半抗原直接包被的基于单克隆抗体的双酚A ABC酶联免疫吸附检测方法

摘要

本发明公开了一种半抗原直接包被的基于单克隆抗体的双酚A亲和素‑生物素化酶复合物酶联免疫吸附检测方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)包被：用包被缓冲液将半抗原BVA包被过夜；(2)封闭：包被后的BVA加入OVA进行封闭；(3)竞争：标准曲线孔将BPA标准溶液用DMSO稀释；待检测孔加入待检测样品；然后向每孔再加入BPA单克隆抗体；(4)加生物素标记的二抗：用抗体稀释液将生物素标记羊抗小鼠IgG1:10000稀释，孵育；(5)加ABC复合物：用10％胎牛血清溶液将ABC复合物稀释，100μL/孔；孵育；(6)显色；(7)终止；(8)结果测定：用酶标仪测定492nm处的吸光值。