一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，为如下结构式(I)的配合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物及其制备方法，以及该含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

Schiff碱主要是指含有亚胺或甲亚胺特性基团（-RC=N-）的一类有机化合物，在合成上具有合成周期短，操作方法简便等特点、并且与金属离子具有很好的配位作用。Schiff碱金属配合物的研究始于20世纪五十年代，因其独特的结构而广泛应用于抑菌及抗肿瘤活性研究、抑制超氧自由基活性、化学分析以及与DNA的相互作用等多方面，尤其是其具有的较强的抑菌、抗癌生物活性，这使得人们越来越关注这类配合物的生物药用价值。例如，Hodnett课题组在1970年发现了含有Schiff碱的有机配合物具有一定的抗肿瘤活性，并且，当它与部分金属离子形成配合物后抗癌活性增强。

文献(化学试剂,2013,35(11):1023-1027)报道，一种氨基酸Schiff碱及其铜、镍配合物的合成及抑菌活性。

文献(化学试剂,2003,25(5):274-276)报道，Schiff碱金属配合物的抗癌活性研究进展。

文献(InorganicChemistryCommunications,2015,57:8-10)报道，过渡金属Cu（II）、Cd（II）、Zn（II）Shciff碱配合物对人肺腺癌细胞（A549）、人胃癌细胞（BGC-823和SGC-7901）都具有较好的抑制作用。

文献(JournalofMolecularStrcture,2013,1049:326-335)报道，Cu（II）Shciff碱配合物对人体乳腺癌细胞（MCF7）、人肝癌细胞（HepG2）、人结肠癌细胞（HCT-116）的抑制活性顺序是：MCF7＞HCT-116＞HepG2。

基于Schiff碱金属配合物是经实验证明具有抗癌活性的物质，本发明选择3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱和吡啶为配体，与乙酸镍在一定条件下反应，合成得到了对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）和人子宫颈癌细胞（Hela）具有一定抑制活性的配合物，为开发抗癌药物提供了新的途径。

发明内容

本发明的第一目的是提供了一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。

本发明的第二目的是提供上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物制备方法。

本发明的第三目的是提供上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

作为本发明的第一方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，为结构式(I)的配合物

(I)。

本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物经元素分析、红外光谱及X-射线单晶衍射结构分析，结果如下：

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物为晶体结构，其晶体为三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的结构特点是：分子中镍原子为六配位的畸变八面体构型。

作为本发明的第二方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备方法，是在反应容器中加入3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应5～11h，然后滴加吡啶，继续回流5～15h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。

在本发明的一个优选实施例中，所述3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与乙酸镍的物质的量比为1:1～1:1.2。

在本发明的一个优选实施例中，所述溶剂无水乙醇的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱加12～24毫升。

在本发明的一个优选实施例中，所述吡啶的用量为每毫摩尔3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱14～28毫升。

作为本发明的第三方面的一种含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物在制备抗癌药物中的应用。

申请人对上述含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物进行了体外抗肿瘤活性确定研究，确认了含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物具有一定的抗癌生物活性，也就是说上述配合物的用途是在制备抗癌药物中的应用，具体的说就是在制备抗人结肠癌、人肝癌、人乳腺癌、人子宫颈癌药物中的应用。

本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物对人结肠癌细胞、人肝癌细胞、人乳腺癌细胞和人子宫颈癌细胞显示出良好的抗癌活性，本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物抗癌活性高、成本低、制备方法简单等特点，为开发新的抗癌药物提供了新途径。

附图说明

图1为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的IR谱图。

图2为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的晶体结构图。

图3为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的TG-DTG曲线。

具体实施方式

通过以下实施例进一步详细说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。

实施例1：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在100mL三口烧瓶中加入0.314g(1.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及15mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入20mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应5h，然后滴加14mL吡啶，继续回流8h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：83.7%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

实施例2：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在100mL三口烧瓶中加入0.314g(1.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及12mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入22mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应8h，然后滴加18mL吡啶，继续回流5h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：85.1%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

实施例3：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在100mL三口烧瓶中加入0.314g(1.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及20mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入24mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应9h，然后滴加28mL吡啶，继续回流13h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：85.0%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

实施例4：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在500mL三口烧瓶中加入1.570g(5.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及90mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入110mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应7h，然后滴加90mL吡啶，继续回流9h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：80.6%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

实施例5：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在1000mL三口烧瓶中中加入3.140g(10.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及240mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入210mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应10h，然后滴加220mL吡啶，继续回流15h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：81.2%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

实施例6：

含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物的制备：

在1000mL三口烧瓶中中加入3.140g(10.0mmol)3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱及160mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入225mL50mmol/L的乙酸镍的乙醇溶液，在搅拌回流下反应11h，然后滴加240mL吡啶，继续回流11h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物。产率：79.5%。熔点：93～94℃(dec)。

元素分析(C₂₈H₂₁Cl₃N₄O₂Ni)：计算值：C55.08，H3.47，N9.18；实测值：C55.04，H3.52，N9.23。

FT-IR(KBr,cm^-1):3066,3053,1597,1571,1481,1469,1319,1209,1037。

晶体学数据：三斜晶系，空间群P-1，a=0.8972(4)nm，b=0.9010(4)nm，c=1.7574(8)nm，α=104.410(5)°，β=92.753(5)°，γ=100.603(6)°，Z=2，V=1.3459(10)nm³。

试验例：

本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物，其体外抗癌活性测定是通过MTT实验方法实现的。

MTT分析法：

以代谢还原3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide为基础。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪测定特征波长的光密度，可间接反映活细胞数量。

采用MTT法来测定实施例1制备的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）、人子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）的抑制活性。

细胞株及培养体系：Colo205、HepG2、MCF7、HEK93和NCI-H460细胞株取自美国组织培养库（ATCC）。用含10%胎牛血清的RPMI1640（GIBICO公司）培养基，在5%（体积分数）CO₂、37℃饱和湿度培养箱内进行体外培养。

测试过程：将测试药液（1ng/mL～100ug/mL）按照浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设6个平行孔。实验分为药物实验组（分别加入不同浓度的测试药）、对照组（只加培养液和细胞，不加测试药）和空白组（只加培养药，不加细胞和测试药）。将加药后的孔板置于37℃，5%CO₂培养箱中培养72h。对照药物的活性按照测试样品的方法测定。在培养了72h后的孔板中，每孔加MTT40uL（用D-Hanks缓冲液配成4mg/mL）。在37℃放置4h后，移去上层清液。每孔加150uLDMSO，振荡5min，使Formazan结晶溶解。最后，利用自动酶标仪在570nm波长处检测各孔的光密度。

数据处理：数据处理使用GraphPadPrismversion5.0程序，配合物IC₅₀通过程序中具有S形剂量响应的非线性回归模型进行拟合得到。

以MTT分析法对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、乳腺癌细胞（MCF7）、子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）细胞株进行分析，测定其IC₅₀值，结果如表1所示，结论为：由表中数据可知，以本发明的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物用作抗癌药物，对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）和人子宫颈癌细胞（Hela）具有一定的药效，可作为抗癌药物的候选化合物。

表1含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物抗癌药物体外活性测试数据

其余实施例制备的含有3,5-二氯水杨醛缩4-氯邻氨基酚Schiff碱与吡啶的镍配合物以MTT法对人结肠癌细胞（Colo205）、人肝癌细胞（HepG2）、人乳腺癌细胞（MCF7）、人子宫颈癌细胞（Hela）和人肺癌细胞（NCI-H460）的抗癌活性测试方法同试验例，测试结果与表1基本相同。