一种重组IL2在毕赤酵母中的生产方法

摘要

本发明公开了一种重组IL2在毕赤酵母中的生产方法，包括如下步骤：步骤S1：重组质粒构建；步骤S2：感受态细胞制备；步骤S3：质粒的线性化；步骤S4：电转化；步骤S5：阳性克隆的菌落PCR鉴定及克隆的小量转接；步骤S6：阳性克隆的诱导及小量表达测试；步骤S7：放大纯化；在基因合成的过程中对IL2的基因进行了密码子的优化，且后期的表达小试进行了最优克隆的筛选及最优表达时间的优化，因此极大地提高了该蛋白的表达量，在载体构建中使用了无缝克隆的技术，从而使得重组IL2在pPICZαA载体中表达出tag free蛋白，后期使用疏水相互作用层析，缩短纯化流程，低温操作，从而极大地保障了蛋白活性。