芳基喹唑啉类DNA-PK抑制剂

摘要

本发明属于医药技术领域，具体涉及芳基喹唑啉类DNA‑PK抑制剂化合物、其药学上可接受的盐及其异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐及其异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其药学上可接受的盐及其立体异构体的方法，以及所述化合物、其药学上可接受的盐及其异构体的用途。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及芳基喹唑啉类DNA-PK抑制剂化合物、其药学上可接受的盐及其异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐及其异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其药学上可接受的盐及其立体异构体的方法，以及所述化合物、其药学上可接受的盐及其异构体的用途。

背景技术

癌症是全世界难治疗的恶性疾病，治疗难度大，死亡率高，给患者和家庭带来沉重的负担，是影响我国居民健康的主要疾病。近年来，我国癌症发病率明显增加，其死亡率也呈逐渐上升趋势，癌症防治面临着严峻的形势。

目前，放疗以及化疗是治疗癌症的最有效手段，同时放疗是对恶性肿瘤最有效的非手术治疗。放射线和相当多的抗癌药物均可直接或间接作用于DNA或DNA代谢过程，从而导致DNA损伤，其中，DNA双链断裂(DNA double strand break，DSB)对于癌细胞来讲是最致命的。DNA损伤后，会引发受损DNA修复等一系列细胞反应，而修复的结果就是提高癌细胞的存活，这也是肿瘤细胞对放化疗抵抗的机制之一。DNA双链断裂如果不及时和完整修复，癌细胞则会因细胞凋亡或/和有丝分裂障碍导致细胞死亡。因此，只要抑制这些DNA损伤的修复，就可以提高癌细胞对放化疗的敏感性，抑制细胞增殖。

在人等高等真核生物细胞中，DSB的修复主要是通过DNA依赖性蛋白激酶(DNA-Dependent Protein Kinase，DNA-PK)主导的DNA非同源末端连接(nonhomologous endjoining，NHEJ)进行，修复损伤的DNA的作用，保持细胞活性和基因组稳定性。NHEJ修复主要参与G1/S期DNA损伤修复，并且不需要DNA末端连接模板。NHEJ修复需要许多蛋白质和信号通路的共济协调。NHEJ的核心组成包括Ku70/80亚单位的异质二聚体，和催化亚单元DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PKcs)，共同组成有活性的DNA-PK酶复合物。DNA-PKcs属于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)超家族成员，一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶；其还包括ATM，ATR，mTOR和4个PI3K异构体。当DNA-PK与DNA断裂结合，才能激活其激酶活性。Ku的重要功能是与DNA末端结合，招募DNA-PKcs，二者组成DNA-PK全酶并激活DNA-PKcs；活化的DNA-PKcs引导Artemis蛋白(一种内切核酸酶)结合于受损位点，依靠其核酶活性进行DNA断端处理以利于连接修复，然后XRCC4/DNA-连接酶Ⅳ复合物被活化的DNA-PKcs招募，最后由DNA-连接酶Ⅳ定位并连接断裂的DNA双链末端，完成修复。XRCC4是与DNA-连接酶IV形成复合体的一种蛋白质，可以增加DNA-连接酶IV的活性。DNA-PKcs存在40个可自身磷酸化的氨基酸残基，最典型的自磷酸化位点发生在Ser2056(POR簇)和Thr2609(ABCDE簇)。NHEJ被认为通过三个关键的步骤开展：识别DSB——Ku70/80结合至不完全的DNA末端，募集两分子的DNA-PKcs至DSB的相邻侧；进行DNA加工以移除端点出的不可连接末端或其他损伤形式；最后连接DNA末端。

由于肿瘤细胞具有较高基础水平的内源性复制压力(癌基因诱导的复制压力)和DNA损伤，并且在肿瘤细胞中DNA修复机制效率较低，因此肿瘤细胞对DNA-PK的敏感性更高。

目前，开发高效且选择性好的DNA-PK的抑制剂具有重要的临床意义，其可协同增强放疗和化疗药效，有效抑制肿瘤生长，同时可有效降低对正常细胞的损伤，减少副作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种结构新颖的、对DNA-PK具有良好抑制作用的芳基喹唑啉类化合物。进一步的，该类化合物可用于增加受试者对于放疗和/或一种或多种抗癌剂的敏感性。更进一步的，该类化合物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用用于治疗良性肿瘤或癌症。

本发明的技术方案如下：

在一方面，本发明提供了如下通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，

其中，每一X

X

每一Y独立的选自CH、CR

环A选自6-10元芳基或5-10元杂芳基；

L选自-CR

R

或者R

R

R

m、n分别独立的选自1、2、3、4或5；

p、q分别独立的选自1、2或3。

在某些实施方案中，环A选自6-8元单环芳基或5-8元单环杂芳基。

在某些实施方案中，环A选自苯基、5-6元单环杂芳基。

在某些实施方案中，环A选自苯基或5-6元含氮单环杂芳基。

在某些实施方案中，环A选自5-6元含1-2个氮原子的单环杂芳基。

在某些实施方案中，环A选自苯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。

在某些实施方案中，环A选自苯基、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。

在某些实施方案中，环A选自吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。

在某些实施方案中，环A选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基。

在某些实施方案中，L选自-CR

R

或者R

R

在某些实施方案中，L选自-CR

R

或者R

R

在某些实施方案中，L选自-CR

R

R

在某些实施方案中，L选自-CR

R

R

在某些实施方案中，L选自-CR

R

R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，每一R

在某些实施方案中，R

R

每一R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，每一R

在某些实施方案中，每一R

在某些实施方案中，p、q分别独立的选自1或2。

在某些实施方案中，所述的化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，具有如下通式(II)所示的结构：

在某些实施方案中，所述通式(II)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，其中，

X

X

Y选自CH、CR

环A选自吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基或三嗪基。

L选自-CR

R

或者R

R

R

R

m、n、q分别独立的选自1、2或3。

在某些实施方案中，m、n、q分别独立的选自1或2。

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

在某些实施方案中，R

本发明中各技术方案之间可以相互组合形成新的技术方案，所形成的新的技术方案同样包括在本发明的范围之内。

在某些实施方案中，前述通式(I)或(II)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，选自如下化合物

在另一个方面，本发明还提供一种药物制剂，含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂、该药物制剂可为药学上可接受的任一剂型。药学上可接受的赋形剂是无毒性、与活性成分相容且其他方面生物学性质上适用于生物体的物质。特定赋形剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。

在某些实施方案中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入制剂、气雾剂、粉雾剂或喷雾剂等。

在另一方面，本发明还涉及前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体在制备药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

进一步的，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物制剂在制备药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一个方面，本发明还涉及前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

进一步，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物制剂在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

所述的电离辐射是指患者在接受放疗过程中所接受的各种不同能量的射线的辐射。

在另一方面，本发明还涉及前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或放疗敏感的药物中的用途。

进一步，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物制剂在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或放疗敏感的药物中的用途。

在另一个方面，本发明还提供一种药物组合物，其含有前述通式(I)或(II所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，以及一种或多种第二治疗活性剂，所述的第二治疗活性剂选自抗癌剂，包括有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA嵌合剂、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。

在某些实施方案中，所述的第二治疗活性剂可以是减轻或降低本发明化合物在用于治疗受试者疾病时所产生的一种或多种副作用的药物，也可以是增强本发明化合物药效的药物。

在某些实施方案中，所述药物组合物还包括一种或多种药学上可接受的赋形剂，所述赋形剂如前文所述。在另一方面，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一方面，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物组合物在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

在另一方面，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物组合物在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或放疗敏感的药物中的用途。

在另一方面，本发明还涉及含有前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物可用于治疗和/或预防良性肿瘤或癌症等疾病，所述的癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一方面，本发明还提供了一种治疗与DNAPK过度活化相关的疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，前述药物制剂或药物组合物；所述与DNAPK过度活化相关的疾病选自良性肿瘤或癌症，所述的癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一方面，本发明还提供了一种增强患者对于抗癌剂或放疗敏感性的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(I)或(II)所述化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，前述药物制剂或药物组合物；所述的抗癌剂如前文所述。

所述的“有效量”是指能够预防、减轻、延缓、抑制或治愈受试者病症的药物剂量。给药剂量的大小与药物给药方式、药剂的药代动力学、疾病的严重程度、受试者的个性体征(性别、体重、身高、年龄)等来确定。

在另一方面，本发明提供了如下通式(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，

其中，M选自卤素、硼酸或硼酸酯；

R

在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义，然而为了更好的理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本发明所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不符的时候，以本发明所提供的术语的定义和解释为准。

本发明所述的“卤素”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。

本发明所述的“C

本发明所述的“C

本发明所述的“C

本发明所述的“羟基C

本发明所述“羟基C

本发明所述“羟基C

本发明所述的“C

本发明所述的“6-10元芳基”包括“6-8元单环芳基”和“8-10元稠环芳基”。

本发明所述的“6-8元单环芳基”是指含有6-8个环碳原子的单环芳基，其实例包括但不限于：苯基、环辛四烯基等；优选苯基。

本发明所述的“8-10元稠环芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环碳原子的、不饱和的、具有芳香性的环状基团，优选“9-10元稠环芳基”，具体实例如萘基等。

本发明所述的“5-10元杂芳基”包括“5-8元单环杂芳基”和“8-10元稠杂芳基”。

本发明所述的“5-8元单环杂芳基”是指含有5-8个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8元单环杂芳基”包括例如“5-7元单环杂芳基”、“5-6元单环杂芳基”、“5-6元含氮单环杂芳基”、“6元含氮单环杂芳基”等，所述的“含氮杂芳基”中的杂原子至少含有一个氮原子，例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)，或者，包含2个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“5-8元单环杂芳基”的具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。所述“5-6元单环杂芳基”是指5-8元杂芳基中含有5-6个环原子的具体实例。

本发明所述的“8-10元稠杂芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不饱和的具有芳香性的环状结构。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。包括“9-10元稠杂芳基”，“8-9元稠杂芳基”等，其稠和方式可以为苯并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并5-6元杂芳基等；具体实例包括但不限于：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-异喹啉酮基、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。

本发明所述的“3-10元环烷基”包括“3-7元单环环烷基”和“8-10元稠环环烷基”。

本发明所述的“3-7元单环环烷基”是指含有3-7个环原子的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，本发明所述的“3-7元单环环烷基”包括“3-7元饱和单环环烷基”和“3-7元部分饱和单环环烷基”。所述“3-7元单环环烷基”优选“3-6元单环环烷基”、“5-6元单环环烷基”、“3-6元饱和单环环烷基”、“3-4元含氮单环环烷基”、“3-4元饱和含氮单环环烷基”等。其实例包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环己烯等。

本发明所述的“8-10元稠环环烷基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有8-10个环原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，其实例包括但不限于：

本发明所述的“3-10元杂环基”包括“3-7元单杂环基”和“8-10元稠杂环基”。

本发明所述的“3-7元单杂环基”是指至少含有一个杂原子(例如，含有1个、2个、3个、4个或5个)的且环原子数为3-7个的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。本发明所述的“3-7元单杂环基”包括“3-7元饱和单杂环基”和“3-7元部分饱和单杂环基”。所述“3-7元单杂环基”优选“3-6元单杂环基”、“5-6元单杂环基”、“3-6元饱和单杂环基”、“5-6元饱和单杂环基”、“3-4元含氮单杂环基”、“3-4元饱和含氮单杂环基”、“5-6元含氮单杂环基”、“5-6元饱和含氮单杂环基”等。其具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2H-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3H-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡啶基、哌啶酮基、四氢吡啶酮基、二氢哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基等。

本发明所述“8-10元稠杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有8-10个环原子的、且至少一个环原子为杂原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的稠环中其中一个环可以为芳香性环，但稠环整体不具备芳香性，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。其具体实例包括但不仅限于：吡咯烷基并环丙基、环戊基并氮杂环丙基、吡咯烷基并环丁基、吡咯烷基并哌啶基、吡咯烷基并哌嗪基、吡咯烷基并吗啉基、哌啶基并吗啉基、苯并吡咯烷基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并四氢呋喃基、苯并吡咯烷基、嘧啶并四氢吡喃基、四氢咪唑并[4,5-c]吡啶基、3,4-二氢喹唑啉基、1,2-二氢喹喔啉基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2H-色原烯基、2H-色原烯-2-酮基、4H-色烯基、4H-色烯-4-酮基、4H-1,3-苯并噁嗪基等。

本发明所述的“氧代基”是指被取代的位置为碳原子、氮原子或硫原子时，所述的碳原子、氮原子或硫原子可以被氧代形成C＝O、N＝O、S＝O或SO

本发明所述“任选被取代”是指被取代基上的一个或多个氢原子可以被一个或多个取代基“取代”或“不取代”的两种情形。

本发明所述的“抗癌剂”是指对肿瘤具有一定治疗作用的药剂，包括但不限于有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA嵌合剂、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂等；所述的肿瘤包括良性肿瘤和癌症。

本发明所述的“化疗”是化学药物治疗的简称，主要通过使用化学治疗药物杀灭癌细胞达到治疗的目的。

本发明所述的“放疗”是指一种肿瘤治疗方法，即肿瘤放射治疗，主要利用放射线进行肿瘤局部治疗，所述的“放射线”包括放射性同位素产生的α、β、γ射线和各类x射线治疗机或加速器产生的x射线、电子线、质子束及其他粒子束等。

本发明所述的“药学上可接受的盐”指化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH、-OH、-SO

本发明所述的“异构体”是指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明化合物可以有不对称中心，这类不对称中心各自独立地产生两个光学异构体。本发明的范围包括所有可能的光学异构体和它们的混合物。本发明所述的化合物若含有烯烃双键，除非特别说明，包括顺式异构体和反式异构体。本发明所述的化合物可以以互变异构体(官能团异构体的一种)形式存在，其通过一个或多个双键位移而具有不同的氢的连接点，例如，酮和它的烯醇形式是酮-烯醇互变异构体。本发明化合物含有螺环结构，受环的立体空间结构的影响，环上的取代基可存在于环两侧从而形成相对的顺式(cis)和反式(trans)异构体。各互变异构体及其混合物都包括在本发明的范围中。所有化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、内消旋体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物等，均包括在本发明范围中。

本发明化合物可通过对映体特异性合成或从对映异构体混合物拆分以得到个别对映异构体的形式制备。常规拆分技术包括使用各种众所周知的色谱方法拆分起始物质或最终产物的对映异构体的混合物。

当公开的化合物的立体化学通过结构命名或描绘时，命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体为至少60％重量、70％重量、80％重量、90％重量、99％重量或99.9％重量纯。当单一异构体通过结构命名或描绘时，所描绘或命名的对映异构体为至少60％重量、70％重量、80％重量、90％重量、99％重量或99.9％重量纯。光学纯度重量％为对映异构体的重量与对映异构体重量加上其光学异构体的重量比率。

在另一方面，本发明还提供了本发明式(I)化合物的制备方法：

通式(I)化合物的制备方法一：

其中X、X’独立的选自F，Cl，Br，I；M选自硼酸或硼酸酯；相应X

(a)中间体1经wittig反应生成中间体2；

(b)中间体2在催化剂1和碱性条件下反应生成中间体3；

(c)中间体3和联硼酸频那醇酯在碱性条件和钯催化剂作用下反应生成中间体4；

(d)中间体4和中间体5在碱性条件、钯催化剂作用以及惰性气体保护的条件下反应生成通式(I)化合物。

通式(I)化合物的制备方法二：

其中X、X’、X”独立的选自F，Cl，Br，I； M选自硼酸或硼酸酯；相应X

(a)中间体1和中间体2在碱性条件和/或催化剂2条件下反应生成中间体3；

(b)中间体3和联硼酸频那醇酯在碱性条件和钯催化剂作用下反应生成中间体4；

(c)中间体4和中间体5在碱性条件、钯催化剂作用以及惰性气体保护的条件下反应生成通式(I)化合物。

以上制备方法一和方法二中，所有的反应均可在常规溶剂中进行，包括但不限于DMSO、DMF、乙腈、甲醇、四氢呋喃、甲苯、DMF、二甲醚、二氯甲烷、三氯甲烷、1,4-二氧六环、三氟乙酸、水，反应过程可以采用单一有机溶剂，也可以采用两种或两种以上的混合溶剂。或者，若某一反应物为液体，也可在无其他溶剂的条件下反应。

所述的碱性条件是指含有机碱或无机碱的条件，所述的有机碱独立的选自吡啶、三乙胺、N,N-二甲基苯胺、甲醇钠、乙醇钾、叔丁醇钾、叔丁醇钠、乙酸钾、N,N-二异丙基乙胺等；优选无机碱，独立的选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢化钠、氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化锂、醋酸钾、醋酸钠、磷酸钾、磷酸钠等。

所述的酸性条件是指含有有机酸或无机酸的条件，所述的有机酸独立的选自甲酸、醋酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、酒石酸等；无机酸独立的选自盐酸、浓硫酸、氢溴酸、氢氟酸、硝酸、亚硝酸、硼酸等。

所述的钯催化剂独立的选自Pd(PPh

所述的催化剂1选自三甲基碘化亚砜。

所述的催化剂2选自氯化钯、醋酸钯、三苯基膦钯等。

所述惰性气体包括但不限于氮气、氩气等。

所述的“wittig反应”是指羰基在磷叶立德试剂的作用下变为烯烃的反应，又称叶立德反应或维蒂希反应。所述的磷叶立德是由卤代烃与三苯基磷反应生成，优选溴代烃基与三苯基磷反应。所述的磷叶立德试剂选自甲基三苯基溴化膦。

本发明中，利用有机合成领域技术人员众所周知的方法，可以分离和纯化本发明的化合物和中间体。分离和纯化化合物的常规方法的例子可以包括但不局限于：在固体载体(例如，硅胶、氧化铝或用烷基硅烷衍生的二氧化硅)上进行色谱分离，薄层色谱分离，在各种压力下蒸馏，真空升华，研磨，例如，下面所描述的方法："Vogel's Textbook ofPractical Organic Chemistry",5th edition(1989),Furniss等人，pub.LongmanScientific&Technical,Essex CM20 2JE,England。

应当理解，化学反应中如果涉及到不需要参与反应的活性基团如-NH

本发明制备方法中所直接采用的原料和/或中间体可以市购也可以自制，本领域技术人员可根据已知的常规的化学反应制备方法得到该中间体，其制备方法也在本发明的保护范围之内。

发明的有益效果

1、本发明化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体具有优异的DNA-PK抑制作用，其在生物体内具有良好的药代动力学性质，作用持久，生物利用度高，能够增强癌细胞对放疗和/或一种或多种抗癌剂的敏感性。

2、本发明化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体对良性肿瘤和癌症具有较好的治疗作用。

3、本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。

具体实施方案

下面将结合具体实施方式对本发明技术方案进行描述，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

缩写：

DIEA:N,N-二异丙基乙胺；Pd

制备例一：(5-溴-2-氯-4-氟苯基)(6-甲氧基哒嗪-3-基)甲酮的制备

1.1-溴-5-(溴甲基)-4-氯-2-氟苯的制备

1-溴-4-氯-2-氟-5-甲基苯(20.0g,89.5mmol),NBS(15.9g,89.5mmol)，AIBN(1.47g,9.0mmol)溶于CCl

2.2-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)乙腈的制备

1-溴-5-(溴甲基)-4-氯-2-氟苯(24.5g,87.7mmol)，K

3.2-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-2-(6-甲氧基哒嗪-3-基)乙腈的制备

KOH(2.3g,40.2mmol)，溶于DMF(15mL)，20℃搅拌30min，将2-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)乙腈(5.0g,20.1mmol)溶于DMF(5mL)加入到反应体系中，20℃搅拌30min，加入3-氯-6-甲氧基哒嗪(1.8g,12.6mmol)，加毕50℃反应2h。降至20℃，倒入饱和食盐水中，乙酸乙酯萃取，有机相干燥浓缩，C18柱纯化(乙腈＝0-80％)得标题化合物(930mg，收率21.0％)。

4.(5-溴-2-氯-4-氟苯基)(6-甲氧基哒嗪-3-基)甲酮的制备

将2-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-2-(6-甲氧基哒嗪-3-基)乙腈(930mg,2.6mmol)溶于乙腈(30mL)，加入KOt-Bu(394.0mg,2.6mmol)，20℃搅拌20min，降至0℃，滴加H

1.7-溴-8-氟喹唑啉-4(3H)-酮的制备

将2-氨基-4-溴-3-氟苯甲酸(5g,21.36mmol)溶于甲酰胺(20mL)中，N

2.7-溴-4-氯-8-氟喹唑啉的制备

将7-溴-8-氟喹唑啉-4(3H)-酮(3g,12.39mmol)溶于POCl

3.7-溴-8-氟-4-((4-甲氧基苄基)氧基)喹唑啉的制备

将对甲氧基苄醇(1.71g,12.39mmol)溶于甲苯(10mL)中，加入NaH(60％，0.59g,14.87mmol),20℃反应1小时，将反应液滴加入7-溴-4-氯-8-氟喹唑啉(3.8g粗品)的甲苯溶液(20mL)中，继续搅拌2小时。加水(50mL)，EA(3*150mL)萃取，合并有机相，旋干，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得目标产物(1.89g，两步产率42.2％)。

4.4-(8-氟-4-((4-甲氧基苄基)氧基)喹唑啉-7-基)吗啉的制备

将氮气氛围下，将7-溴-8-氟-4–((4-甲氧基苄基)氧基)喹唑啉(200mg,0.55mmol),吗啉(57.4mg,0.66mmol),Pd

5.8-氟-7-吗啉代喹唑啉-4(3H)-酮的制备

将4-(8-氟-4-((4-甲氧基苄基)氧基)喹唑啉-7-基)吗啉(100mg,0.27mmol)溶于三氟乙酸(2mL)中，20℃下搅拌6小时，蒸干，中压制备(乙腈:水＝90:10)得产物(41mg，产率60.7％)。

6.4-(4-氯-8-氟喹唑啉-7-基)吗啉的制备

将8-氟-7-吗啉代喹唑啉-4(3H)-酮(40mg,0.16mmol)溶于POCl

实施例一：4-(4-(4-氯-2-氟-5-(1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)环丙基)苯基)喹唑啉-7-基)吗啉(化合物1)的制备

1.3-(1-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)乙烯基)-6-甲氧基哒嗪的制备

氮气氛围下，0℃将甲基三苯基溴化膦(536mg,1.5mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入正丁基锂(2.5M,0.63mL)己烷溶液，搅拌1h，再将(5-溴-2-氯-4-氟苯基)(6-甲氧基哒嗪-3-基)甲酮(344mg,1mmol)加入到反应瓶中，继续反应6小时，加水(20mL)和乙酸乙酯(3*50mL)萃取，合并有机相，旋干，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化得到目标产物(120mg，产率35％)。

2.3-(1-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)环丙基)-6-甲氧基哒嗪的制备

氮气氛围下，将三甲基碘化亚砜(116.6mg,0.53mmol)溶于DMSO(10mL)中，加入氢化钠(60％,21.2mg,0.53mmol),搅拌2h,再将3-(1-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)乙烯基)-6-甲氧基哒嗪(120mg,0.35mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，缓慢加入反应瓶中，20℃下继续反应5小时，加水(10mL)和乙酸乙酯(3*20mL)萃取，饱和食盐水(3*20mL)洗有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)纯化得到目标产物(35mg，产率28％)。

3.3-(1-(2-氯-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基)环丙基)-6-甲氧基哒嗪的制备

氮气氛围下将3-(1-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)环丙基)-6-甲氧基哒嗪(35mg,0.1mmol)，联硼酸频那醇酯(30.5mg,0.12mmol)，Pd(PPh

4.4-(4-(4-氯-2-氟-5-(1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)环丙基)苯基)喹唑啉-7-基)吗啉的制备

氮气氛围下，将4-(4-氯-喹唑啉-7-基)吗啉(24.9mg,0.1mmol),Pd(PPh

分子式:C

实施例二：4-(4-(4-氯-2-氟-5-((6-甲氧基哒嗪-3-基)氧基)苯基)喹唑啉-7-基)吗啉(化合物2)的制备

1.7-吗啉喹唑啉-4-醇的制备

将7-氟喹唑啉-4-醇(2.0g,12.2mmol)溶于吗啉(20mL)中，体系升温至90℃反应15小时。反应结束，体系冷却至20℃，过滤，干燥滤饼得到产物(1.8g)，直接用于下一步。

2.4-(4-氯喹唑啉-7-基)吗啉的制备

将7-吗啉喹唑啉-4-醇(1.8g，7.8mmol)溶于三氯氧磷(33mL)中，加入DIEA(503mg，3.9mmol)，加毕，110℃下反应3小时。反应结束，体系直接旋干，加入水(50mL)，DCM萃取三遍(3*50mL)，合并有机相，无水Na

3.2-氯-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯酚的制备

将5-溴-2-氯-4-氟苯酚(700mg,3.1mmol)溶于二氧六环(20mL)，加入联硼酸频那醇酯(953mg,3.8mmol)，Pd(PPh

4.2-氯-4-氟-5-(7-吗啉喹唑啉-4-基)苯酚的制备

在2-氯-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)苯酚的二氧六环溶液体系中，加入4-(4-氯喹唑啉-7-基)吗啉(650mg,2.6mmol)，Na

5.4-(4-(4-氯-5-((6-氯哒嗪-3-基)氧基)-2-氟苯基)喹唑啉-7-基)吗啉的制备

将2-氯-4-氟-5-(7-吗啉喹唑啉-4-基)苯酚(630mg,1.8mmol)溶于甲苯(25mL)中，加入3,6-二氯哒嗪(392mg,2.6mmol)，醋酸钯(40mg,0.2mmol)，K

6.4-(4-(4-氯-2-氟-5-((6-甲氧基哒嗪-3-基)氧基)苯基)喹唑啉-7-基)吗啉的制备

将4-(4-(4-氯-5-((6-氯哒嗪-3-基)氧基)-2-氟苯基)喹唑啉-7-基)吗啉(340mg,0.7mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入甲醇钠(47.0mg,0.9mmol)，CuI(28.0mg,0.1mmol)。加毕，体系在于110℃下微波反应3小时。反应结束，体系冷却至20℃，旋干，正相柱层析(MeOH:DCM＝1:20)出产物(50mg，收率14.8％)。

分子式:C

实施例三：N-(2-氯-4-氟-5-(7-吗啉代喹唑啉-4-基)苯基)-6-甲氧基哒嗪-3-胺(化合物3)的制备

1.N-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-6-氯哒嗪-3-胺的制备

将5-溴-2-氯-4-氟苯胺(100.0mg,0.44mmol)溶于THF(5mL)中，加入60％NaH(35.0mg,0.53mmol)，25℃反应0.5小时，加入3,6-二氯哒嗪(78.0mg,0.53mmol)，80℃反应16小时，加水淬灭，EA萃取，柱层析分离(EA:PE＝1:5)得到产物(130mg，收率88％)。

2.N-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-6-甲氧基哒嗪-3-胺的制备

将N-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-6-氯哒嗪-3-胺(130.0mg，0.38mmol)溶于甲醇(4mL)中，加入CH

3.N-(2-氯-4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)苯基)-6-甲氧基哒嗪-3-胺的制备

将N-(5-溴-2-氯-4-氟苯基)-6-甲氧基哒嗪-3-胺(120.0mg,0.36mmol)溶于二氧六环(10mL)，加入联硼酸频那醇酯(110.0mg,0.43mmol)，Pd(PPh

4.N-(2-氯-4-氟-5-(7-吗啉代喹唑啉-4-基)苯基)-6-甲氧基哒嗪-3-胺的制备

在上一步反应体系中，加入4-(4-氯喹唑啉-7-基)吗啉(110.0mg,0.44mmol)，Na

分子式:C

实施例四：N-(2-氯-4-氟-5-(7-吗啉代喹唑啉-4-基)苯基)-6-甲氧基-N-甲基哒嗪-3-胺(化合物5)的制备

将N-(2-氯-4-氟-5-(7-吗啉代喹唑啉-4-基)苯基)-6-甲氧哒嗪-3-胺(30mg,0.064mmol)溶于乙二醇二甲醚(1.5mL)中，分批加入NaH(60％,13mg,0.32mmol)，氮气保护下25℃反应0.5小时。加入碘甲烷(1.5mL)后再反应0.5小时。反应结束后，加入水，用EA萃取，有机相经高压分离(水/乙腈＝1/1)提纯，得产物(7.41mg,产率24.0％)。

分子式：C

实施例五：4-(4-(4-氯-2-氟-5-(1-(6-甲氧基哒嗪-3-基)环丙基)苯基)-8-氟喹唑啉-7-基)吗啉(化合物7)的制备

参考实施例一的方法制备，将4-(4-氯-喹唑啉-7-基)吗啉替换为4-(4-氯-8-氟喹唑啉-7-基)吗啉。

实施例六：N-(2-氯-4-甲氧基-5-(7-吗啉代喹唑啉-4-基)苯基)-6-甲氧基-N-甲基哒嗪-3-胺(化合物8)的制备

参考实施例三和实施例四的方法制备，将起始原料5-溴-2-氯-4-氟苯胺替换为5-溴-2-氯-4-甲氧基苯胺。

实验方案

以下提供本发明部分化合物的示例性实验方案，以显示本发明化合物有利活性和有益技术效果。但是应当理解，下述实验方案仅仅是对本发明内容的示例，而不是对本发明范围的限制。

缩写

EDTA：乙二胺四乙酸

DMSO：二甲基亚砜

Tris：三羟甲基氨基甲烷

Brij-35：月桂醇聚氧乙烯醚

DTT：二硫苏糖醇

供试品：本发明化合物，其结构式、制备方法见实施例。

实验试剂：

实验方法：

1.配制1倍的激酶缓冲液

1)1倍激酶缓冲液

40mM Tris,pH 7.5

0.0055％Brij-35

20mM MgCl

0.05mM DTT

2.化合物配制

1)化合物的检测起始浓度为1μM，配置成100倍浓度，即100μM。取2μl 10mM化合物，加入198μl 100％DMSO，配制成100μM化合物溶液。在96孔板上第二个孔中加入100μl的100倍的化合物，其他孔加入60μl的100％DMSO。从第二孔中取30μl化合物加入第三孔中，依次往下做3倍稀释，共稀释10个浓度。

2)转移100μl 100％DMSO和阳性对照wortmannin的最高浓度(400nM)分别到两个空的孔中作为Max孔和Min孔。

3)使用Echo转移50nl化合物到384孔板中。

3.配制2倍浓度的激酶溶液

1)使用1倍激酶缓冲液配制2倍DNA-PK激酶溶液。

2)转移2.5μl 2倍酶溶液到384孔板反应孔中。

3)振荡，混匀，室温下静置。

4.配制2倍浓度的底物溶液

1)使用1倍激酶缓冲液配制2倍底物溶液。

2)转移2.5μl 2倍底物溶液到384孔板反应孔中起始反应。

3)振荡，混匀。

5.激酶反应和终止

1)将384孔板盖上盖子，于28℃下孵育3小时。

2)转移5μl ADP-Glo reagent，于28℃下孵育2小时。

6.反应结果的检测

1)转移10μl激酶检测试剂到384孔板反应孔中终止反应。

2)室温下静止30分钟。

7.数据读取

在Envision读取样品数值。

8.抑制率计算

1)从Envision上复制数据。

2)把其转化成抑制率数据。

抑制百分数＝(max-conversion)/(max-min)*100.其中max是指DMSO对照的转化率，min是指无酶活对照的转化率，conversion是指测试化合物各浓度下的转化率。

3)将数据导入MS Excel并使用XLFit excel add-in version 5.4.0.8进行曲线拟合。实验结果：

表1本发明化合物体外酶学活性数据

实验结论：

结果表明，本发明化合物对DNA-PK激酶活性有较好的抑制作用。

实验例2：本发明化合物的CD1小鼠体内药代动力学实验

供试品：本发明部分化合物，自制，其化学名称和制备方法见各化合物的制备实施例。

受试动物：CD1小鼠，雌性，体重22-25g/只，9只。从北京维通利华实验动物技术有限公司购买动物生产许可证号：SCXK(京)2016-0006。

供试品溶液制备：

溶解方案：

IV(静脉推注)给药：2％DMSO+5％PEG400+93％(28％HP-β-CD)

配制过程：取化合物1(纯度94.4％)2.93mg，加入DMSO溶液55.4μL，涡旋、超声溶解，然后加入PEG400溶液138.5μL，涡旋混匀，最后加入28％HP-β-CD溶液2.58mL，涡旋混匀，50℃水浴20min，即得浓度为1mg/mL的澄清溶液用于IV给药。

28％HP-β-CD配制方法：称取28g HP-β-CD，加入适量注射用水溶解，再用注射用水定容到100mL，涡旋混匀，即得。

实验方法

IV给药剂量为5mg/kg，给药浓度为1mg/mL，给药体积为5mL/kg。

采血时间点：给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24h。

每个时间点通过眼内眦采集100μL左右的全血，放置到含有EDTA-K

血浆样品分析

采用蛋白沉淀法：取血浆20μL，加入内标(含甲苯磺丁脲50ng/mL的乙腈溶液)200μL，涡旋10min后，然后4000转/分钟离心20min，取上清液100μL，再加入100μL水，涡旋混匀3min后，LC-MS/MS分析。

表2：CD1小鼠PK评价结果(IV)

AUC

由表2的实验结果可知，在CD1小鼠体内通过IV方式给予本发明化合物后，本发明化合物的药代动力学性质良好。