一种利用CRISPR/dCas9调控细菌纤维素网状结构的方法

摘要

本发明涉及一种利用CRISPR/dCas9调控细菌纤维素网状结构的方法，其特征在于：在木葡糖酸醋杆菌CGMCC 2955中构建了CRISPRi(CRISPR干扰)系统，利用CRISPRi来干扰galU的表达水平，并获得具有不同表达水平的galU菌株。通过利用CRISPRi表达和干扰galU的不同位点，获得了不同表达水平的galU菌株(3.20％～3014.84％)。通过对BC特性的测试，发现BC的孔隙率与galU表达水平呈负相关。BC的结晶度与galU的表达水平呈正相关，而工程菌株galU的表达水平低于对照菌株。BC是一种由细菌分泌的多糖。它由β‑1,4‑糖苷键线性连接的葡萄糖组成。与植物纤维素相比，BC具有许多优良的理化性能，如高纯度，超细网络结构，高机械强度，高结晶度，高亲水性，良好的生物相容性和生物降解性。由于不同应用领域对BC结构特性的不同要求，可以通过调节galU的表达改变BC的网状结构，使其在更广泛的领域中使用。本发明提出了一种调整BC网络结构的新方法，为BC在不同领域的应用提供了理论依据。