一种提高冷冻原代肝细胞复苏后细胞活性的方法

摘要

本发明属生物技术领域,涉及生物材料保存技术,具体涉及一种体外哺乳动物肝细胞系统的复苏方法。本发明方法中将冷冻的原代肝细胞从液氮中取出水浴解冻后，将原冻存细胞液直接加入到含1 ml的incubation buffer，蓝染色后细胞计数并计算细胞活率；本方法省略了复苏原代肝细胞中的离心步骤，简化缩短了复苏原代肝细胞的方法时间；结果证明，通过避开离心步骤，能提高原代肝细胞的实际回收率和活性，便于后面试验的利用，以及未离心导致的DMSO的残留对原代肝细胞的代谢能力和活性无影响，本方法可以广泛被使用到药物在肝细胞中的代谢稳定性、肝细胞对药物的摄取评价等试验中。