技术领域
本发明属于药物新技术领域,涉及盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物的检测分析方法,更具体的是一种用于改善及预防蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及其引起的脑缺血症状的药物盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物的检测分析方法。
背景技术
法舒地尔氮氧化物作为盐酸法舒地尔氧化降解杂质,其结构中具有基因毒性警示结构,结构式如下所示,因此应严格控制其含量。目前盐酸法舒地尔已公开的有关物质测定方法为HPLC法(见中国药典2015年版二部),具体如下:
有关物质取本品,加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.3mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取lml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。精密量取对照溶液5ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为灵敏度溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以1.0%(v/v)三乙胺水溶液(用磷酸调节pH值至7.0)-甲醇(50:50)(v/v)为流动相;检测波长为275nm。理论板数按盐酸法舒地尔峰计算不低于3000。盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。取灵敏度溶液20μl,注入液相色谱仪,使主成分色谱峰的信噪比应不小于10。精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1%)(w/w),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)(w/w)。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的色谱峰忽略不计(0.05%)(w/w)。
经研究发现,在实际操作过程中,上述方法存在以下不足:法舒地尔氮氧化物与法舒地尔主峰重合。
法舒地尔氮氧化物
发明内容
本发明目的在于提供一种稳定性好、重现性好、操作简单、精密度高,用于盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物的检测方法。应用该方法测定治疗改善及预防蛛网膜下腔出血术后的脑血管痉挛及其引起的脑缺血症状的药物盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物,方便可行,准确度高,对人体和环境造成的危害小。
本发明实现上述目的所采取的技术方案是:
一种盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物的检测分析方法,采用高效液相色谱法,将盐酸法舒地尔用溶剂溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔1mg~100mg的溶液作为供试品溶液,注入高效液相色谱仪,进样体积为5~100μl,利用紫外检测器,检测波长210nm~350nm,甲醇-水溶液作为流动相,流动相流速为0.3~2.0ml/min,采用固定相烷基键合硅胶色谱柱,对盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物进行定量测定。
在一种实施例中,将盐酸法舒地尔用溶剂溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔1mg~100mg的溶液作为供试品溶液,所述溶剂为流动相或水,优选为流动相;供试品溶液浓度优选1~10mg/ml。
在一种实施例中,所述的流动相流速为0.3~2.0ml/min,最佳为1ml/min。
在一种实施例中,所述的流动相中含甲醇的体积比例范围为5%~80%,优选为60%;所述的水溶液的体积比例范围为20%~95%,最佳为40%。
在一种实施例中,盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物的检测分析方法其特征在于采用高效液相色谱法,所述的水溶液质量浓度范围为0.1%~2%,优选为1%。
在一种实施例中,所述的水溶液为磷酸溶液、三乙胺溶液、三氟乙酸溶液中的一种或其中几种的组合溶液,最优选为三乙胺溶液;所述的水溶液的pH为3~7。
在一种实施例中,所述的进样体积为5~100μl,优选为10~100μl,更优选为20μl。
在一种实施例中,所述固定相烷基键合硅胶色谱柱,优选固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱。
在一种实施例中,所述检测波长210nm~350nm,优选为220~260nm,更优选为257nm。
本发明的有益效果是:本发明利用方便快捷的高效液相色谱法,采用紫外检测器,选用适当的流动相和色谱柱,对盐酸法舒地尔中杂质法舒地尔氮氧化物进行定量分析检测,填补了法舒地尔氮氧化物成盐后在盐酸法舒地尔中残留无法检测的空白,提高了盐酸法舒地尔产品质量控制的检测手段。
附图说明
图1为法舒地尔氮氧化物色谱图;
图2为法舒地尔氮氧化物与盐酸法舒地尔混合样品色谱图。
具体实施方式
以下实施例说明本发明,但不以任何方式限制本发明。
仪器:高效液相色谱仪,包括液相泵、紫外检测器、进样器;
试剂:三乙胺(分析纯)、甲醇(色谱纯);
色谱柱:十八烷基键合硅胶色谱柱。
实施例1:
按照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至7.0)-甲醇(20∶80)为流动相;检测波长为254nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约50mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约5mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图,图1为法舒地尔氮氧化物色谱图,图2为法舒地尔氮氧化物与盐酸法舒地尔混合样品色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
实施例2:
照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至5.0)-甲醇(60∶40)为流动相;检测波长为257nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约100mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约10mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
实施例3:
照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至3.0)-甲醇(50∶50)为流动相;检测波长为260nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约10mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约5mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各100μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
实施例4:
照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.5%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至7.0)-甲醇(20∶80)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约100mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约10mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各50μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
实施例5:
照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至3.0)-甲醇(60∶40)为流动相;检测波长为257nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约20mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约5mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置25ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各100μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
实施例6:
照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以2.0%三乙胺水溶液(用磷酸调pH至7.0)-甲醇(90∶10)为流动相;检测波长为257nm。理论板数按法舒地尔氮氧化物峰计算不低于3000。
测定法:取本品约50mg,精密称定,置10ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另取法舒地尔氮氧化物对照品约5mg,精密称定,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取对照品贮备液1ml,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,再精密量取1ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,流动相流速为1ml/min,记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与法舒地尔氮氧化物峰保留时间一致的色谱峰,按外标法以峰面积计算,即得,含法舒地尔氮氧化物不得过0.00167%。
机译: 半导体样品中杂质的分析方法及半导体样品中的杂质集中器
机译: 精炼冶金硅中杂质含量的检测与分析方法
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