小于0.5％重量比，优选小于0.1％重量比，更优选小于0.01％重量比的指定组分，例如小于0.001％重量比的指定组分，组合物“基本上不含”指定组分。通常，液体药物组合物不包含表面活性剂。

表面活性剂的实例包括非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或两性离子表面活性剂。为了避免疑惑，液体药物组合物因此基本上不含卵磷脂、油酸、聚乙烯吡咯烷酮K25、聚乙烯醇、寡乳酸、二辛基磺基琥珀酸钠、聚氧乙烯乙二醇烷基醚(如PEG 300、PEG 600、PEG 1000、Brij 30、Brij 35、Brij 56、Brij 76和Brij 97)、聚丙二醇(例如PPG 2000)、葡糖苷烷基醚、聚氧乙烯乙二醇辛基酚醚、聚氧乙烯乙二醇烷基酚醚、甘油烷基酯、聚氧乙烯乙二醇山梨醇烷基酯(聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80)、山梨醇烷基酯(如山梨醇酐单月桂酸酯(Span 20)、山梨醇酐单油酸酯(Span 80)和山梨坦三油酸酯(Span 85))、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、十二烷基二甲基胺氧化物、聚乙二醇和聚丙二醇的嵌段共聚物(泊洛沙姆)、聚乙二醇和聚环氧丙烷的嵌段共聚物(例如Pluronic表面活性剂)和聚乙氧基化牛脂胺(POEA)。

在优选的实施方案中，本发明的液体药物组合物基本上不含乙醇。

更优选地，液体药物组合物基本上不含选自潜溶剂和表面活性剂的任何另外的赋形剂。液体药物组合物更通常地不包含任何潜溶剂并且不包含任何表面活性剂。

潜溶剂的实例包括乙醇、戊烷、水、异丙醇、甘油和丙二醇。

在优选的实施方案中，液体药物组合物基本上不含任何另外的赋形剂。另外的赋形剂可以是例如如上所述的表面活性剂或潜溶剂或选自抗氧化剂、防腐剂、润湿剂、增溶剂、乳化剂、调味剂、螯合剂、保湿剂、渗涨度调节剂、pH调节剂、分散剂和助悬剂的赋形剂。

相对于该组合物的总重量，液体药物组合物可以含有小于0.2％重量比的表面活性剂或另外的赋形剂。例如，相对于组合物的总重量，液体药物组合物可以含有小于0.1％重量比的表面活性剂或另外的赋形剂。相对于该组合物的总重量，液体药物组合物可以例如含有小于0.05％重量比、小于0.01％重量比或小于0.001％重量比的表面活性剂或另外的赋形剂。

通常，基于全部活性药物成分(API)的总重量，本发明的液体组合物中的活性药物成分(API)的至少50％重量比，更优选至少90％重量比，更优选至少99％重量比的活性药物成分(API)是RPL554。

更通常地，RPL554是液体药物组合物中唯一的活性剂。在该实施方案中，本发明的液体药物组合物基本上不含其他活性剂(例如毒蕈碱受体拮抗剂或β-肾上腺素能受体激动剂)。

如上所述，已经发现包含HFA-134a和RPL554颗粒且基本上不含任何另外的赋形剂的液体药物组合物具有许多优点。因此，通常，液体药物组合物基本上由(i)RPL554和(ii)1,1,1,2-四氟乙烷组成。更通常地，相对于组合物的总重量，液体药物组合物包含至少99.5％重量比的(i)RPL554和(ii)1,1,1,2-四氟乙烷。液体药物组合物可以例如由(i)RPL554和(ii)1,1,1,2-四氟乙烷组成。

本发明的液体药物组合物可以例如包含：(i)0.005至5％重量比的RPL554，和(ii)95至99.995％重量比的1,1,1,2-四氟乙烷(HFA-134a)，其中％重量比是相对于液体药物的总重量。通常，相对于组合物的总重量，RPL554和HFA-134a的总量为至少99％重量比。

RPL554的颗粒可以具有用于适于吸入的液体药物组合物的任何合适的尺寸。通常，RPL554的颗粒是微粉化颗粒。例如，RPL554的颗粒可以具有小于或等于10μm或约0.1μm至约8μm的Dv50(体积中位径)值。

通常，颗粒具有Dv50值为约0.2μm到约5μm的粒度分布。更通常地，RPL554的颗粒具有Dv50值为约0.7μm至约3.0μm的粒度分布。例如，RPL554的颗粒可具有Dv50值为0.9μm至2.7μm的粒度分布。通常，RPL554的颗粒具有Dv50值为约1.1μm至约2.1μm的粒度分布。

Dv50值是体积分布的中位径。因此，一半体积的颗粒包含在直径小于Dv50值的颗粒中，一半体积的颗粒包含在直径大于Dv50值的颗粒中。这是描述粒度分布的著名方式。

颗粒通常具有约0.4μm至约1.0μm的Dv10值的粒度分布。颗粒通常具有约2.0μm至约4.0μm的Dv90值的粒度分布。Dv10值反映颗粒直径，其中10％体积的样品在具有小于Dv10值的粒径的颗粒中。Dv90值反映颗粒直径，其中90％体积的样品在具有小于Dv90值的粒径的颗粒中。

用于测量Dv50值的技术通常是激光衍射。例如，RPL554颗粒通常具有通过激光衍射测量的Dv50值为约0.2μm至约5μm的粒度分布。使用与湿式分散元件连接的MalvernSpraytec能够通过激光衍射来执行粒度分布分析。通常，Malvern Spraytec的仪器参数如下：

·颗粒-标准不透明颗粒；

·颗粒折射率-1.50；

·折射率(假想)-0.50；

·颗粒密度-1.00；

·分散剂的折射率-1.33；

·控制器单元-1000RPM；

·测量类型-定时；

·初始采样时间-30s；

·遮蔽-20％至30％；

·分散剂-1％聚山梨醇酯20的去离子水溶液。

RPL554的颗粒可通过任何药物可接受的尺寸减少方法或粒度受控的生产方法来产生。例如，可以通过喷雾干燥RPL554的溶液，通过受控的结晶，或者通过诸如气流粉碎、机械微粉化或介质研磨的RPL554的固体形式的尺寸减小来产生颗粒。

在液体药物组合物中包含RPL554的颗粒的浓度可以基于吸入器每次致动活性化合物的期望剂量而变化。例如，颗粒的浓度可以使得包含液体药物组合物的吸入器的每次致动所递送的RPL554的剂量为5μg/致动至1500μg/致动。颗粒的浓度可以使得每次致动递送的RPL554剂量为50μg/致动至1000μg/致动。

在液体药物组合物中包含RPL554的颗粒的浓度可以为约0.01mg/mL至约400mg/mL。在液体药物组合物中包含RPL554的颗粒的浓度通常为约0.1mg/mL至约200mg/mL。更通常地，液体药物组合物中RPL554颗粒的浓度为约0.5mg/mL至约20mg/mL。

例如，液体药物组合物中RPL554颗粒的浓度可以为约0.1mg/mL至约3.0mg/mL或约0.5mg/mL至约2.0mg/mL。液体药物组合物中RPL554颗粒的浓度可以为约5.0mg/mL至约20mg/mL或约6.0mg/mL至约10mg/mL。

在液体药物组合物中包含RPL554的颗粒的浓度可以为约0.01％w/w至约5.0％w/w。在液体药物组合物中包含RPL554的颗粒的浓度通常为约0.05％w/w至约2.0％w/w。

液体药物组合物通常适于通过吸入给药。液体药物组合物更通常地适于通过压力定量吸入器给药。压力定量吸入器是使用加压液化推进剂递送液体药物组合物的雾化剂量的吸入器。压力定量吸入器通常包括罐(或小瓶)，其包括液体药物组合物、计量阀、致动器和接口。

本发明提供包含本文定义的液体药物组合物的压力定量吸入器。pMDI是本领域普通技术人员熟知的，并且许多这样的设备是可商购的，具有代表性的设备，包括AeroBid吸入器系统(Forest Pharmaceuticals)、Atrovent吸入气溶胶(Boehringer Ingelheim)、Flovent

可以将包含液体药物组合物的压力定量吸入器配置为一旦致动就提供液体药物组合物的气溶胶，该气溶胶具有1.0μm至5.0μm的质量中值空气动力学直径(MMAD)。可以按照药典要求(欧洲药典(Ph.Eur.)方法第2.9.18章和美国药典<601>章)使用新一代撞击器测量MMAD。

本发明提供用于治疗人体或动物体的本文定义的液体药物组合物。通常，液体药物组合物通过吸入给药。

液体药物组合物通常用于治疗或预防选自以下疾病或疾病状态：哮喘、过敏性哮喘、枯草热、过敏性鼻炎、支气管炎、肺气肿、支气管扩张、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、类固醇抵抗型哮喘、严重哮喘、耳科哮喘、囊性纤维化、肺纤维化(lungfibrosis)、肺部纤维化(pulmonary fibrosis)、间质性肺病、皮肤病、特应性皮炎、牛皮癣、眼部炎症、脑缺血、炎症性疾病和自身免疫疾病。疾病或疾病状态优选是COPD或哮喘。更优选地，疾病或疾病状态是慢性阻塞性肺病(COPD)。

通常，从包含液体药物组合物的pMDI以每次致动5μg至1000μg的计量的标称剂量通过吸入给予液体药物组合物。例如，每次致动计量的标称剂量可以是10μg至500μg。通常，可以连续吸入两次致动的pMDI以提供单次剂量。

通常，来自包含液体药物组合物的pMDI的发射剂量为计量的标称剂量的80％至95％。

通常，通过每天致动pMDI 2至8次向患者给予液体药物组合物。

通过以下实施例更详细地描述本发明。

实施例

材料和方法

所使用的材料如下。

·API：微粉化的RPL554。微粉化RPL554的性质示于下表1中。

表1

·推进剂：HFA-134a和HFA-227ea。

·潜溶剂：乙醇/无水乙醇(100％美国药典-国家处方集乙醇)，获自Hyman Kimia。

·表面活性剂：油酸(欧洲药典/英国药典)，获自Croda International plc。

·试剂：在整个研究中使用分析级化学品。

·硼硅酸盐玻璃小瓶，其具有金属箔衬里的聚丙烯盖(VWR,Part number 215-3905)。

·玻璃小瓶：15mL额定压力的透明玻璃小瓶(Neville&Moore,Part No 0771C3/A3)。

·阀：Bespak和Aptar 63μL阀。

·罐：Presspart 14mL罐。

·致动器：Presspart致动器。

使用Pamasol手动压接器和填充器在实验室中制备所有样品。通过在超声浴中浸没30秒来混合所有样品。

完全开发了全分析方法，并且使用DUSA管并通过新一代撞击(NGI)进行体外测试。

在分析期间使用的分析测试方法如下。

·按照药典要求(欧洲药典(Ph.Eur.)-用于吸入的剂型(0671)和美国药典<601>章)执行递送剂量测试

·按照药典要求(欧洲药典(Ph.Eur.)方法第2.9.18章和美国药典<601>章)使用新一代撞击器执行空气动力学粒径分布(APSD)测试

实施例1-合适的推进剂的评估

进行实验以比较用作包含RPL554的pMDI混悬制剂的稀释剂的两种推进剂HFA-134a和HFA-227ea的适合性。表2示出了评估的两种推进剂的关键物理和化学性质。

表2-HFA推进剂性质

通过将所需量的RPL554(参见表3)添加到15mL额定压力的透明玻璃小瓶来制备样品。通过阀门添加推进剂HFA-134a、HFA-227ea或两者的组合(参见表4)，并在超声浴中混合样品30秒。将11.6g(±0.5g)的相同目标填充重量用于所有样品。关于沉降率和絮凝行为，评估推进剂中API颗粒的外观(参见图1)。通过使用高速相机记录玻璃小瓶的图像，在悬浮搅拌后视觉评估制剂的沉降率。通过基于30秒内已沉降或浮动的活性颗粒的量，分配1至10的沉降得分来确定悬浮质量，1为沉降物/乳状物最快(即不期望的)，10为沉降物/乳状物最慢(即可接受的)。

表3-HFA-134a、HFA-227ea及其混合物的制剂中使用的RPL554的量

表4-每一制剂的推进剂比例

结果

HFA-134a中RPL554制剂在摇动时容易悬浮，在摇动停止后观察到快速絮凝和逐渐沉降。HFA-227ea中和HFA-134a/HFA-227ea(50/50)的混合物中制剂在摇动时容易悬浮。然而，在含HFA-227ea的制剂的摇动停止之后观察到乳化。HFA-227ea制剂显示了摇动之后颗粒与更明显的较大絮凝物一起粘附于容器壁的证据。

在图2中以图的方式示出对于每一产品剂量使用推进剂(纯的或混合物)的沉降得分。这显示在具有较高HFA-134a含量的制剂中观察到最佳得分(即最慢沉降)。由于粉末负载的增加，沉降得分随着产品剂量的增加而降低。表5示出各个沉降得分。

表5-用HFA-134a、HFA-227ea及其混合物制备的制剂的沉降得分

从表5能够看出，意料不到地发现，与包含作为稀释剂的HFA-227ea的制剂相比，包含作为稀释剂的HFA-134a的制剂具有一致改进的沉降得分。与包含较高百分比HFA-227ea的制剂相比，发现包含较高百分比HFA-134a的制剂导致较少的絮凝、较少的乳化和较小的粘附。

因此，已经发现，HFA-134a可以有利地用作包含RPL554的颗粒的混悬液的液体药物组合物的唯一稀释剂。

实施例2-合适的另外的赋形剂的评估

为了寻求改善悬浮特性，研究了另外的赋形剂的加入。特别地，制备了还包含表面活性剂(油酸，欧洲药典/英国药典)和潜溶剂(乙醇，100％美国药典-国家处方集)的制剂。表6示出了所测试的制剂的组成和观察到的沉降得分。

表6-含有不同量的HFA-134a、油酸和乙醇的pMDI制剂的沉降得分

观察到包含油和乙醇的制剂的悬浮得分大体类似于或低于不含此类赋形剂的那些制剂。然而，在某些样品中，观察到RPL554似乎已经溶解或重结晶。进行溶解度分析以评估在另外的赋形剂中RPL554溶解的程度。

实施例3-乙醇中RPL554的溶解度

根据表7中给出的美国药典/英国药典溶解度标准，最初视为RPL554实际上不溶于乙醇中。然而，在油酸存在下，具有最低产品剂量(10μg/致动)的溶解和重结晶的观察提示进一步研究乙醇中RPL554的溶解度。

表7-美国药典和英国药典溶解度标准

实验方法

通过将1.5mg的RPL554加入到具有乙醇、油酸和HFA-134a的普通14mL铝罐来制备样品。将赋形剂加入罐以维持50:1的乙醇/油酸比(参见表8)。也生产了含有RPL554、乙醇和仅HFA-134a的相应罐。用63μL pMDI阀压接具有缩短的浸管的罐(图3)，并通过该阀用HFA-134a将该罐填充到11.6g。浸管的长度足以仅延伸到液体推进剂/潜溶剂相中(即，在API颗粒已沉降之后)。将样品置于超声浴中30秒。

表8-用于评估乙醇中RPL554的溶解度的赋形剂浓度

在环境温度下将所有罐静置24小时，以沉降并建立溶解平衡。为了确定所溶解的API的量，每一罐在直立位置(通过装配到阀杆的套管)向10.0cm

结果

溶解的RPL554的量随着乙醇浓度的增加而增加。制剂中油酸的存在似乎对RPL554的溶解度没有影响(图4)。

根据美国药典/英国药典标准，乙醇中RPL554的溶解度的先前评估导致“几乎不溶”的分类。使用分析试剂级乙醇来进行原始评估。重新评估溶解度，这次使用无水乙醇(100％的美国药典-国家处方集乙醇，即在大规模pMDI HFA制剂混悬液制造中通用的乙醇的等级)发现乙醇中RPL554的溶解度约为2000分之1，其根据美国药典/英国药典标准为“极微溶解”。因此，意料不到地发现乙醇中RPL554具有某些溶解度。

对于混悬液制剂，潜溶剂/推进剂混合物中API的溶解度应当是最小的，以避免化学和物理不稳定性的潜在问题。发现与使用油酸和乙醇作为赋形剂相关的任何益处都被RPL554溶解和RPL554颗粒的奥斯特瓦尔德熟化的易损性显著超过。因此，确立了对于RPL554最有前途的pMDI制剂是仅在HFA-134a中的RPL554的混悬液制剂。

实施例4-仅HFA-134a制剂的验证

通过在额定压力的玻璃小瓶中制备样品，进一步评估仅HFA-134a制剂以确保RPL554足够悬浮用于通过pMDI递送。选择三个产品剂量(50、150和500μg/致动)。这些制剂的视觉评估表明，与市售的仅HFA-134a pMDI产品具有相当的混悬液质量和沉降率。

在用Aptar 63μL阀压接的14mL普通铝罐中，在3种剂量(50、150和500μg/致动)下制备实验室样品，进一步评估基于RPL554仅HFA-134a混悬液的制剂的产品性能属性。在通过新一代撞击(NGI)分析递送剂量均一性(DDU)和空气动力学粒径分布(APSD)之前，在存储、颠倒四天之前，将样品在超声浴中混合30秒。

递送剂量均一性(DDU)

每一产品剂量的三个样品一式三份，在罐寿命的开始、中间和结束时进行递送剂量均一性分析。表9示出了平均递送剂量结果。

总的来说，平均递送剂量接近对每一产品剂量的预期目标标签要求。

射出重量

在罐寿命的开始、中间和结束时测量射出重量，以通过寿命评估产品性能。

发现实验室制备的样品的射出重量在所有样品中一致，平均值为80.35±0.54mg(RSD＝0.67％，n＝9)。63μL的HFA-134a的理论射出重量为77.2mg。

空气动力学粒径分布(APSD)

测量空气动力学粒径分布，以便确定测试制剂的细颗粒分数(细颗粒分数，具有小于5μm的粒度的剂量％)。表9示出了结果。

表9-RPL554 HFA-134apMDI的空气动力学粒径分布和递送剂量的总结

图5示出了所确定的细颗粒剂量(FPD)与产品剂量之间的相关性。观察到剂量比例性。

实施例5-制剂稳定性

对所有RPL554制剂剂量进行稳定性研究。表10和表11呈现了对RPL554 HFA-134apMDI、500μg/致动产品的实施例数据，其用于分别在25℃/60和40℃/75％RH下进行的稳定性研究。数据显示了经过6个月稳定性期间一致的性能。

表10-RPL554 HFA-134apMDI,500μg/致动-25℃/60％RH储存条件的稳定性数据

表11-RPL554 HFA-134apMDI,500μg/致动-40℃/75％RH存储条件的稳定性数据