一种鲜马乳中乳脂肪球膜的提取及其蛋白质组学分析方法

摘要

本发明一种鲜马乳中乳脂肪球膜的提取及其蛋白质组学分析方法，所述提取方法先将罗氏蛋白酶抑制剂加入到鲜马乳中，离心后得到乳脂肪层，清洗后得到乳脂肪球膜蛋白溶液；再加入二硫苏糖醇孵育、碘乙酰胺室温避光孵育，加入尿酸缓冲液、碳酸氢铵溶液、含有胰蛋白酶的碳酸氢铵溶液酶解后得到酶解液，最后终止消化得到含有肽混合物的溶液，脱盐后冷冻干燥，得到肽混合物。蛋白质组学分析方法先采用液相色谱‑高分辨质谱技术获得m/z为300‑1700范围内的肽段，之后完成峰提取和峰对齐，对蛋白质种类和数量进行定性分析，LFQ响应强度统计学分析，筛选显著性表达蛋白质，完成聚类和差异可视化，对显著性表达蛋白质进行生物信息学分析。