一种新的信标分析法在基因点突变检测中的应用

摘要

提出的方法将PCR技术和荧光检测分析法相结合用于基因突变检膊段对3'-末端为不同种类的DNA碱基的引物与模板匹配与错配的识别差异,可以准确、定性、实时地区别3'-末端DNA碱基的匹配与否以及基因突变的类型.首先利用常规PCR技术对含有可能点突变位置在内的DNA片段进行扩增,然后让引物及处于引物延伸下游的信标与扩增的模板DNA片段杂交,在上述DNA聚合酶存在下,如果引物与模板完全匹配,则延伸引物取代信标而产生荧光信号的猝灭,反之引物不能延伸,因而信标不能被取代,荧光保持.将这种方法应用到乳腺癌样品p53基因exon 7中第249个密码子(AGG)中第三个碱基突变的检测证明了其可行性.