技术领域
本发明涉及一种提高秋葵中酚类化合物含量及用于降血糖的方法,属于食品加工技术领域。
背景技术
糖尿病的治疗药物现在主要是胰岛素和口服降糖药,但还是有许多轻重不一的不良反应。与之相比,改善饮食习惯,采用膳食调节则具有安全、廉价和方便等优势。据报道,目前已有数百种植物源可以用做降糖改善剂,降糖活性物质包括多糖、肽类、黄酮类、萜类、生物碱、酚类等。
秋葵(Abelmoschus esculentus)为锦葵科秋葵属一年生草本植物,广泛栽培于热带、亚热带地区,而我国则主要于江西、贵州、广西、广东等地种植。黄秋葵嫩果可供食用,蕴含多种生物活性物质,例如多糖等黏性物质、多酚、黄酮类物质。现如今,秋葵已经成为了一种可能用来治疗糖尿病的食物,在全世界范围内得到广泛地关注。大部分对秋葵抗糖尿病作用已经在实验小鼠身上得到了证实。研究发现,秋葵种子可以通过阻止α-葡萄糖苷酶的作用来抑制葡萄糖在肠道内的吸收。α-葡萄糖苷酶是在小肠内帮助碳水化合物消化的一种生物酶,通过阻止碳水化合物的消化,可以抑制葡萄糖的吸收。另一项研究则发现,在肥胖小鼠模型中,秋葵可减少小鼠体重,降低血糖和血液中胆固醇含量,同时能增加糖的耐受量。因此,为了能进一步提升秋葵降血糖的作用,有必要提高秋葵中酚类化合物的含量。
提高果蔬品质的一个途径是采后非生物胁迫。非生物胁迫是由诸如紫外线、伤害、极端温度、改变的大气(臭氧、高氧、低氧)盐度、营养物质(缺乏和过剩)、干旱、植物激素和金属。植物通过合成次生代谢物来应对这些胁迫,其中许多次生代谢物具有促进健康的特性。
一种易于控制的采后非生物应激是愈伤处理,它包括对植物组织的机械损伤(如切割、粉碎)。在作物中,如胡萝卜,愈伤处理可通过激活苯丙类途径积累酚类化合物。据报道,胡萝卜愈伤处理后,酚类化合物增加高达200%。愈伤处理的主要优点是不需要很高的专业知识,而且很容易在工业水平上应用。目前并没有关于通过愈伤处理提高秋葵中酚类化合物含量的报道。同时胡萝卜是根茎类植物,秋葵是含有单独的果肉部分和种子部分,针对胡萝卜进行愈伤处理的方法不一定同样适用于秋葵。
发明内容
[技术问题]
秋葵具有降血糖的作用,但由于秋葵中的酚类化合物含量有限,且没有能在尽可能保留秋葵食用品质、营养成分的前提下提高酚类化合物含量的方法。
[技术方案]
针对上述问题,本发明提供了一种提高秋葵中酚类化合物的方法,本发明以新鲜秋葵为原料,通过将秋葵切断进行愈伤处理,能够有效地提高秋葵积累酚类化合物的能力,从而有效提高秋葵降血糖能力。
本发明提供了一种提高秋葵中酚类化合物的方法,所述方法以新鲜秋葵为原料,将秋葵切段后进行愈伤处理。
在本发明的一种实施方式中,所述提高秋葵中酚类化合物的方法包括以下步骤:
1)原料:将新鲜秋葵洗净、晾干;
2)切段:将步骤1)中的秋葵横向切成0.5cm-2cm的秋葵段;
3)愈伤:将步骤2)中切段的秋葵进行恒温愈伤处理,愈伤温度为15℃-37℃,愈伤时间为24h-144h。
在本发明的一种实施方式中,所述方法包括冻干处理,将步骤3)中经愈伤后的秋葵段转入-20~0℃冰箱中,放置24h,后在-40℃以下冷冻干燥24-48h。
在本发明的一种实施方式中,所述方法包括制粉,将上述冻干后的秋葵段研磨粉碎。
在本发明的一种实施方式中,步骤(2)中将秋葵横向切成长度为1cm的均一秋葵段。
在本发明的一种实施方式中,步骤(3)中所述愈伤温度为37℃。
在本发明的一种实施方式中,步骤(3)中所述愈伤时间为96h。
本发明提供了上述方法处理得到的秋葵。
本发明提供了一种降血糖的药物,所述药物中含有上述方法处理得到的秋葵。
本发明提供了一种保健食品,所述保健食品中含有上述方法处理得到的秋葵。
[有益效果]:
本发明以新鲜秋葵为原料,通过清洗、切段后、将秋葵放置于恒温箱中进行愈伤处理,秋葵在受伤胁迫下,产生次级代谢产物,来应对胁迫,积累大量酚类化合物,这些酚类化合物对α-葡萄糖苷酶产生了抑制作用,有效地增强了秋葵的降血糖作用。其中将秋葵切段1cm进行愈伤处理的效果尤为明显,与空白组相比,酚类化合物的含量提升将近3倍,对α-葡萄糖苷酶的抑制率从30%提升到73%,对α-淀粉酶抑制率从21%提升到64%。
具体实施方式
1、测定酚含量
制备秋葵提取液:将愈伤后冻干的秋葵,研磨成粉,精密称取0.2g秋葵粉末,置于50mL烧杯中,用15mL 70%乙醇溶液(v/v)边搅拌边提取40min,磁力搅拌速度设置成200r/min,提取后以5000r/min的转速离心15min,取上清液,用上述方法将残渣再重复上次操作后,滤液合并后用旋转蒸发仪旋蒸至干,再于70%乙醇(v/v)溶解并定容至10mL,于-4℃避光保存,待测。
分别取1mL上述制备的秋葵提取液的10倍稀释液,加入0.5mL 1mol/L的福林酚反应5min后加入2.0mL NaCO
配制1mg/mL没食子酸工作液,用移液管分别移取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL,5.0mL没食子酸工作液于100mL容量瓶中,再用水定容至刻度,摇匀,浓度分别为10ug/mL、20ug/mL、30ug/mL、40ug/mL,50ug/mL。取1mL不同浓度没食子酸溶液,加入0.5mL 1mol/L的福林酚反应5min后加入2.0mL NaCO
2、测定α-葡萄糖苷酶的抑制率
α-葡萄糖苷酶能将4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)水解产生4-硝基苯酚(pNP),pNP在405nm吸光度的大小来判断α-葡萄糖苷酶的活力。取pH6.8磷酸缓冲溶液配成的α-葡萄糖苷酶(0.1U/mL)溶液1mL与稀释10倍的提取液0.2mL混匀,37℃条件下水浴10min,加入0.5mL 4-硝基苯基-α-D-葡萄糖苷(5mmol/L),37℃条件下水浴10min,后加入0.1mol/L Na2CO3 1mL,用紫外分光光度计在405nm下测定其吸光度,记做Ai,用70%(v/v)乙醇溶液代替秋葵提取液,重复上述过程,测定吸光度,记做AC,采用磷酸缓冲溶液代替pNPG,重复上述过程,测定吸光度,记做Aj,采用70%(v/v)乙醇溶液代替秋葵提取液,采用磷酸缓冲溶液代替pNPG,重复上述过程,测定吸光度,记做Ad,抑制率(%)为(1-(Ai-Aj)/(AC-Ad))×100。
3、测定α-淀粉酶抑制率
实验组:将0.5mL的待测样品与0.5mL 1U/mL的α-淀粉酶溶液加入具塞试管中,在37℃水浴中反应10min,加入1wt.%的淀粉溶液1mL,继续37℃水浴反应10min,水浴反应结束后,立即加入1mLDNS显色剂,并且沸水浴5min,后冷却至室温,定容至10mL,于540mm处进行吸光度的测定。
背景组:将0.5mL的待测样品与0.5mL磷酸缓冲溶液加入具塞试管中,在37℃水浴中反应10min,加入1wt.%的淀粉溶液1mL,继续37℃水浴反应10min,水浴反应结束后,立即加入1mLDNS显色剂,并且沸水浴5min,后冷却至室温,定容至10mL,于540mm处进行吸光度的测定。
对照组:将0.5mL的70%乙醇溶液与0.5mL 1U/mL的α-淀粉酶溶液加入具塞试管中,在37℃水浴中反应10min,加入1wt.%的淀粉溶液1mL,继续37℃水浴反应10min,水浴反应结束后,立即加入1mLDNS显色剂,并且沸水浴5min,后冷却至室温,定容至10mL,于540mm处进行吸光度的测定。
对照背景组:将0.5mL的70%乙醇溶液与0.5mL磷酸缓冲溶液加入具塞试管中,在37℃水浴中反应10min,加入1wt.%的淀粉溶液1mL,继续37℃水浴反应10min,水浴反应结束后,立即加入1mLDNS显色剂,并且沸水浴5min,后冷却至室温,定容至10mL,于540mm处进行吸光度的测定。
抑制率={1-(A实验的吸光度-A背景的吸光度)-(A对照的吸光度-A对照背景组的吸光度)}*100%。
实施例1
切段后愈伤处理组:将新鲜秋葵清洗、切成长度为1cm的秋葵段,将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,研磨粉碎成粉。
划伤后愈伤处理组:将新鲜秋葵清洗,在秋葵表面的从蒂到尾方向划出4条3cm的伤口,后将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,研磨粉碎成粉。
对照组:将新鲜秋葵清洗切成长度1cm的秋葵段、立即置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,研磨粉碎成粉。
参照上文所述的方法测定以上三组实验中秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。表1为愈伤处理对秋葵酚含量、α-葡萄糖苷酶,α-淀粉酶抑制率的影响,由表1可以看出划伤和切段后进行愈伤处理,均能够提高秋葵中的酚含量,以及对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率。其中将秋葵切段1cm进行愈伤处理的效果更为明显,与空白组相比,酚类化合物的含量提升将近3倍,对α-葡萄糖苷酶的抑制率从30%提升到73%,对α-淀粉酶抑制率从21%提升到64%。
表1
实施例2
将新鲜秋葵清洗、切成长度为1cm的秋葵段,将其放置在15℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。将上述秋葵处理后,参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为9mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为38%,α-淀粉酶抑制率为29%。
实施例3
将新鲜秋葵清洗、切成长度为1cm的秋葵段,将其放置在25℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。将上述秋葵处理后,参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为13mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为49%,α-淀粉酶抑制率为43%。
实施例4
将新鲜秋葵清洗、切成长度为0.5cm的秋葵段,将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为16mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为68%,α-淀粉酶抑制率为53%。
实施例5
将新鲜秋葵清洗、切成长度为2cm的秋葵段,将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理96h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为15mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为65%,α-淀粉酶抑制率为51%。
实施例6
将新鲜秋葵清洗、切成长度为1cm的秋葵段,将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理24h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为9mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为40%,α-淀粉酶抑制率为31%。
实施例7
将新鲜秋葵清洗、切成长度为1cm的秋葵段,将其放置在37℃恒温条件下,愈伤处理48h,取出置于-20℃冰箱中冷冻24h,后在-40℃条件下冷冻干燥48h,取出,粉碎成粉。参照上文所述的方法测定秋葵粉中的酚含量,以及秋葵提取物对α-葡萄糖甘酶和α-淀粉酶的抑制率。
最终样品的酚含量为12mg GRE mg/DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为51%,α-淀粉酶抑制率为39%。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
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