利用染色体原位荧光杂交检验CHO外源基因插入位点的方法

摘要

本发明公开一种利用染色体原位荧光杂交检验CHO外源基因插入位点的方法，包括步骤：1)探针制备：通过切口平移的方法处理构建有插入基因片段的载体，获得带有荧光基团的DNA探针；2)染色体铺展：将CHO细胞加入秋水仙胺后进行固定及涂片；3)探针杂交：将步骤1)中制备的DNA探针和步骤2)经过处理的样品涂片进行杂交；4)显微镜观察荧光的分布。本发明结合了细胞学和染色体组学，通过荧光蛋白标记的探针，可以在荧光显微镜下直观地看到插入位点分布在哪一(几)条染色体的什么位置，从而对细胞株的单克隆性进行判断。通过FISH技术可以在一个星期内完成对细胞系单克隆性的检测，并且通量也比插入序列分析有了大幅提高。