风轮菜中黄酮类化合物的分离方法及黄酮组合物

摘要

本发明提供了一种风轮菜中黄酮类化合物的分离方法及黄酮组合物。该分离方法包括：对风轮菜地上部分总黄酮类物质进行硅胶柱色谱分离得到第1-320流分；对第133-176流分进行硅胶柱色谱分离并经薄层检测合并相同组分得到13个流分，对第231-260流分及第295-310流分进行MCI柱色谱分离并经薄层检测合并相同组分分别得到7个和8个流分，对第12-48流分及第49-55流分进行羟丙基葡聚糖凝胶柱层析分别得到3个和2个流分；然后依次对上述各组得到的流分进行C18反相高效液相色谱分离得到33种化合物。该方法从风轮菜分离到的黄酮类成分更全面，为其在治疗心血管疾病方面的药物用途奠定了物质基础和理论依据。

说明书

技术领域

本发明涉及中药组合物领域，具体而言，涉及一种风轮菜中黄酮类化合物的分离方法及黄酮组合物。

背景技术

风轮菜(Clinopodium chinense(Benth.)O.Kuntze)为唇形科风轮菜属植物。在我国主要分布于山东、浙江、江苏、安徽、福建、台湾、湖南、湖北、广东、广西及云南东北部等地。风轮菜性凉，味苦辛，有疏风清热，解毒消肿之功。用于治疗感冒、中暑、过敏性皮炎、肠炎、痢疾、血尿等症。首载于《救荒本草》(1406)草部，在我国有悠久的民间药用历史。现已被《中华人民共和国药典》收载为断血流药用，主要用于治疗各种出血症。

目前有研究表明，风轮菜总黄酮具有显著的活血化瘀活性，而风轮菜中的皂苷类成分又具有止血的功效，因此，风轮菜具有止血加活血的双向作用，即在止血的同时又可以祛除已瘀之血，达到止血而不留淤的效果。所以风轮菜总黄酮在活血化瘀，治疗和/或预防心血管疾病方面具有独特的优势，有着良好的研究开发前景。

然而，中医所记载的总黄酮并没有明确的化合物，且现有技术在对风轮菜中的总黄酮类物质进行提取分离时，不同研究者分离得到的黄酮类物质的种类都不尽相同。因而，到目前为止，研究人员仍然不清楚风轮菜中具有医药活性的总黄酮类物质具体有哪些。

因此，仍需要对现有技术进行改进，以提供一种成分相对齐全的黄酮组合物，为从风轮菜的天然产物中寻找具有良好疗效的治疗和/或预防心血管疾病的药物提供物质基础和理论依据。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种风轮菜中黄酮类化合物的分离方法及黄酮组合物，为从风轮菜的天然产物中寻找具有良好疗效的治疗和/或预防心血管疾病的药物提供物质基础和理论依据。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种风轮菜中黄酮类化合物的分离方法，该分离方法包括以下步骤：从风轮菜的干燥地上部分提取总黄酮类物质；对总黄酮类物质采用硅胶柱色谱进行分离，在分离过程中，以体积比为100：5～100：25的氯仿和甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，依次得到第1流分至第320流分；对第1流分至第320流分中的第133-176流分进行硅胶柱色谱分离，以体积比依次为9:1、4:1、2:1、1:1和1:2的氯仿和丙酮为洗脱剂进行洗脱，并经薄层检测合并相同组分，得到A1至A13共13个流分；然后以体积比为60:40 的甲醇和水作为洗脱剂，依次对13个流分进行C18反相高效液相色谱分离，分别得到化合物2、3、4、5、8、9、10、14、16、20、26、32和35；对第1流分至第320流分中的第231-260流分进行MCI柱色谱分离，以体积比为60:40的甲醇和水为洗脱剂进行洗脱，并经薄层检测合并相同组分，得到B1至B7共7个流分；然后依次对7个流分进行C18反相高效液相色谱分离，以甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，分别得到化合物6、21、22、28、29、30和33；对第1流分至第320流分中的第295-310进行MCI柱色谱分离，以体积比为60:40的甲醇-水为洗脱剂进行洗脱，并经薄层检测合并相同组分，得到C1至C8共8个流分；依次对8个流分进行C18反相高效液相色谱分离，以甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，分别得到化合物11、12、15、17、23、24、27和34；对第1流分至第320流分中的第12-48流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，并以体积比为4：6氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后经薄层追踪检测合并相同组分，得到D1、D2和D3共3个流分；对D2流分进行C18反相高效液相色谱分离，以甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，得到化合物13和19；对D3流分进行反相高效液相色谱分离，以甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，得到化合物25；对第1流分至第320流分中的第49-55流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，以体积比为4：6氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后以甲醇和水作为洗脱剂进行C18反相高效液相色谱分离，得到化合物1和18。

进一步地，对总黄酮类物质采用硅胶柱色谱进行分离的过程中，利用体积比分别为100：5、100：10、100：15、100：20和100：25的氯仿和甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，依次得到第1流分至第320流分。

进一步地，分离法方法还包括：对第1流分至第320流分中的第49-55流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，以体积比为4：6氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后以甲醇和水作为洗脱剂进行C18反相高效液相色谱分离，得到化合物1和18。

进一步地，分离法方法进一步包括：对第1流分至第320流分中的第79-86流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，以体积比为4：6氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后以甲醇和水作为洗脱剂进行C18反相高效液相色谱分离，得到化合物7和31。

进一步地，从风轮菜的干燥地上部分提取总黄酮类物质的步骤包括：取风轮菜的干燥地上部分，用水提取得到水提液；将水提液进行压缩、干燥，得到水提物；将水提物进行大孔树脂层析，以乙醇和水为洗脱剂进行梯度洗脱，得到洗脱物；以及将洗脱物进行碱提酸沉法富集，然后精制得到总黄酮类物质。

进一步地，大孔树脂层析过程中采用D101大孔树脂层析柱进行层析；乙醇和水形成的洗脱剂中乙醇的体积浓度分别为20％、50％、70％和95％；优选得到的洗脱物为乙醇体积浓度分别为20％、50％和70％的洗脱物。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种黄酮组合物，该黄酮组合物包括黄酮类结构的化合物、二氢黄酮类结构的化合物、黄酮醇类结构的化合物以及异黄酮类结构的化合物；其中，黄酮类结构的化合物至少包括以下任意一种：洋芹素-7-O-芸香糖苷、木 犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷、木犀草素-7-O-芸香糖苷、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷、金合欢素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷和金合欢素-7-O-β-D-芸香糖苷，黄酮组合物是从风轮菜中分离得到，且黄酮类结构的化合物通过上述任一种分离方法分离得到。

进一步地，黄酮组合物中的二氢黄酮类结构的化合物至少包括以下任意一种：柚皮素-7-O-新橙皮糖苷、高圣草素、橙皮素-7-O-葡萄糖苷、圣草次苷、新北美圣草苷和5，7，3′，5′-四羟基二氢黄酮-7-O-新橙皮糖苷；二氢黄酮类结构的化合物通过上述任一种分离方法分离得到。

进一步地，黄酮组合物中的黄酮醇类结构的化合物至少包括以下任意一种：山奈酚-3-O-鼠李糖苷和山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷；黄酮醇类结构的化合物通过上述任一种分离方法分离得到。

进一步地，黄酮组合物包括以下35种化合物：洋芹素、洋芹素-7-O-葡萄糖苷、洋芹素-7-O-葡糖醛酸苷、洋芹素-7-O-葡糖醛酸甲酯苷、羊红膻酯、洋芹素-7-O-芸香糖苷、木犀草素、木犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷、木犀草素-7-O-芸香糖苷、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷、金合欢素、金合欢素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、金合欢素-7-O-β-D-芸香糖苷、日本椴苷、蒙花苷、柚皮素、异樱花素、江户樱花苷、柚皮素-7-O-芸香糖苷、柚皮素-7-O-新橙皮糖苷、香蜂草苷、枳属苷、高圣草素、橙皮素-7-O-葡萄糖苷、橙皮苷、圣草次苷、新北美圣草苷、5，7，3′，5′-四羟基二氢黄酮-7-O-新橙皮糖苷、槲皮素、山奈酚-3-O-鼠李糖苷、山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、芦丁和染料木苷；35种化合物通过上述任一种分离方法分离得到。

应用本发明的技术方案，通过综合应用各种先进的色谱技术，实现对风轮菜中黄酮类化合物的有效分离。通过利用硅胶色谱载样量大的特点，对风轮菜中的总黄酮类物质进行初步分离；利用凝胶色谱填料、MCI色谱填料和反相色谱填料无死吸附的特点，对总黄酮类物质进行进一步分离，利用高效液相色谱高分离度的特点，对性质相近的化合物进行分离，得到目前为止种类最齐全的黄酮类化合物成分。由于风轮菜中的总黄酮类物质对心肌细胞的损伤具有保护作用，本发明对风轮菜中黄酮组合物的成分进行了更全面的分离，得到了新的黄酮类成分，为黄酮组合物在治疗心血管疾病的药物中的应用奠定了物质基础，也为风轮菜黄酮组合物在制药中各有效活性成分含量标准的制定提供了理论依据。

附图说明

构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1示出了根据本发明一种优选的实施例中黄酮组合物中35种化合物的结构；以及

图2示出了本发明的黄酮组合物对缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤保护作用的检测结果图。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。

在本发明中，黄酮类化合物是指具有黄酮类结构、二氢黄酮类结构、黄酮醇类结构或者异黄酮类结构的化合物。

如背景技术部分所提到的，现有技术中并不清楚风轮菜中所含的黄酮类物质的具体成分，也不清楚其中真正起到活血化瘀作用的有效成分；因而在开发治疗和/或预防心血管疾病方面的药物时也无法确定各有效成分的含量。

针对上述问题，本发明在对现代分离技术和结构测定手段进行改进的基础上，对唇形科风轮菜属植物风轮菜活血化瘀活性部位——风轮菜总黄酮进行了化学成分的分离和研究，并从中分离得到35种黄酮类成分，如图1所示，这35种黄酮类成分分别为：洋芹素1，洋芹素-7-O-葡萄糖苷2，洋芹素-7-O-葡糖醛酸苷3，洋芹素-7-O-葡糖醛酸甲酯苷4，羊红膻酯5，洋芹素-7-O-芸香糖苷6，木犀草素7，木犀草苷8，木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷9，木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷10，木犀草素-7-O-芸香糖苷11，木犀草素-7-O-新橙皮糖苷12，金合欢素13，金合欢素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷14，金合欢素-7-O-β-D-芸香糖苷15，日本椴苷16，蒙花苷17，柚皮素18，异樱花素19，江户樱花苷20，柚皮素-7-O-芸香糖苷21，柚皮素-7-O-新橙皮糖苷22，香蜂草苷23，枳属苷24，高圣草素25，橙皮素-7-O-葡萄糖苷26，橙皮苷27，圣草次苷28，新北美圣草苷29，5，7，3′，5′-四羟基二氢黄酮-7-O-新橙皮糖苷30，槲皮素31，山奈酚-3-O-鼠李糖苷32，山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷33，芦丁34，染料木苷35。

基于上述研究结果，在本发明一种典型的实施方式中，提供了一种从风轮菜中黄酮类化合物的分离方法。上述分离方法包含以下步骤：

取风轮菜的干燥地上部分，净选、切段，用水进行提取。提取液经浓缩干燥后得的提取物，经D101大孔树脂层析，以乙醇体积浓度分别为20％、50％、70％以及95％的乙醇-水为洗脱剂，得到乙醇体积浓度分别为20％、50％和70％的洗脱物，各洗脱物经碱提酸沉法富集，精制后得到风轮菜总黄酮类物质；

风轮菜总黄酮类物质利用硅胶柱色谱进行粗分离，以体积比分别为100：5，100：10，100：15，100：20，100：25的氯仿-甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，依次得到第1流分至320个流分共320个流分；其中体积比为100：5的氯仿-甲醇洗脱剂洗脱得到第1-90流分；体积比为100：10的氯仿-甲醇洗脱剂洗脱得到第91-190流分；体积比为100：15的氯仿-甲醇洗脱剂洗脱得到第191-260流分；体积比为100：20的氯仿-甲醇洗脱剂洗脱得到第261-310流分；体积比为100：25的氯仿-甲醇洗脱剂洗脱得到第311-320流分；

对第12-48流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，以体积比为4:6的氯仿-甲醇为洗脱剂进行洗脱，薄层检测合并相同组分，得到D1、D2和D3共3个流分。对D2流 分进行C18反相高效液相色谱分离，以体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，得到化合物13和19；对D3流分进行反相高效液相色谱分离，以体积比为60:40甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，得到化合物25；

对第49-55流分进行Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱，以体积比为4：6氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后以体积比为60:40甲醇和水作为洗脱剂进行C18反相高效液相色谱分离，得到化合物1和18；

按照上述Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱和C-18反相高效液相色谱分离的条件，对第79-86流分进行分离，得到化合物7和31；

对第133-176流分进行硅胶柱色谱分离，以体积比分别为9:1、4:1、2:1、1:1和1:2的氯仿和丙酮为洗脱剂进行洗脱，然后经薄层检测合并相同组分，得到A1至A13共13个流分；然后以体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂，分别对所得13个流分进行C-18反相高效液相色谱分离，依次得到化合物2、3、4、5、8、9、10、14、16、20、26、32和35；

对第231-260流分进行MCI柱色谱分离，以体积比为60:40的甲醇-水系统洗脱，对洗脱产物进行薄层检测合并相同组分，得到B1至B7共7个流分；然后对所得7个流分，按照上述C-18反相高效液相色谱分离条件进行分离，得到化合物6、21、22、28、29、30和33；

对第295-310流分进行MCI柱色谱分离，以体积比为60:40的甲醇-水系统洗脱，并对洗脱产物进行薄层检测合并相同组分，得到C1至C8共8个流分；然后对所得8个流分，按照上述C-18反相高效液相色谱分离条件依次对上述8个流分进行分离，以甲醇和水作为洗脱剂进行洗脱，分别得到化合物11、12、15、17、23、24、27和34。

本发明的上述分离方法，可以对其中的一种或多种新的成分进行分离，也可以同时对上述35种化合物进行分离。因而，无论是分离得到一种新的化合物成分，还是同时得到上述所有新的化合物成分，相对现有技术，都提供了种类更多、成分更齐全的黄酮类化合物，为研究风轮菜黄酮类组合物在活性化瘀和治疗心血管疾病方面的具体有效药物成分奠定更全面的物质基础。

在本发明另一种典型的实施方式中，提供了黄酮组合物，该黄酮组合物为风轮菜的提取物，且包括黄酮类结构的化合物、二氢黄酮类结构的化合物、黄酮醇类结构的化合物以及异黄酮类结构的化合物；其中，黄酮类结构的化合物至少包括以下任意一种：洋芹素-7-O-芸香糖苷(6)、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷(9)、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷(10)、木犀草素-7-O-芸香糖苷(11)、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷(12)、金合欢素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷(14)和金合欢素-7-O-β-D-芸香糖苷(15)，上述黄酮类结构的化合物通过上述方法分离得到。包含了本申请的上述黄酮类结构的化合物的黄酮组合物，因具有相对较齐全的物质组成，为从风轮菜的天然产物中寻找具有良好疗效的治疗和/或预防心血管疾病的药物提供了相对更丰富的物质基础和更可靠的理论依据。

在另一种优选的实施例中，本发明的黄酮组合物在二氢黄酮类结构的化合物方面也有新的成分增加，至少包括以下任意一种：柚皮素-7-O-新橙皮糖苷(22)、高圣草素(25)、橙皮素-7-O-葡萄糖苷(26)、圣草次苷(28)、新北美圣草苷(29)和5，7，3′，5′-四羟基二氢黄酮-7-O-新橙皮糖苷(30)。包含了上述二氢黄酮类结构的化合物的黄酮组合物，相比现有技术的黄酮组合物，具有相对更全面的化合物组成，有更明确的候选药物，为真正有效天然药物成分的选择提供了物质基础。更优选地，本发明的黄酮组合物既包含本发明的上述黄酮类结构的化合物，同时还包含二氢黄酮类结构的化合物。在同时增加了上述两类成分的基础上所得到的黄酮类组合物成分更加齐全，更有利于后续的药物筛选和研究。同样的，上述二氢黄酮类结构的化合物也通过上述分离方法得到。

更优选地，本发明所提供的黄酮组合物中的黄酮醇类结构的化合物至少包括以下任意一种：山奈酚-3-O-鼠李糖苷(32)和山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷(33)。上述黄酮醇类结构的化合物通过上述分离法方法得到。因包含上述新的黄酮醇类结构的化合物，该黄酮组合物在黄酮醇类结构的化合物方面具有更明确的物质组成，在此基础上，所得到的黄酮组合物中的化合物的种类也更多，为从中筛选出治疗和/或预防心血管疾病的有效成分提供了更多样化的选择，为确定主要有效成分提供了更详实的物质依据。

在本发明的上述任一种黄酮组合物中，异黄酮类结构的化合物为染料木苷(35)。在本发明一种更优选的实施例中，提供了一种包含了上述35种化合物的黄酮组合物，且这35种化合物采用上述分离方法得到。该黄酮组合物是目前为止，所分离到的黄酮类化合物种类最多的组合物，为从众多的黄酮类化合物中明确对治疗和/或预防心血管疾病的有效药物提供了物质依据，为进一步确定药物质量标准提供依据。

下面将结合具体的实施例来详细说明本发明的有益效果。

需要说明的是，下来实施例中所用的凝胶柱层析是指用Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱进行层析，所说的反相高效液相色谱分离是指用C-18反相高效液相色谱柱(Agilent phenyl9.4×250mm；填充物粒径：5μm；V_MeOH:V_H2O＝40:60；检测波长：210nm；流速：2ml/min)进行分离。

实施例1：化合物制备。

取风轮菜的干燥地上部分，净选、切段，用水进行提取。提取液经浓缩干燥后得提取物，经大孔树脂层析，以乙醇体积浓度分别为20％、50％、70％以及95％的乙醇-水为洗脱剂，得到乙醇体积浓度分别为20％、50％和70％的洗脱物，再经碱提酸沉法富集，精制后即得到风轮菜总黄酮类物质。

对总黄酮类物质采用硅胶柱色谱进行分离，在分离过程中，分别用体积比为100：5、100：10、100：15、100：20和100：25的氯仿和甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，依次得到第1-90流分、第91-190流分、第191-260流分、第261-310流分和第311-320流分；

对第12-48流分进行羟丙基葡聚糖凝胶柱层析，在羟丙基葡聚糖凝胶柱层析的过程中，以体积比为4：6的氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，并经薄层追踪检测合并相同组分，分别得到3个流分；然后以体积比为60:40的甲醇和水为洗脱剂，对第2个流分进行C-18反相高效液相色谱分离，在第28.3min得到化合物13，在第26.9min得到化合物19；同样，以体积为60:40的甲醇：水为洗脱剂，对第3个流分进行C-18反相高效液相色谱分离，在第22.5min得到化合物25。

对第49-55流分进行羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱纯化，以体积比为4：6的氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后用体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂进行C-18反相高效液相制备色谱分离，在第24.2min得到化合物1，在第26.3min得到化合物18。

对第79-86流分进行羟丙基葡聚糖凝胶凝胶柱色谱纯化，以体积比为4：6的氯仿和甲醇为洗脱剂进行洗脱，然后用体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂进行C-18反相高效液相制备色谱分离，在第17.8min得到化合物7，在第20.3min得到化合物31。

对第133-176流分进行硅胶柱色谱分离，以体积比为9:1，4:1，2:1，1:1，1:2的氯仿-丙酮为洗脱剂进行洗脱，对各洗脱物经薄层检测合并相同组分，分别得到共得13个流分，然后用体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂，分别对13个流分进行C-18反相高效液相色谱分离，依次得到化合物2、3、4、5、8、9、10、14、16、20、26、32和35。

对第231-260流分经MCI柱色谱分离，以体积比分别为30:70和50:50的甲醇和水为洗脱剂进行洗脱，得到E1-E30共30个组分，经薄层检测合并相同组分，共得7个流分；然后用体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂，分别对7个流分进行C-18反相高效液相色谱分离，依次得到化合物6、21、22、28、29、30和33；以及

对第295-310经MCI柱色谱分离，以体积比分别为30:70和50:50的甲醇-水为洗脱剂进行洗脱，经薄层检测合并相同组分，共得8个流分，然后用体积比为60:40的甲醇和水作为洗脱剂，分别对8个流分经C-18反相高效液相色谱分离，依次得到化合物11、12、15、17、23、24、27和34。

实施例2：本发明的风轮菜黄酮组合物总黄酮对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用

大鼠心肌细胞H9C2以1×10⁵的密度接种于96孔板中培养36h后，风轮菜黄酮组合物(1.5625、3.125、6.25、12.5、25，50μg/ml)预处理4h，缺氧6h，复氧24h。去上清，5mg/ml>

从以上的描述中，可以看出，本发明上述的实施例实现了如下技术效果：本发明通过综合应用各种先进的色谱技术，利用硅胶色谱载样量大的特点，对风轮菜中的总黄酮类物质进 行初步分离；利用凝胶色谱填料、MCI色谱填料和反相色谱填料无死吸附的特点，对总黄酮类物质进行进一步分离，利用高效液相色谱高分离度的特点，对性质相近的化合物进行分离。由于黄酮组合物对心肌细胞的损伤具有保护作用，且本发明对风轮菜中黄酮组合物的成分进行了更全面的分离，得到了新的黄酮类成分，为黄酮组合物在治疗心血管疾病的药物中的应用奠定了物质基础，也为风轮菜黄酮组合物在制药中各有效活性成分含量标准的制定提供了理论依据。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。