一个抑制BMPR-1B基因表达合成的shRNA分子

摘要

本发明提供的一个抑制BMPR-1B基因表达合成的shRNA分子，根据GeneBank中绵羊BMPR-1B基因(NM_001009431.1序列)；用shRNA设计软件设计干扰BMPR-1B基因转录的shRNA分子群,从设计的34条shRNA分子中，根据结构和位置筛选出8条针对不同位点的shRNA序列进行合成；将合成的两条互补单链的shRNA分子经退火形成双链后，分别连接到pLL3.7慢病毒干扰载体上,构建了8个慢病毒干扰RNA质粒（pLL-BMPR-1B-shRNA），将干扰RNA质粒与BMPR-1B表达载体经脂质体转染293T法产毒，经荧光PCR及Westernblot检测表达，获得了7个显著抑制BMPR-1B基因的shRNA分子，在mRNA水平上抑制效率达90%以上，对BMPR-1B蛋白的抑制达80%以上。