一种鸡安卡拉病LAMP引物组、试剂盒及其检测方法

摘要

本发明提供了一种鸡安卡拉病LAMP引物组、试剂盒及其检测方法。所述鸡安卡拉病LAMP试剂盒包括2×反应液RM 12.5μL，内引物FIP、BIP 40μmol/L各1.0μL，外引物F3、B3 5μmol/L各1.0μL，Bst DNA聚合酶1.0μL，荧光染料Ⅰ0.5μL，以及环引物LF、LB 20μmol/L各1.0μL。所述试剂盒的检测方法，包括步骤：1)提取DNA模板；2)将LAMP反应体系与2.0μL的DNA模板混合，补水至25μL，然后加入20.0μL的石蜡油；3)通过Real‑Time PCR System设定反应条件63℃，30s，1个循环；60s，40个循环；每次循环结束时收集荧光信号。其引物组根据GenBank中公布的FADV‑4的核苷酸序列而设计，反应时间比Taqman法可缩短20min以上，而且无需额外购置专用实验仪器或耗材，适配度高。