一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基及制备方法

摘要

本发明公开了一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基，所述液体菌种培养基中含有精氨酸盐或精氨酸；所述的液体菌种培养基由以下重量百分比原料配制而成：其中水溶性淀粉2～3％，酵母粉0.5～1.5％，精氨酸盐0.2‑2.0％，磷酸二氢钾0.05～0.35％，硫酸镁0.05～0.20％，生物素0.0001～0.0005％，维生素B10.005～0.020％，水补足至100％。本发明通过选择性的加入精氨酸盐或精氨酸，可形成单位体积球状菌丝数量多、球状菌丝体占比高、球体坚韧紧实度高的种子，其发酵接种量可以很大，球状菌丝体抗机械剪切力也较强，不易破碎，可以适应更宽松的发酵硬件条件，种子中小的球状菌丝体可以直接以球状形态继续生长，而不必担心丝状菌丝体的成球条件控制，从而大大简化了生产，并缩短发酵时间。

说明书

技术领域

本发明涉及生物发酵技术领域，尤其涉及一种制备香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基。

背景技术

真菌(包括丝丛状真菌和大型食用真菌)菌丝体的液体发酵培养，是现代生物发酵技术在真菌培养中的应用体现，作为广泛应用的工业微生物，已在制药、食品、化妆品行业等领域广泛使用。液体发酵培养通常包括斜面种子培养、液体种子培养和发酵培养阶段。目前，对于蕈菌(大型食用真菌)菌丝体发酵培养阶段的研究居多，但是对于种子制备的关注则相对少得多，而具体针对球形菌丝体发酵的种子培养基配方研究更是少见。

目前，在真菌菌丝体在液体发酵培养过程中，因培养时各种条件因素的不同，会产生不同的菌丝体形态，如丝状、丝丛状、球状等。不同形态的菌丝体，某些代谢产物的量会有很大的不同，此外，由于真菌菌种的不同，球状菌丝体形成的条件，包括培养基配方、培养条件及发酵过程控制的参数，都有很大的差异。因此，有针对性地研究发现适合某一类菌种培养的条件和控制方法，具有非常重要的实际意义和应用价值。

实际研究和生产过程中，发酵用液体种子，其目的是获得大量的增殖能力强的活化菌丝体，此时如果不予以针对性的调控，菌丝形态多为丝状，接种发酵罐后，菌丝可以在发酵罐中快速生长。在种子阶段中，菌丝一般都很细弱、菌丝胞壁薄、多成丝状和丝丛状、不成球或成球比例低，即使成球形，其球体紧实度(密度)低，球体刺突柔软不坚挺。此时，接种后进行发酵培养时，如果接种量小，则培养时间长，成球少，效率低下；如果接种量大，菌丝体成球困难、球形畸偏或致丝丛状；此外，通气流速过高、通气方式和搅拌方式及搅拌速度对菌丝和菌球的剪切破碎等因素的影响，也容易造成菌丝体成球困难，影响最终发酵成效。因此基于种子菌丝的紧实度、坚韧度、抗剪切度等各种性质的不同，在规模化发酵时，需要根据发酵情况严格控制和及时调整通气量、通气方式、搅拌方式、搅拌速度等。而且，发酵期间经常还由于其他一些原因，造成菌丝体成球困难、球形畸偏或致丝丛状，影响最终发酵成效。而往往这些基于种子的原因，被归因于发酵过程的控制不到位而更加严密的调控，控制成本大幅增加，事倍而功半。

发明内容

本发明提供了一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基及制备方法，以解决上述技术问题。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：所述液体菌种培养基中含有精氨酸盐或精氨酸；所述的液体菌种培养基由以下重量百分比原料配制而成：其中水溶性淀粉2～3％，酵母粉0.5～1.5％，精氨酸盐0.2-2.0％，磷酸二氢钾0.05～0.35％，硫酸镁0.05～0.20％，生物素0.0001～0.0005％，维生素B

本发明还涉及一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基的制备方法，包括菌种培养基的制备方法为和液体菌种的培养方法为：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

步骤4、将茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

所述的步骤1至步骤3为菌种培养基的制备方法；所述的步骤4至步骤5为液体菌种的培养方法。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

本发明通过选择性的加入精氨酸盐或精氨酸，可形成单位体积球状菌丝数量多、球状菌丝体占比高、球体坚韧紧实度高的种子。这种球状菌丝种子，其发酵接种量可以很大，球状菌丝体抗机械剪切力也较强，不易破碎，可以适应更宽松的发酵硬件条件，如：高通气量、剧烈的通气方式和(或)搅拌方式、较快的搅拌速度等。种子中小的球状菌丝体可以直接以球状形态继续生长，而不必担心丝状菌丝体的成球条件控制，从而大大简化了生产，并缩短发酵时间。

附图说明

无

具体实施方式

以下将对本发明实施例的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施例，都属于本发明所保护的范围。

本发明涉及一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基及制备方法，液体菌种培养基中含有精氨酸盐或精氨酸；所述的液体菌种培养基由以下重量百分比原料配制而成：其中水溶性淀粉2～3％，酵母粉0.5～1.5％，精氨酸盐0.2-2.0％，磷酸二氢钾0.05～0.35％，硫酸镁0.05～0.20％，生物素0.0001～0.0005％，维生素B

本发明还公开了一种用于香菇菌球状菌丝体的液体菌种培养基的制备方法，包括菌种培养基的制备方法和液体菌种的培养方法；

菌种培养基的制备方法：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

液体菌种的培养方法：

步骤4、茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

本发明具体实施例如下：

下面对本发明的技术方案结合实施例作进一步说明。

〈实施例1〉

香菇菌液体发酵培养球状形态菌丝体的菌种培养基配方组成及重量百分比为：

水溶性淀粉2％，酵母粉0.5％，精氨酸盐0.20％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.05％，生物素0.0001％，维生素B

包括菌种培养基的制备方法和液体菌种的培养方法；

菌种培养基的制备方法：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

液体菌种的培养方法：

步骤4、茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

〈实施例2〉

香菇菌液体发酵培养球状形态菌丝体的菌种培养基配方组成及重量百分比为：

水溶性淀粉2.5％，酵母粉1.0％，精氨酸盐0.5％，磷酸二氢钾～0.25％，硫酸镁0.15％，生物素0.0002％，维生素B

包括菌种培养基的制备方法和液体菌种的培养方法；

菌种培养基的制备方法：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

液体菌种的培养方法：

步骤4、茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

〈实施例3〉

香菇菌液体发酵培养球状形态菌丝体的菌种培养基配方组成及重量百分比为：

水溶性淀粉2.5％，酵母粉1.0％，精氨酸盐1.0％，磷酸二氢钾～0.25％，硫酸镁0.25％，生物素0.0003％，维生素B

包括菌种培养基的制备方法和液体菌种的培养方法；

菌种培养基的制备方法：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

液体菌种的培养方法：

步骤4、茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

〈实施例4〉

香菇菌液体发酵培养球状形态菌丝体的菌种培养基配方组成及重量百分比为：

水溶性淀粉3％，酵母粉1.5％，精氨酸盐2.0％，磷酸二氢钾0.35％，硫酸镁0.20％，生物素0.0005％，维生素B

包括菌种培养基的制备方法和液体菌种的培养方法；

菌种培养基的制备方法：

步骤1、按配方比例将各培养成分装入容器中，搅拌溶解完全，分装至1000ml三角烧瓶中，装量400ml；

步骤2、121℃湿热蒸汽灭菌30分钟；

步骤3、放冷至常温即可接种茄形瓶固体菌种；

液体菌种的培养方法：

步骤4、茄形瓶固体菌种事先用无菌捣碎器捣成菌泥后接种至液体菌种培养基的三角烧瓶中；

步骤5、接种好的三角烧瓶置于恒温振荡摇床中进行培养，培养温度：25±1℃；培养转速：100-150rpm/min；培养10-12天。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。