灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用

摘要

一种灵芝漆酶毕赤酵母基因工程菌株的构建与应用，通过从灵芝中克隆出漆酶基因GlLac，经EcoRI和XbaI双酶切后克隆入毕赤酵母表达质粒并构建出表达载体，最后将其电转化入毕赤酵母表达宿主菌中，经培养扩增和筛选后得到毕赤酵母工程菌。本发明构建了灵芝漆酶(Lac)的酵母分泌型共表达载体pPICZαA-GlLac，并转化毕赤酵母(Pichia？pastoris)X33，通过挑选高博莱霉素(Zeocin)抗性的重组子作为毕赤酵母工程菌。毕赤酵母的胞外表达载体pPICZαA是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体，能表达高拷贝的基因。