一种基因点突变的诱导方法

摘要

本发明涉及一种产生基因点突变的融合蛋白及基因点突变的诱导方法。本发明找到了构建融合蛋白的新方法，通过将胞苷脱氨酶融合于nCas9/dCas9为代表的突变型核酸酶内部不同的插入位点，得到的新融合蛋白能对位于前间隔序列3‑14位的胞嘧啶实现有效的C‑T碱基突变。此外，通过将不同的脱氧腺苷脱氨酶及变体组合融合于nCas9/dCas9为代表的突变型核酸酶内部不同的插入位点，得到的新融合蛋白能对位于前间隔序列2‑16位的腺嘌呤实现有效的A‑G碱基突变。通过所述2种方法获得的不同的插入位点为基础的融合蛋白，其可突变范围各有差异。本发明可实现更广范围、更精细且安全性更高的C‑T单碱基替换和A‑G单碱基替换，能有效拓宽单碱基编辑工具的应用。