一种全身性Plin1基因敲除动物模型构建及鉴定方法

摘要

本发明属生物技术领域，提供一种全身性Plin1基因敲除动物模型构建及其鉴定方法。构建方法步骤为：针对Plin1基因2号外显子前后序列设计sgRNA序列，构建Plin1基因敲除载体并进行体外转录获得sgRNA；将sgRNA与Cas9蛋白混合后显微注射入小鼠受精卵中，获得全身性Plin1基因敲除小鼠。本项目的有益效果在于筛选出了一对评分最高的sgRNA序列，保证了项目的成功率；实现了Plin1基因2号外显子的大片段敲除，提高了敲除效率；针对敲除区域设计3条引物，成功鉴定出了小鼠的各类基因型，避免了大片段敲除时2条引物可能无法区分基因型的情况。为研究PLIN1的生物学功能及肥胖相关代谢性疾病的发病机制提供便捷、可靠、经济的动物模型和良好的基础。