应用数字PCR检测结直肠癌患者尿液中EGFR基因突变的方法

摘要

本发明公开了一种应用数字PCR检测结直肠癌患者尿液中EGFR基因突变的方法，具体步骤为：提取尿液中的DNA模板；制备ddPCR反应液；制备微滴；PCR扩増；检测微滴；分析数据以及显示结果；裂解液的组分构成为：10mM Tris‑HCl，1mM EDTA,0.5% SDS，检测的热循环模式为：95 ℃孵育10min；95℃15s，63℃孵育1min，共45个循环；最后置于4 ℃中。本发明将ARMS和数字PCR结合起来，通过检测患者尿液中EGFR突变情况，解决了现有技术中对结直肠癌患者进行EGFR基因突变检测时繁琐、费时和灵敏度低等问题，尤其是提供了病理组织之外的非创伤性检测。