盐酸氮卓斯汀在制备抑制结肠癌肿瘤生长药物中的应用

摘要

本发明公开了盐酸氮卓斯汀作为抑制结肠癌肿瘤生长药物的应用。盐酸氮卓斯汀是一种具有2,3二氮杂萘酮衍生物，经FDA批准可用于荨麻疹、过敏性哮喘、过敏性鼻炎等，作用强而持久。本发明中盐酸氮卓斯汀可用于抑制结肠癌细胞的生长，其对肿瘤生长的抑制效果显著。现有抗癌药物大部分价格昂贵，限制了药物的使用并且伴随明显毒副作用。盐酸氮卓斯汀毒副作用小且价格低廉，克服了现有的药物的不足。并且盐酸氮卓斯汀可与SN38、Oxaliplatin传统抗癌药物联用，可显著增强对癌细胞生长增殖的抑制效果。

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体为盐酸氮卓斯汀在制备抑制结肠癌肿瘤生长药物中的应用。

背景技术

盐酸氮卓斯汀(Azelastine HCL)是一种具有新结构的2,3二氮杂萘酮衍生物,经FDA批准可用于荨麻疹、过敏性哮喘、过敏性鼻炎等，作用强而持久。0.05％的盐酸氮卓斯汀常规滴眼液已有批准生产,主要用于治疗和预防季节性过敏性结膜炎。

癌症是世界上最难治疗的疾病之一。结肠癌(CRC)在全球恶性肿瘤死亡率居第二位。在我国,结直肠癌死亡率已位于第五位。目前对肠癌的治疗局限于放疗、化疗等。虽然放化疗可以抑制大部分的癌细胞，但是在杀死癌细胞的同时也会将正常细胞杀死，还能导致胃肠功能紊乱、骨髓抑制等毒副作用，大大降低了患者的生存质量并且长期化疗，恶性肿瘤细胞容易产生耐药性。而治疗癌症的药物大部分价格高昂，也限制了药物的应用。因此，寻找到一种毒副作用小，药效好、价格低的安全性抗癌药迫在眉睫。

盐酸氮卓斯汀除具有拮抗组胺作用外，尚有多种抗过敏作用，本品对引起过敏反应的白三烯和组胺等物质的产生、释放有抑制和直接的拮抗作用，可抑制试验性喘息和鼻过敏和荨麻疹等，作用强而持久。早先有相关报道氮卓斯汀能抑制炎症细胞的活化(如嗜酸性、嗜中性、嗜碱性和多核白细胞以及巨噬细胞)和抑制不同的介质释放(如白三烯,Na-p甲苯磺酰基-1-甲酯,超氧阴离子和血小板活化因子),减少嗜酸细胞移行,显著降低ICAM-1表达,降低血清嗜酸性阳离子(ECP)水平。也有文献报道氮卓斯汀可以增强布地奈德的抗炎症效果。

SN38、Oxaliplatin是传统的抗癌药物，但其易引起癌细胞的耐药性，且对癌细胞的增殖抑制效果不理想。若与盐酸氮卓斯汀联用，可起到更好的抑制癌细胞生长的效果。

尚未有文章表明氮卓斯汀和癌细胞增殖方面的关系。目前尚无报道或专利申请。

发明内容

本发明目的是提供盐酸氮卓斯汀在制备抑制结肠癌肿瘤生长药物中的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

盐酸氮卓斯汀在制备抑制结肠癌肿瘤生长药物中的应用，所述药物的活性成分是盐酸氮卓斯汀，其化学结构式是

优选的，所述的药物含有所述盐酸氮卓斯汀或其药用盐中的至少一种。

优选的，所述的药物含有药学上载体或赋形剂。

优选的，所述药物是片剂、胶囊、滴丸、冲剂或口服液。

药物的用途，把所述的盐酸氮卓斯汀用水溶解，口服使用，人的用量(mg/kg)＝小鼠的用量(mg/kg)/(0.0026/20(g))。

本发明的显著优点和有益效果：

(1)本发明结合体外与体内实验，结果表明盐酸氮卓斯汀可以抑制肠癌的生长，为结肠癌癌症的辅助治疗提供一种新的药物来源。

(2)盐酸氮卓斯汀是已经批准的可用于过敏鼻炎等疾病的药物，安全性高，开发利用的前景好，价格便宜，且毒副作用小。

(3)将盐酸氮卓斯汀与SN38、Oxaliplatin传统抗癌药物联用，可显著增加对癌细胞的抑制效果(图7-9是实验结果)。

(4)当用于口服时，可将其制备成常规的固体制剂如片剂、胶囊、液体制剂、颗粒剂、等；用于注射时，可将其制备成注射液。将盐酸氮卓斯汀可以按剂型通过静脉注射或口服的形式施加于需要这种治疗的患者。施加给需要治疗的患者的一般的剂量是：人的用量(mg/kg)＝小鼠的用量(mg/kg)/(0.0026/20)(g)，还可根据患者的年龄、病情等酌情变化。

附图说明

图1是盐酸氮卓斯汀对HCT116增殖的影响结果图。

图2是盐酸氮卓斯汀对DLD增殖的影响结果图。

图3是盐酸氮卓斯汀对HT29增殖的影响结果图。

图4是裸鼠体内皮下成瘤实验结果图。

图5是裸鼠体内皮下成瘤的量化实验结果图。

图6是裸鼠体重的变化曲线图。

图7是盐酸氮卓斯汀与喜树碱衍生物(SN38)、奥沙利铂(Oxaliplatin)传统抗癌药物联用对HCT116增殖的影响结果图。

图8是盐酸氮卓斯汀与喜树碱衍生物(SN38)、奥沙利铂(Oxaliplatin)传统抗癌药物联用对DLD增殖的影响结果图。

图9是盐酸氮卓斯汀与喜树碱衍生物(SN38)、奥沙利铂(Oxaliplatin)传统抗癌药物联用对HT29增殖的影响结果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

体外实验

对肠癌细胞(ATCC,Rockville,美国)用溶解于水的不同浓度的盐酸氮卓斯汀进行处理72小时，然后用检测细胞增殖的试剂盒(Beyotime Biotechnology,中国上海)进行WST-1实验检测细胞活性，以及克隆形成实验¹，研究不同浓度的盐酸氮卓斯汀对肠癌细胞增殖的影响。图1-3是显示体外实验结果，结果表明盐酸氮卓斯汀可抑制肠癌细胞的增殖。

1.Wang,Y.；Yu,R.Y.；Zhang,J.；Zhang,W.X.；Huang,Z.H.；Hu,H.F.；Li,Y.L.；Li,B.；He,Q.Y.,Inhibition of Nrf2enhances the anticancer effect of 6-O-angeloylenolin in lung adenocarcinoma.Biochemical pharmacology 2017,129,43-53.

实施例2

体内实验

选取21只6周龄、雌性裸小鼠(balb/c-nu/nu)购于上海斯莱克公司。对照组7只和实验组14只，构建肿瘤转移模型：

(1)每只裸小鼠需打入10⁶个结肠癌细胞HT29(ATCC,Rockville,美国)，用PBS重悬细胞HT29并和基质胶1:1混合，得到重悬细胞；

(2)在实验之前对裸鼠进行麻醉，通过无痛及有痛刺激来评估麻醉程度，确定裸鼠处于麻醉状态；

(3)用25G针头的微注射器取重悬细胞对裸鼠进行皮下注射，一共21只；

(4)在21只小鼠中打入结肠癌细胞HT29一周后，开始用灌胃的方式给药：将盐酸氮卓斯汀溶解于H₂O中，每只小鼠一次喂100μL。本实验共设置3个欧前胡素浓度梯度，分别为0mg/kg，10mg/kg和20mg/kg，各7只，每天喂药一次。每三天测量一下移植瘤的大小(测量移植瘤的长度和宽度，并按照长×宽^2/2计算移植瘤体积)和裸鼠体重。2至3周后，将裸鼠安乐死并将移植瘤取出。

图4-6是体内实验结果。图4-5显示裸鼠体内皮下成瘤及其量化的实验结果。肿瘤的生长曲线表明肠癌细胞成瘤能力受到裸鼠体内皮下成瘤的明显抑制，尤其是实验组在接受20mg/kg盐酸氮卓斯汀理时，相对于对照组肿瘤生长减少了74％，显著受到抑制。这个例子表明盐酸氮卓斯汀可以抑制结肠癌的肿瘤生长。而图6中显示三组之间小鼠体重并无差别，说明盐酸氮卓斯汀作为抗肿瘤药物的使用并没有毒副作用。

实施例3

体外实验

对肠癌细胞用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40μM)的盐酸氮卓斯汀与喜树碱衍生物(SN38)(6μM)、奥沙利铂(Oxaliplatin)(10μM)传统抗癌药物同时处理细胞24h、48h、72h，然后进行WST-1实验检测细胞活性实验，图7-9是显示体外实验结果。结果表明将盐酸氮卓斯汀与喜树碱衍生物(SN38)、奥沙利铂(Oxaliplatin)传统抗癌药物联合使用可明显抑制肠癌细胞(HCT116、DLD、HT29)的增殖。

本发明的实施方式不限于此，按照本发明的上述内容，利用本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，本发明还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更，均落在本发明权利保护范围之内。