基于鲨鱼抗体可变区V-NAR的噬菌体文库及其构建方法

摘要

本发明提供基于鲨鱼抗体可变区V‑NAR噬菌体的合成肽库及其构建方法，设计V‑NAR框架序列，包括FR区、CDR1区、HV2区以及HV4区和随机化的CDR3区氨基酸序列，利用重叠延伸PCR获得上述完整的V‑NAR基因片段，并将其克隆至噬菌粒载体，转化至大肠杆菌，构建合成噬菌体文库。本发明提供一种新型V‑NAR框架序列，可作为鲨鱼V‑NAR抗体库的通用骨架，为抗体库的构建提供新的理论基础；利用构建的噬菌体库所筛选的Anti‑PD‑L1纳米抗体，具有潜在应用价值，可为新型抗肿瘤药物研发与获得提供新品种；所构建的基于鲨鱼抗体IgNAR的V‑NAR噬菌体库，可作为不同抗原的筛选平台，具有极高的生物医学应用价值。