猪瘟病毒E0、E2和IL2多组合重组腺病毒穿梭质粒的构建

摘要

采用RT-PCR扩增连接的方法将完整的猪瘟病毒主要抗原基因E0、E2基因和猪源细胞因子IL-2依次连接克隆入pIRES载体的MCSA和MCSB中,酶切、PCR鉴定正确插入,测序鉴定无氨基酸突变,得到10个重组pIRES质粒,然后酶切多组目的基因亚克隆入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,构建成功的9组重组腺病毒穿梭质粒可与腺病毒骨架载体进行细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒,进而转染获得多组重组腺病毒,为猪瘟病毒活载体疫苗的研究奠定基础.