一种重组人卵细胞透明带ZP3蛋白及其制备方法

摘要

本发明公开了一种重组人卵细胞透明带ZP3蛋白及其制备方法。编码该重组人卵细胞透明带ZP3蛋白的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述编码ZP3蛋白的核酸序列，是经过大量筛选得到，该核酸序列经过密码子偏好改造，并消除了不利于表达的二级结构。所获ZP3序列，除了保证一级结构和天然一样，更能保证空间结构和天然的更接近。本发明将编码ZP3蛋白的核酸序列连接phoA启动子以及周质分泌信号肽StII序列，并转入大肠杆菌YK537中，构建得到高效、稳定分泌表达的ZP3大肠杆菌工程菌。经高密度发酵培养，磷浓度的高低调节诱导，ZP3以可溶形式存在于细胞周质。ZP3表达水平高，占菌体总蛋白20％左右。