一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法

摘要

本发明属于果树杂交育种领域，特别涉及一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，包括以下步骤：(1)一次接穗培养；(2)砧木培养；(3)嫩对老一次嫁接；(4)强行摘心促脱离童期；(5)长接穗对结果枝二次嫁接；(6)下代杂交及本代果实鉴定。本发明创新性地集成应用了“嫩对老”嫁接、两次“强行摘心”、“长接穗对结果枝”二次嫁接、“阉刺”和“催花室诱导成花”等技术，在技术线路、原理与培育工艺流程上与传统常规做法有显著的创新与不同，缩短杂交育种的一个世代周期所需时长效果显著，是果树杂交选育种的更优手段。

说明书

【技术领域】

本发明属于果树杂交育种领域，特别涉及一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法。

【背景技术】

目前，果树育种中获得杂交后代种子后，常规做法主要是通过实生苗直接种植或普通嫁接方式，让杂交后代植株在大田自然生长一定的时间直至其脱离童期，至开花结果后再进行下一代杂交或果实鉴定测试。通过实生苗直接种植或普通嫁接方式进行培育，其脱离童期到首次自然开花结果所需经历的时间较长。俗语“桃三李四杏五年”，说的是植物从种子出苗到结果的年限，通常桃需三年，李树四年，杏树五年，火龙果通常需24-36个月。因此，鉴定火龙果杂交后代需要漫长的时间，导致了对火龙果杂交育种的研究进展缓慢。

【发明内容】

针对上述现有技术的难点，本发明的目的在于提供一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，通过缩短火龙果等果树实生苗的童期，促进杂交后代实生苗提前成花结果来快速鉴定杂交后代的性状表现，从而达到加速育种的目的；克服用传统常规方法时，从实生苗生长至其脱离童期到首次自然开花结果所需经历的时间较长的缺点。

为解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，包括以下步骤：

(1)一次接穗培养：取火龙果杂交后代种子进行催芽露白，然后播种至营养杯内长成实生苗，当实生苗长至2cm时进行打顶处理，留下的植体老熟肥壮后即可作为步骤(3)的接穗；

(2)砧木培养：将桂红龙1号植株进行盆栽，刨除植株所有下垂枝上的刺座，以便于让营养集中供养朝上生长的枝稍，当朝上生长的枝稍生长至20cm时，进行打顶和阉刺处理，转绿后即可作为步骤(3)的砧木；

(3)嫩对老一次嫁接：取步骤(1)获得的接穗嫁接于步骤(2)的砧木上，嫁接和愈合培养的最适宜条件为温度20-25℃、相对湿度85-95％；

(4)强行摘心促脱离童期：将步骤(3)成活的盆栽转至全光照条件下培养，每3天浇一次0.1％的全营养液，当一次嫁接成活后的盆栽接穗抽生的一次新芽长至1cm时，将接穗上的其余刺座需全部阉除，同时进行摘心打顶处理，仅保留基部1-2节，以便于二次新芽抽生；

待二次新芽长至1cm时再进行摘心打顶处理，仅保留基部1-2节，以便于三次新芽抽生；

待三次新芽抽生至20-30cm时，若观察到刺座已经由刺毛变成正常针状刺座即标志着实生苗已脱离童期，此时进行摘心打顶处理，转绿后的三次新芽变成第三代枝梢；

(5)长接穗对结果枝二次嫁接：取步骤(4)获得的第三代枝梢20-30cm为枝穗，嫁接于步骤(2)中植株的下垂枝末端，成活20d后，转至催花室诱导第三代枝梢成花；

(6)下代杂交及本代果实鉴定：第三代枝梢开花时可进行下一代杂交育种，第三代枝梢的非下代杂交果实成熟后可进行果实鉴定测试。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明“缩短童期快速鉴定果树杂交后代”方法，创新性地集成应用了“嫩对老”嫁接、两次“强行摘心”、“长接穗对结果枝”二次嫁接、“阉刺”和“催花室诱导成花”等技术，在技术线路、原理与培育工艺流程上与传统常规做法有显著的创新与不同，缩短杂交育种的一个世代周期所需时长效果显著，是果树杂交选育种的更优手段。

2、本发明采用的缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，应用在火龙果等果树的杂交育种上，可使火龙果杂交育种的一个世代周期由原来长达24-36个月的自然周期，缩短至8-10个月，节省一半以上的时间。

3、本发明缩短童期快速鉴定果树杂交后代，标准化、一致化、可控程度高，易于同树种不同品种之间的横向比较。

4、本发明缩短童期快速鉴定果树杂交后代，应用在火龙果等果树的杂交育种上平均单个植物体占地少，操作简单节省人工。

5、本发明在产品外观结构、功效上与已公布的同类产品比较，有了实质性的创新和不同，在生产产品的工艺方法方法流程方面与已公布的类似产品有实质性的创新和设计。对本行业领域的创新和进步具有潜在的推动价值。

【附图说明】

图1是本发明实施例砧木培养的生长示意图；

图2是本发明实施例嫩对老一次嫁接的生长示意图；

图3是本发明实施例长接穗对结果枝二次嫁接的生长示意图。

【具体实施方式】

实施例1：

一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，包括以下步骤：

(1)一次接穗培养：取火龙果杂交后代种子进行催芽露白，然后播种至营养杯内长成实生苗，当实生苗长至2cm时进行打顶处理，留下的植体老熟肥壮后即可作为步骤(3)的接穗；

(2)砧木培养：将桂红龙1号植株进行盆栽，刨除植株所有下垂枝上的刺座，以便于让营养集中供养朝上生长的枝稍，当朝上生长的枝稍生长至20cm时，进行打顶和阉刺处理，转绿后即可作为步骤(3)的砧木；

(3)嫩对老一次嫁接：用锋利刀片切下步骤(1)获得的植体1.0cm作为接穗，采用贴接法嫁接于步骤(2)的砧木上，具体步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用美工刀在砧木顶部沿着棱的木质部垂直纵切一刀，深3cm，接着平行再切一刀，将该棱边切除一直角，拿着切除的棱边打圈摩擦5次砧木木质部，保留汁液于切口处；

③取1cm长的接穗，将接穗下切口贴放至砧木的水平面靠木质部一侧；

④取5cm长的绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；

最后将嫁接后的植株，放置于温度20℃、相对湿度85％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，7d后如接穗保持不变或略微萎蔫，即表明成活；若接穗萎蔫发干，表明愈合不良，可立即在另外一个棱边接上另外的接穗；

(4)强行摘心促脱离童期：将步骤(3)成活的盆栽转至全光照条件下培养，每3天浇一次0.1％的全营养液，当一次嫁接成活后的盆栽接穗抽生的一次新芽长至1cm时，将接穗上的其余刺座需全部阉除，同时进行摘心打顶处理，仅保留基部1节，以便于二次新芽抽生；

待二次新芽长至1cm时再进行摘心打顶处理，仅保留基部1节，以便于三次新芽抽生；

待三次新芽抽生至20cm时，若观察到刺座已经由刺毛变成正常针状刺座即标志着实生苗已脱离童期，此时进行摘心打顶处理，转绿后的三次新芽变成第三代枝梢；

(5)长接穗对结果枝二次嫁接：取步骤(4)获得的第三代枝梢20cm为枝穗，采用插接法嫁接于步骤(2)中植株的下垂枝末端，具体操作步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用枝剪在砧木末端横向剪断2cm，露出平整切口；

③在切口下方1cm的位置向髓心插入刀片直到与髓心相碰，刀刃向外侧慢慢转动直到外表皮看到黑点出现即可；

④取专用工具沿着髓心插入直到与刀片相碰，转动2圈，取出套筒清除茎肉，剪取20cm接穗，取专用工具对准髓心插入，按刻度用美工刀切入髓心旋转一周截取所需髓心，将接穗插入砧木，用绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；嫁接后的植株放置于温度20℃、相对湿度85％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，观察是否成活，成活后的盆栽转至全光照条件下，每3天浇一次0.1％的全营养液，培养2个月转至催花室诱导第三代枝梢成花；

(6)下代杂交及本代果实鉴定：第三代枝梢开花时可进行下一代杂交育种，第三代枝梢的非下代杂交果实成熟后可进行果实鉴定测试。

实施例2：

一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，包括以下步骤：

(1)一次接穗培养：取火龙果杂交后代种子进行催芽露白，然后播种至营养杯内长成实生苗，当实生苗长至2cm时进行打顶处理，留下的植体老熟肥壮后即可作为步骤(3)的接穗；

(2)砧木培养：将桂红龙1号植株进行盆栽，刨除植株所有下垂枝上的刺座，以便于让营养集中供养朝上生长的枝稍，当朝上生长的枝稍生长至20cm时，进行打顶和阉刺处理，转绿后即可作为步骤(3)的砧木；

(3)嫩对老一次嫁接：用锋利刀片切下步骤(1)获得的植体1.0cm作为接穗，采用贴接法嫁接于步骤(2)的砧木上，具体步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用美工刀在砧木顶部沿着棱的木质部垂直纵切一刀，深3.5cm，接着平行再切一刀，将该棱边切除一直角，拿着切除的棱边打圈摩擦5次砧木木质部，保留汁液于切口处；

③取1cm长的接穗，将接穗下切口贴放至砧木的水平面靠木质部一侧；

④取5.5cm长的绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；

最后将嫁接后的植株，放置于温度22℃、相对湿度88％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，7d后如接穗保持不变或略微萎蔫，即表明成活；若接穗萎蔫发干，表明愈合不良，可立即在另外一个棱边接上另外的接穗；

(4)强行摘心促脱离童期：将步骤(3)成活的盆栽转至全光照条件下培养，每3天浇一次0.1％的全营养液，当一次嫁接成活后的盆栽接穗抽生的一次新芽长至1cm时，将接穗上的其余刺座需全部阉除，同时进行摘心打顶处理，仅保留基部1.5节，以便于二次新芽抽生；

待二次新芽长至1cm时再进行摘心打顶处理，仅保留基部1.5节，以便于三次新芽抽生；

待三次新芽抽生至20cm时，若观察到刺座已经由刺毛变成正常针状刺座即标志着实生苗已脱离童期，此时进行摘心打顶处理，转绿后的三次新芽变成第三代枝梢；

(5)长接穗对结果枝二次嫁接：取步骤(4)获得的第三代枝梢25cm为枝穗，采用插接法嫁接于步骤(2)中植株的下垂枝末端，具体操作步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用枝剪在砧木末端横向剪断2.2cm，露出平整切口；

③在切口下方1.4cm的位置向髓心插入刀片直到与髓心相碰，刀刃向外侧慢慢转动直到外表皮看到黑点出现即可；

④取专用工具沿着髓心插入直到与刀片相碰，转动2圈，取出套筒清除茎肉，剪取26cm接穗，取专用工具对准髓心插入，按刻度用美工刀切入髓心旋转一周截取所需髓心，将接穗插入砧木，用绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；嫁接后的植株放置于温度23℃、相对湿度90％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，观察是否成活，成活后的盆栽转至全光照条件下，每3天浇一次0.1％的全营养液，培养2个月转至催花室诱导第三代枝梢成花；

(6)下代杂交及本代果实鉴定：第三代枝梢开花时可进行下一代杂交育种，第三代枝梢的非下代杂交果实成熟后可进行果实鉴定测试。

实施例3：

一种缩短童期快速鉴定火龙果杂交后代的方法，包括以下步骤：

(1)一次接穗培养：取火龙果杂交后代种子进行催芽露白，然后播种至营养杯内长成实生苗，当实生苗长至2cm时进行打顶处理，留下的植体老熟肥壮后即可作为步骤(3)的接穗；

(2)砧木培养：将桂红龙1号植株进行盆栽，刨除植株所有下垂枝上的刺座，以便于让营养集中供养朝上生长的枝稍，当朝上生长的枝稍生长至20cm时，进行打顶和阉刺处理，转绿后即可作为步骤(3)的砧木；

(3)嫩对老一次嫁接：用锋利刀片切下步骤(1)获得的植体1.0cm作为接穗，采用贴接法嫁接于步骤(2)的砧木上，具体步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用美工刀在砧木顶部沿着棱的木质部垂直纵切一刀，深5cm，接着平行再切一刀，将该棱边切除一直角，拿着切除的棱边打圈摩擦5次砧木木质部，保留汁液于切口处；

③取1cm长的接穗，将接穗下切口贴放至砧木的水平面靠木质部一侧；

④取6cm长的绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；

最后将嫁接后的植株，放置于温度25℃、相对湿度95％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，7d后如接穗保持不变或略微萎蔫，即表明成活；若接穗萎蔫发干，表明愈合不良，可立即在另外一个棱边接上另外的接穗；

(4)强行摘心促脱离童期：将步骤(3)成活的盆栽转至全光照条件下培养，每3天浇一次0.1％的全营养液，当一次嫁接成活后的盆栽接穗抽生的一次新芽长至1cm时，将接穗上的其余刺座需全部阉除，同时进行摘心打顶处理，仅保留基部2节，以便于二次新芽抽生；

待二次新芽长至1cm时再进行摘心打顶处理，仅保留基部2节，以便于三次新芽抽生；

待三次新芽抽生至20cm时，若观察到刺座已经由刺毛变成正常针状刺座即标志着实生苗已脱离童期，此时进行摘心打顶处理，转绿后的三次新芽变成第三代枝梢；

(5)长接穗对结果枝二次嫁接：取步骤(4)获得的第三代枝梢30cm为枝穗，采用插接法嫁接于步骤(2)中植株的下垂枝末端，具体操作步骤如下：①准备好美工刀，绑带，酒精，棉花等工具；

②用枝剪在砧木末端横向剪断3cm，露出平整切口；

③在切口下方1.5cm的位置向髓心插入刀片直到与髓心相碰，刀刃向外侧慢慢转动直到外表皮看到黑点出现即可；

④取专用工具沿着髓心插入直到与刀片相碰，转动2圈，取出套筒清除茎肉，剪取30cm接穗，取专用工具对准髓心插入，按刻度用美工刀切入髓心旋转一周截取所需髓心，将接穗插入砧木，用绑带固定接穗；

⑤阉除砧木上的所有刺座；嫁接后的植株放置于温度25℃、相对湿度95％、遮荫度90％的避雨棚内，进行愈合生长培养7d，观察是否成活，成活后的盆栽转至全光照条件下，每3天浇一次0.1％的全营养液，培养2个月转至催花室诱导第三代枝梢成花；

(6)下代杂交及本代果实鉴定：第三代枝梢开花时可进行下一代杂交育种，第三代枝梢的非下代杂交果实成熟后可进行果实鉴定测试。

试验1：采用上述具体实施例1中的贴接法，将接穗帖接在桂红龙1号的砧木上，具体参数参考实施例1，重复试验3次，计算帖接后的平均成活率，具体结果见表1。

表1：

由表1可知：无论是“桂红龙2号”还是“美龙1号”品种，其帖接在“桂红龙1号”上的平均成活率均达到80.0％，成活率高。

试验2：采用上述具体实施例1中的插接法，将接穗帖接在桂红龙1号的砧木上，具体参数参考实施例1，计算插接法后的平均成活率，具体结果见表2。

表2：

由表2可知：无论是“桂红龙2号”还是“美龙1号”品种，其插接在“桂红龙1号”上的平均成活率均达到85.0％以上，成活率高。

上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。