建立三丁基氯化锡诱导下丘脑神经元细胞JNK信号通路介导凋亡模型的方法

摘要

本发明公开了一种建立三丁基氯化锡诱导新生雌性大鼠下丘脑神经元细胞JNK通路介导凋亡模型的方法。对出生24h内的新生雌性SD大鼠下丘脑神经元进行原代培养，免疫荧光染色法鉴定下丘脑神经元纯度后，分别暴露于含终浓度为0(对照)、100、150、200、250、300μg/L的TBTC的培养基共培养24h，采用cck‑8法检测细胞存活率，通过流式细胞术进行FITC‑AnnexinV/PI染色以检测早期和晚期凋亡细胞，Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核形态，透射电镜观察凋亡小体，采用Western blot观察凋亡相关蛋白JNK的表达。TBTC浓度为150μg/L可成功建立下丘脑神经元细胞JNK信号通路介导凋亡模型。