一种产皱胃酶乳酸克鲁维酵母工程菌株的构建方法

摘要

一种产皱胃酶乳酸克鲁维酵母工程菌株的构建方法，它涉及一种产皱胃酶工程菌株的构建方法。方法：扩增得到的GG799的PMR1基因插入质粒pBluescript-II中得重组质粒pBluescript-II-PMR1，然后插入Zeocin抗性编码基因得重组质粒pBluesk-Z-PMR1，线性化后再转化乳酸克鲁维酵母GG799感受态细胞，构建GG799 PMR1基因缺陷型菌株；优化犊牛皱胃酶基因并插入GG799表达载体pKLAC1中得重组质粒pKLAC1-S-chymosin，线性化后转化PMR1基因缺陷型GG799感受态细胞即完成。本发明中所得的重组乳酸克鲁维酵母可用来生产制造干酪用的重组皱胃酶。