利用TR-FRET高效筛选单克隆抗体阳性克隆的方法

摘要

本发明公开了一种在单克隆抗体制备过程中，利用TR?FRET，高效率筛选阳性克隆的方法，步骤：1)在96孔板中培养杂交瘤细胞单克隆或表达目的抗体的细胞单克隆。2)37℃培养细胞至孔面积80％时换液，再培养1天。3)在384孔板内加入带Tag的目的抗原，再加入上清、Anti?Human/mouse IgG?Acceptor、Non?human/Non?mouse Anti?Tag?Donnor，以同型IgG为标准品，空白样品为阴性对照，孵育2?4h，检测A665nm/A620nm荧光比值。样品的荧光比值是阴性对照的1.2倍以上，为阳性克隆。本发明操作简单、效率高，在科研单克隆抗体制备、抗体药物开发方面，可有效加快进程。