啤酒花中黄腐醇和异黄腐酚在防治农业病害中的用途

摘要

发明属于天然药物化学领域，公开了源于啤酒花中黄腐醇和异黄腐酚在防治由立枯丝核菌、油菜菌核病菌、番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌引起的病害中的用途，尤其是黄腐醇对立枯丝核菌和番茄灰霉病菌表现出优异的抑制作用，可用于制备农用杀菌剂来开发。

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，公开了来源于啤酒花中黄腐醇和异黄腐酚的新用途，具体涉及其在防治由油菜菌核病菌、立枯丝核病菌、番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、棉花枯萎病菌、稻瘟病菌引起的病害中的应用。

背景技术

植物病害是影响农业生产的主要因素之一，根据联合国粮农组织估计，全世界的粮食和棉花生产因病害常年损失在10％以上。目前世界各国对植物病害的防治主要是使用化学药剂，但是由于化学药剂的长期使用,引起了农药残留、环境污染、生物抗药性增强、伤害非靶标生物甚至破坏生态平衡等一系列严重的问题，因此研究与开发能有效控制植物病原菌的高效、低毒、低残留的新型农药已成为目前农药创制的首要目标。从植物中寻找抑菌、杀菌活性物质是目前研究开发绿色杀菌剂的重要途径之一。

黄腐醇(Xanthohumol)和异黄腐酚(Isoxanthohumol)均为桑科，葎草属多年生攀援草本植物啤酒花(Humulus lupulus Linn.)球果中的主要活性成分。作为一种药食同源品，近年来的研究表明啤酒花具有健胃、安神、消食、利尿和止咳化痰的功效,常用于治疗食欲不振、失眠、浮肿、腹胀、癔症、肺结核、膀胱炎、胸膜炎等。针对其杀菌活性，研究表明：啤酒花中的α-/β-酸均有良好的抑菌作用，尤其对革兰氏阳性菌(包括葡萄球菌、分歧杆菌、链霉菌、微球菌、结核杆菌)的抑制效果明显，且黄腐酚对敏感和耐药葡萄球菌表现出较好的抑菌效果。但黄腐醇和异黄腐酚在防治植物病原真菌方面的研究尚未见报道。基于此，本发明以黄腐醇和异黄腐酚为研究对象，对其进行杀菌活性评价，发现这两种化合物对油菜菌核病菌，立枯丝核病菌、番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌均有一定的抑制作用，特别是对番茄灰霉病菌和立枯丝核菌的抑菌活性强。同时，黄腐醇和异黄腐酚作为先导化合物创制新型杀菌剂，具备天然源农药的优点，故其作为防治重要农作物病害的杀菌剂有良好的开发前景。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的缺陷，为农业生产提供天然源杀菌剂。黄腐醇和异黄腐酚在防治由油菜菌核病菌、立枯丝核病菌、小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌引起的病害中的应用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方法：一种防治由油菜菌核病菌、立枯丝核病菌、小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌引起的病害的药物，其中含有治疗有效量的黄腐醇(H1)和异黄腐酚(H2)化合物，如结构式I所示。

黄腐醇和异黄腐酚作为新型农用杀菌剂，具有以下优势：

1)黄腐醇和异黄腐酚是天然有效成分。其作为杀菌剂具有低毒、低残留、环境相容、不易产生抗性等特点，能够开发为用于生产绿色、无污染农产品的植物源农药，属于新型生物农药。

2)杀菌活性高。特别是黄腐醇对番茄灰霉病菌和立枯丝核菌引起的病害，其EC

3)杀菌谱广。黄腐醇和异黄腐酚对立枯丝核菌、番茄灰霉、小麦赤霉、棉花枯萎和稻瘟病菌等多种常见植物病害均有很好的抑制活性。

为了更好地理解本发明，以下通过具体实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明。但不应将此理解为对本发明的限制。

具体实施方式

实施例1：化学式(H1)～(H2)为分离获得，其结构鉴定与文献报道一致。黄腐酚(H1)CAS：6754-58-1，纯度>98％；异黄腐酚(H2)CAS：70872-29-6，纯度>98％。

实施例2：室内抑菌活性测定及结果

本实验中所用的植物病原菌为实验室4℃保存的菌种，采用的培养基为马铃薯琼脂葡萄糖培养基(简称PDA)。PDA培养基配方：马铃薯(去皮)200g，葡萄糖20g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，自然pH。

配置方法：将马铃薯洗净去皮，称200g切成小块，加水煮烂(煮沸20-30分钟，能被玻璃棒戳破即可)，用四层纱布过滤于烧杯中补足水至1000mL，根据实验需要加15-20g琼脂，加入20g葡萄糖，搅拌使其充分溶解后，分装于三角瓶中，121℃灭菌20分钟，冷却后备用。

实验方法

1)采用菌丝生长速率法。

1、先将6种植物病原菌在PDA平板上25℃培养3～6天活化。

2、将PDA培养基加热熔化，冷却至45-50℃，分别加入不同浓度番茄灰霉制成带药平板。

3、以无菌操作手续，用打孔器在培养3～6天的各菌株菌丝边缘(生长状况尽量一致)打取圆形菌饼(直径5mm)，再用接菌针挑至含药平板中央，然后将培养皿倒置于培养箱(25℃)中培养。

4、待空白对照组长满后观察测定菌丝的生长情况，并采用十字交叉法测得直径并处理数据，计算抑制率。

5、抑制率(％)＝(对照菌丝直径-处理菌丝直径)/(对照菌丝直径-菌饼直径)×100

6、每个处理重复3次。

表1黄腐醇和异黄腐酚对植物病原真菌的抑制活性

表2黄腐醇对番茄灰霉和立枯丝核菌的抑制活性

注:试验中每个处理设三次重复，表中数据为三次重复的平均值。

由表1生测结果可知，本发明涉及的黄腐醇和异黄腐酚对立枯丝核菌、番茄灰霉菌、小麦赤霉菌、棉花枯萎病菌和稻瘟病表现出较好的抑制活性，其中黄腐醇下对立枯丝核菌和番茄灰霉菌在10μg/mL抑制活性在50％以上。在表1的生测结果的基础上计算了黄腐醇对立枯丝核菌和番茄灰霉病菌的EC