一种蜘蛛神经毒素TX4(6‑1)重组蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种蜘蛛神经毒素TX4(6‑1)重组蛋白的制备方法，主要包括以下步骤：（1）根据TX4(6‑1)成熟毒素的氨基酸序列和毕赤酵母表达系统的特点优化并合成C‑端带有6×His标签的TX4(6‑1)的基因并构建毕赤酵母分泌表达载体；（2）转化重组载体到毕赤酵母宿主中，通过筛选，得到了高水平分泌表达的酵母转化子；（3）酵母宿主中表达重组蜘蛛昆虫神毒素TX4(6‑1)蛋白，经镍亲合层析法，快速得到了纯度达95%以上的重组蜘蛛昆虫神毒素TX4(6‑1)蛋白，该蛋白对家蚕具有显著毒性。本发明能快速获得大量稳定的重组蜘蛛昆虫神毒素TX4(6‑1)蛋白，对于抗虫领域，特别是培育抗虫植物品种有重要的价值，对提高农作物的产量具有重要的意义。