一种从温郁金挥发油中分离吉马酮的方法

摘要

本发明公开了一种从温郁金挥发油中分离吉马酮的方法：将甲基-β-环糊精水溶液与正己烷按体积比1：0.5～2充分混合后静置、分液，分别得到上相和下相，下相作为高速逆流色谱的固定相,上相为流动相；称取温郁金挥发油，用体积比1：1的上相和下相溶解后进样，高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，根据紫外检测器光谱图的峰形收集对应流出液，将含有吉马酮的流出液浓缩干燥，制得吉马酮纯品。本发明方法操作简便，溶剂消耗少，高效快捷，目的性强，分离效果好。

说明书

(一)技术领域

本发明属于中药制药领域，涉及一种从富含吉马酮的温郁金挥发油中分 离吉马酮的方法。

(二)技术背景

吉马酮是存在于温郁金挥发油中的一种单环倍半萜类化合物，用于平喘镇 咳、抑制肝癌BEL7402细胞增殖。吉马酮，英文名为germacrone，分子式 C₁₅H₂₂O，分子量218.33，分子结构如下：

温郁金具有行气化疲、清心解郁、利胆退黄的功效，主要用于治疗经闭、痛 经、腹胀痛、刺痛、热病，痛颠发狂、黄疽尿赤等症。目前，吉马酮的提取主 要通过硅胶柱层析洗脱。一般的逆流色谱分离方法，得到目标物吉马酮耗时长， 成本高。

(三)发明内容

本发明所要解决的技术问题就是提供一种快速分离吉马酮的方法，本发明 利用环糊精与吉马酮的包结作用，快速的将吉马酮从温郁金挥发油中分离出来， 具有更强的目的性，快捷高效。

本发明的技术方案是：

一种从温郁金挥发油中分离吉马酮的方法，所述方法为：将甲基-β-环糊精 水溶液与正己烷按体积比1：0.5～2充分混合后静置、分液，分别得到上相和下 相，下相作为高速逆流色谱的固定相,上相为流动相；称取温郁金挥发油，用体 积比1：1的上相和下相溶解后进样，高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，根 据紫外检测器光谱图的峰形收集对应流出液，将含有吉马酮的流出液浓缩干燥， 制得吉马酮纯品。

所述的甲基-β-环糊精水溶液的浓度为0.05-0.2mol/L，优选0.05～0.1mol/L。

所述甲基-β-环糊精水溶液与正己烷的体积比为1：0.5～2，优选1：1。

所述的高速逆流色谱的柱温为15℃～30℃，优选20℃。

所述方法优选按以下操作：将0.05～0.2mol/L的甲基-β-环糊精水溶液与正 己烷按体积比1：0.5～2充分混合后静置、分液，分别得到上相和下相，下相作 为高速逆流色谱的固定相,上相为流动相；先将固定相充满高速逆流色谱仪的多 层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，柱温15℃～30℃(优选20℃)，在500～ 1000r/min转速(优选800r/min转速)下逆时针旋转，以0.5～5ml/min(优选2 ml/min)的流速注入流动相，以波长200-300nm(优选210～254nm)的紫外检测 器检测，当柱尾端明显有流动相流出时，称取温郁金挥发油，用体积比1：1的 上相和下相溶解后进样，根据紫外检测器光谱图的峰形收集对应流出液，将含 有吉马酮的流出液浓缩干燥，制得吉马酮纯品。

更进一步，所述方法更优选按以下操作：将0.05～0.1mol/L的甲基-β-环糊 精水溶液与正己烷按体积比1：1充分混合后静置、分液，分别得到上相和下相， 下相作为高速逆流色谱的固定相,上相为流动相；先将固定相充满高速逆流色谱 仪的多层线圈分离柱，设定高速逆流色谱仪，柱温20℃，在800～1000r/min转 速下逆时针旋转，以2ml/min的流速注入流动相，以波长210～254nm的紫外检 测器检测，当柱尾端明显有流动相流出时，称取温郁金挥发油，用体积比1：1 的上相和下相溶解后进样，根据紫外检测器光谱图的峰形收集对应流出液，将 含有吉马酮的流出液浓缩干燥，制得吉马酮纯品。

一般将100-1000mg的温郁金挥发油用15～20mL的体积比1：1的上相和下 相混合溶剂溶解，然后进样。

与现有技术比较，本发明具有的优势在于：本发明操作简便，高效快捷， 溶剂消耗少；甲基-β-环糊精对吉马酮具有专属包结作用，目的性强，分离效果 优秀。

(四)附图说明

图1实施例1的高速逆流色谱(HSCCC)图。

图2实施例2的高速逆流色谱(HSCCC)图。

图3实施例3的高速逆流色谱(HSCCC)图。

图4吉马酮的核磁氢谱图。

图1～图3中，2号峰代表吉马酮。

(五)具体实施方式

下面以具体实施例来对本发明的技术方案作进一步说明，但本发明的保护范 围不限于此。下述实施例中，采用的高速逆流色谱型号为：HSCCC-TBE200V

实施例1：

配制0.1mol/L甲基-β-环糊精水溶液与正己烷按体积比1：1在分液漏斗中混 合，充分振荡，静止，临用前分层，下相选为固定相,上相选为流动相；柱温设 定为20℃，先用恒流泵将溶剂体系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管， 直至注满整个管子，然后开启HSCCC，逆时针旋转，转速为803.6prm，同时将 流动相以2.0ml/min流速从柱的首端泵入HSCCC分离柱；等到柱尾端流出流动 相时，表明HSCCC中两相已达到平衡，通过六通阀将样品注入HSCCC(536.4mg 温郁金挥发油样品溶解于18ml等体积混合的上下相溶剂中)；以波长254nm的 紫外检测器检测流出液，根据紫外检测器光谱图，见图1，图1中2号峰代表吉 马酮，自动收集洗脱液，将对应峰的洗脱液的溶剂挥干，得吉马酮晶体11mg。 吉马酮的核磁氢谱图见图4。

实施例2：

配制0.1mol/L甲基-β-环糊精水溶液与正己烷按体积比1：1在分液漏斗中混 合，充分振荡，静止，临用前分层，下相选为固定相,上相选为流动相；柱温设 定为20℃，先用恒流泵将溶剂体系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管， 直至注满整个管子，然后开启HSCCC，逆时针旋转，转速为803.6prm，同时将 流动相以2.0ml/min流速从柱的首端泵入HSCCC分离柱；等到柱尾端流出流动 相时，表明HSCCC中两相已达到平衡，通过六通阀将样品注入HSCCC(905.5mg 温郁金挥发油样品溶解于18ml等体积混合的上下相溶剂中)；以波长254nm的 紫外检测器检测流出液，根据紫外检测器光谱图，见图2，图2中2号峰代表吉 马酮，自动收集洗脱液，将对应峰的洗脱液的溶剂挥干，得吉马酮晶体21mg。

实施例3：

配制0.05mol/L甲基-β-环糊精水溶液与正己烷按体积比1：1在分液漏斗中 混合，充分振荡，静止，临用前分层，下相选为固定相,上相选为流动相；柱温 设定为20℃，先用恒流泵将溶剂体系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管， 直至注满整个管子，然后开启HSCCC，逆时针旋转，转速为802.5prm，同时将 流动相以2.0ml/min流速从柱的首端泵入HSCCC分离柱；等到柱尾端流出流动 相时，表明HSCCC中两相已达到平衡，通过六通阀将样品注入HSCCC(429.8mg 温郁金挥发油样品溶解于18ml等体积混合的上下相溶剂中)；图3中2号峰代表 吉马酮，自动收集洗脱液，将对应峰的洗脱液的溶剂挥干，得吉马酮晶体9mg。