一种多羟基取代香豆雌酚类天然产物的合成方法

摘要

本发明公开了一种多羟基取代香豆雌酚类天然产物的合成方法，是以2‑溴‑4‑羟基苯乙酸为原料与羟基取代的水杨醛类化合物发生缩合反应，得到羟基取代的3‑(2‑溴‑4‑羟基苯基)‑7‑羟基香豆素类化合物，再一步在催化剂和微波加热条件下发生羟基化/氧化偶联反应，得到多羟基取代香豆雌酚类天然产物。本发明路线简捷、操作简便、多步串联反应同时发生、产率较高，而且反应条件温和，无需贵金属催化，原子经济性高，成本低。

说明书

技术领域

本发明涉及有机合成领域，特别涉及一种多羟基取代香豆雌酚类天然产物的合成方法。

背景技术

3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Coumestrol)是在苜蓿、三叶草及大豆中发现的一种多羟基取代香豆雌酚类植物雌激素，具有多种生物活性，如抑制活性鞘氨醇激酶(SPHK1)、抑制α-糖苷酶(α-glucosidase)、激活沉默调节蛋白1抗体(SIRT 1)、人孕甾烷X受体拮抗及神经保护等生物活性，以及可作为荧光探针用来对雌激素受体的高效筛选等(Steroids 2014,80,37；Neurol.Res.2014,36,198；Mol.Endocrinol.2008,22,838；J.Biomol.Screen.2014,19,253；J.Agric.Food Chem.2014,62,4298；Food Chem.2011,126,1057；Bioorg.&Med.Chem.Lett.2014,24,2560；Appl.Environ.Microbiol.2012,78,2896)。1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Aureol)是在绿豆(Phaseolus aureus Roxb.)中首次分离发现的多羟基取代香豆雌酚类天然产物(Z.Naturforsch.1983,38c,698)，具有抗真菌及神经保护活性(Physiol.Mol.Plant Pathology 1986,29,95；Planta.Med.2005,71,835)，其在自然界中的含量较为稀缺。因此，发明一种操作简便、实用的方法来制备多羟基取代香豆雌酚类天然产物具有重要意义。

Emers，Jurd，Sakamoto，Botting等团队曾完成了3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Coumestrol)的合成工作(J.Am.Chem.Soc.1958,80,4381-4383；J.Org.Chem.1964,29,3036–3038；J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1 2000,4339-4346；Tetrahedron.2004,1637–1642)。上述方法多使用贵重金属钯作为催化剂、反应步骤长、收率较低。另外，1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Aureol)的合成目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，提供一种简捷、高效、成本低、工艺简单的多羟基取代香豆雌酚类天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Coumestrol，结构式4a)和1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Aureol，结构式4b)的合成方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种多羟基取代香豆雌酚类天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Coumestrol)和1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Aureol)的合成方法，包括下述步骤：

(1)在溶剂A中，在碱A存在下，2-溴-4-羟基苯乙酸(结构式1)与羟基取代的水杨醛类化合物(结构式2)发生缩合反应，得到羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物(结构式3)；

(2)将羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物溶于溶剂B中，在催化剂B、配体B、碱B的存在下，在微波加热条件下发生羟基化/氧化偶联反应，经后处理得到多羟基取代香豆雌酚类天然产物(结构式4)。

所述羟基取代的水杨醛类化合物包括但不限于2,4-二羟基苯甲醛(结构式2a)与2,4,6-三羟基苯甲醛(结构式2b)。

所述羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物包括但不限于3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)与3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)。

步骤(1)中，缩合反应完毕后，将粗产物倒入冰水中，搅拌，抽滤，水洗滤饼，滤饼用氢氧化钠水溶液溶解，用乙酸乙酯洗涤，用盐酸酸化至pH＝3～4，析出固体，抽滤，水洗，收集滤饼，干燥后得到羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物(结构式3)。

步骤(2)中，羟基化/氧化偶联反应后，将反应液冷却至室温，过滤，滤液经乙酸乙酯洗涤后用盐酸酸化至pH＝4～5，抽滤，水洗，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得到多羟基取代香豆雌酚类天然产物(结构式4)。

步骤(1)中，所述的溶剂A可以但不限于是乙酸酐、丙酸酐、丁酸酐，优选溶剂A为乙酸酐；所述的碱A可以但不限于是醋酸钠、乙醇钠、三乙胺，优选碱A为三乙胺。

步骤(1)中，所述缩合反应的温度为100～140℃，优选温度为110℃；反应时间为5～9小时，优选反应时间为7小时。

步骤(1)中，2-溴-4-羟基苯乙酸、羟基取代的水杨醛类化合物、碱A的摩尔比为1：(1.0～1.2)：(1～4)，优选2-溴-4-羟基苯乙酸、羟基取代的水杨醛类化合物、碱A的摩尔比为1：1：2。

步骤(2)中，所述的催化剂B可以但不限于是硫酸铜、碱式碳酸铜、氧化铜、醋酸铜，碘化亚铜，优选催化剂B为醋酸铜；所述的配体B可以但不限于是乙醇酸、甘氨酸、1,10-邻菲罗啉、8-羟基喹啉、四甲基乙二胺，优选配体B为1,10-邻菲罗啉。

步骤(2)中，所述的碱B可以但不限于是氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、磷酸三钾、三乙胺，优选碱B为氢氧化钾；所述的溶剂B是蒸馏水、二甲亚砜、聚乙二醇-400(PEG-400)、二甲亚砜-水(体积比为1：1)、N,N-二甲基甲酰胺，优选溶剂B为二甲亚砜。

步骤(2)中，微波加热的温度为100～180℃，优选温度为120℃；反应时间为2～4小时，优选反应时间为3小时。

步骤(2)中，羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物、催化剂B、配体B、碱B的摩尔比为1：(0.1～0.4)：(0.1～0.4)：(5～15)，优选羟基取代的3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素类化合物、催化剂B、配体B、碱B的摩尔比为1：0.2：0.2：10。

本发明涉及的化学反应式如下：

需要指出的是，本发明所述的香豆雌酚类天然产物的合成方法可以不限于3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)与1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备。事实上，采用本发明所述的方法可以合成众多的含有羟基取代的香豆雌酚类天然产物及衍生物。

本发明与现有技术相比具有如下优点和效果：

(1)本发明路线简捷、操作简便、多步串联反应同时发生、产率较高；第一步中所得到的产物不需要复杂纯化处理，抽滤、干燥后可直接投入下一步反应。

(2)本发明无需无水无氧等苛刻的反应条件，无需贵金属催化，原子经济性高，符合现代绿色化学的理念并具有成本优势，有利于规模化制备及产业化实施。

附图说明

图1为3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的核磁共振氢谱(400MHz,DMSO-d₆)。

图2为3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的核磁共振碳谱(100MHz,DMSO-d₆)。

图3为1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的核磁共振氢谱(400MHz,DMSO-d₆)。

图4为1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的核磁共振碳谱(100MHz,DMSO-d₆)。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(25mmol,3.45g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量7.83g，收率94％。¹H>6,400MHz,ppm)δ10.38(s,OH),9.94(s,OH),7.89(s,1H),7.57(d,J＝8.8Hz,1H),7.26(d,J＝8.4Hz,1H),7.11(d,J＝2.0Hz,1H),6.86(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),6.83(dd,J＝2.0,8.4Hz,1H),6.78(d,J＝2.0Hz,1H)；¹³C>6,100MHz,ppm)δ161.3,159.6,158.2,155.2,143.0,132.5,129.9,126.9,123.6,123.4,118.9,114.8,113.4,111.4,102.0

(2)3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.99g，收率74％。¹H>6)δ10.71(s,1H),10.04(s,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,1H),7.16(d,J＝2.0Hz,1H),6.90-6.96(m,3H)(如图1所示)；¹³C>6)δ161.2,159.5,157.6,157.0,155.9,154.6,122.7,120.6,114.6,114.0,113.7,104.2,103.0,102.0,98.7(如图2所示)。

实施例2

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(25mmol,3.45g)、三乙胺(25mmol，2.53g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量6.91g，收率83％。

(2)3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、碱式碳酸铜(1mmol，0.24g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL蒸馏水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.87g，收率65％。

实施例3

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(25mmol,3.45g)、三乙胺(75mmol，7.59g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入80mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量7.16g，收率86％。

(2)3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、氧化铜(1mmol，0.08g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.78g，收率58％。

实施例4

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(27.5mmol,3.80g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量7.08g，收率85％。

(2)3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻啡罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钠(50mmol，20g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，水洗，干燥，浓缩，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.91g，收率68％。

实施例5

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(25mmol,3.45g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应9小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量7.49g，收率90％。

(2)天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、四甲基乙二胺(1mmol，0.12g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，水洗，干燥，浓缩，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.72g，收率54％。

实施例6

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(结构式3a)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4-二羟基苯甲醛(25mmol,3.45g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应5小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素，重量7.66g，收率92％。

(2)天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4a)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-7-羟基香豆素(5mmol,1.67g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻啡罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜-水(体积比为1：1，20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物3,9-二羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.97g，收率72％。

实施例7

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟基苯甲醛(25mmol,3.85g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量7.68g，收率88％。¹H>6,400MHz,ppm)δ10.75(s,OH),10.46(s,OH),10.05(s,OH),7.78(s,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,1H),7.08(d,J＝2.4Hz,1H),6.83(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H),6.29(d,J＝2.0Hz,1H),6.24(d,J＝2.0Hz,1H)；¹³C>6,100MHz,ppm)δ162.1,159.8,158.1,156.1,156.1,137.9,132.5,127.2,123.6,120.7,118.9,114.8,101.6,98.4,93.9

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(Aureol)，重量0.91g，收率64％。¹H>6,400MHz,ppm)δ10.92(s,OH),10.50(s,OH),9.96(s,OH),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(d,J＝1.6Hz,1H),6.93(dd,J＝2.0,8.4Hz,1H),6.41(d,J＝2.0Hz,1H),6.38(d,J＝2.0Hz,1H)(如图3所示)；¹³C>6,100MHz,ppm)δ161.4,159.8,157.7,156.6,155.8,155.6,155.2,120.2,114.4,113.8,100.7,99.1,98.6,95.2,94.9(如图4所示)。

实施例8

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟基苯甲醛(25mmol,3.85g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至100℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量6.81g，收率78％。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL蒸馏水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.88g，收率62％。

实施例9

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟基苯甲醛(25mmol,3.85g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至140℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入80mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量6.89g，收率79％。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至100℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.71g，收率50％。

实施例10

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟基苯甲醛(25mmol,3.85g)、醋酸钠(50mmol，4.10g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量7.33g，收率84％。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至160℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，水洗，干燥，浓缩，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.74g，收率52％。

实施例11

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟苯甲醛(25mmol,3.85g)、乙醇钠(50mmol，3.40g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量7.24g，收率83％。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应2小时。反应完成后，冷却至室温，倒入50mL水中，用稀盐酸酸化至pH＝4～5，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，水洗，干燥，浓缩，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.80g，收率56％。

实施例12

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟苯甲醛(25mmol,3.85g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、丁酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量6.55g，收率75％。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(1mmol，0.18g)、1,10-邻菲罗啉(1mmol，0.19g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应4小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.82g，收率58％。

实施例13

(1)3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(结构式3b)的制备

于50mL圆底烧瓶中，加入2-溴-4-羟基苯乙酸(25mmol,5.78g)、2,4,6-三羟苯甲醛(25mmol,3.85g)、三乙胺(50mmol，5.06g)、乙酸酐(10mL)，搅拌，油浴加热至110℃，反应7小时。反应完毕后，将反应液趁热倒入50mL冰水中，搅拌，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，收集滤饼，干燥后得到淡褐色固体，为3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素，重量7.68g，收率88％。。

(2)天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮(结构式4b)的制备

于50mL微波反应瓶中，依次加入3-(2-溴-4-羟基苯基)-5,7-二羟基香豆素(5mmol,1.75g)、醋酸铜(0.5mmol，0.09g)、1,10-邻菲罗啉(0.5mmol，0.095g)、氢氧化钾(50mmol，2.81g)、二甲亚砜(20mL)，搅拌，微波加热至120℃，反应3小时。反应完成后，冷却至室温，用乙酸乙酯洗涤(10mL×3)，水相用稀盐酸酸化至pH＝4～5，有固体析出，抽滤，水洗滤饼，干燥，用乙酸乙酯-石油醚重结晶，得白色固体，为天然产物1,3,9-三羟基-6H-苯并呋喃并[3,2-c]色满-6-酮，重量0.68g，收率48％。