一种人类原代培养细胞基因组编辑、定点基因敲入方法

摘要

本发明提供一种人类原代培养细胞定点基因敲入方法，利用基于切口酶产生DNA单链缺口的技术，辅以一套同源重组修复因子RecOFAR来实现高效、精确、定点的人类原代培养细胞基因组编辑，包括定点基因敲入整合。本发明方法大幅度提高人类原代细胞基因组同源重组整合的效率（可达到20%以上），大大降低成本；本发明方法提高基因组编辑的安全性，有效降低靶位点处（on‑target）随机序列增删（indels)发生的频率，并且有效降低脱靶（off‑target)频率。