一种干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法

摘要

本发明涉及一种干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法，取质量为m的干性食品模拟物制取含有萘-d8的测试液以及制取标准工作溶液并进行气相色谱-串联三重四级杆质谱检测，根据校正因子公式f＝(AIS×mi)/(Ai×mI)以及公式X＝(A×mS×f)/(AS×m)求得干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的含量，最终结果可通过平行试验减小误差，本发明首次建立了干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量的检测方法，所述测量方法为样品提取液经浓缩过滤膜后直接进样，不需要进行复杂的衍生化等前处理步骤。

说明书

技术领域

本发明涉及一种干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法。

背景技术

2009年，欧盟食品和饲料类快速预警系统(RASFF)通告了燕麦片受到食品包装印刷油墨中4-甲基二苯甲酮(4-MBP)和二苯甲酮(BP)污染的事件，这表明干性食品也可能遭受包装等接触材料的污染。据此，欧盟食物链和动物健康常务委员会制定了多种二苯甲酮类光引发剂的印刷油墨食品包装的最大迁移限量，规定了食品包装印刷油墨材料内的2-羟基-4-甲基二苯甲酮的迁移限量为6.0mg/kg，我国GB9685同样规定，塑料食品接触材料中2-羟基-4-甲基二苯甲酮的迁移限量为6.0mg/kg。2011年，欧盟委员会出台的塑料法规(EU)No.10/2011中则明确规定了用于淀粉、谷物、干面、固态糖类、坚果、奶粉、面包等干性食品的食品模拟物为改性聚(2,6-二苯基-对苯醚)作为干性食品模拟物。目前国内外对于干性食品模拟物中2-羟基-4-甲基二苯甲酮迁移量的检测尚未见报道。因此建立干性食品模拟物中2-羟基-4-甲基二苯甲酮迁移量的定量检测方法，能够有效地对食品接触材料的卫生性能进行检验监管，从而保护人们的健康安全。

在分析检测过程中，定量分析结果的准确性与样品前处理步骤和色谱质谱条件的选择息息相关，不仅仅是经过有限的实验就能确定最优的色谱测量条件的，如果对分析检测条件的设定有所偏离，则可能对定量检测结果造成很大的误差，甚至会得到假阳性或者截然相反的检测结果。

发明内容

本发明的目的是提供一种检查精度高、误差小的干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法。

实现本发明目的的技术方案如下：

一种干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法，包括以下步骤，

步骤一，取质量为m的干性食品模拟物，加入含有已知质量m_S的萘-d₈的溶剂提取过滤后再浓缩定容得到测试液；

步骤二，对测试液进行气相色谱-串联三重四级杆质谱检测，取所得的仪器对萘-d₈响应信号为内标峰面积A_S，取所得的仪器对2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮响应信号为测试样品峰面积A；

步骤三，制取标准工作溶液，制备一组与含有质量m_I的萘-d₈内标物的2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准工作溶液，然后对标准工作溶液进行气相色谱-串联三重四级杆质谱检测，根据检测所得到的萘-d₈的定量离值峰面积A_IS以及所对应的质量m_I，结合检测所得到的2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮定量离子峰面积A_i以及所对应的质量m_i，然后根据公式计算校正因子f；f＝(A_IS×m_i)/(A_i×m_I)

步骤四，将步骤二以所得到的检测结果A_S和A,以及步骤一中的样品质量m和所加内标质量m_S，结合步骤三中所得到的校正因子f然后根据公式X＝(A×m_S×f)/(A_S×m)计算得出干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的含量X₁，其中：

X表示干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的含量，单位为mg/kg。

步骤五，重复步骤一到步骤四进行平行试验，得到平行测试结果X₂，以两次测试结果的算术平均值，即X＝(X₁+X₂)/2作为测试结果。

本发明在离子源下对内标物萘-d₈以及2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮进行裂解，得到两者的一级裂解峰，接着对一级碎片进行二级裂解，并对二级质谱碎片进行分析，本发明首次建立了干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量的检测方法，所述测量方法为样品提取液经浓缩过滤膜后直接进样，不需要进行复杂的衍生化等前处理步骤。

优选的，为了使干性食品模拟物溶解均匀，方便提取其中的2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮，步骤一中溶液干性食品模拟物时，采用含有萘-d₈的甲醇溶液进行溶解，溶解过程中开启超声仪器5-60min，温度控制在0-100℃，初步溶解过滤后对滤渣用甲醇溶液再进行一次溶解过滤操作，两次过滤得到的溶液合并后再浓缩定容1-10mL，并过有机滤膜，所述有机滤膜孔径为0.1μm-0.45μm。

优选的，为了减少检测结果的误差，步骤五中平行试验的允许误差为20％。

优选的，为了确保标准工作溶液的精确度，步骤三中的标准工作溶液由含量大于99.0％的2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准品和含量大于99.0％萘-d₈标准品以及色谱纯甲醇溶解定容制成。

优选的，为了提高气相色谱检测的精度，步骤二和步骤三中，色谱柱涂层为聚乙二醇、聚苯乙烯或聚甲基硅氧烷材料，色谱柱长度为30-60m，色谱柱内径为0.18mm-0.25mm，涂膜厚度为0.20-0.30μm，进样量为0.5-2.0μL，气相色谱的初始温度80-110℃，保持0-4min，以15-25℃/min的速度升温至220-280℃，保持3-8min，载气流速为0.8-1.2mL/min。

优选的，为了提高串联三重四级杆质谱检测的的准确性，步骤二和步骤三中串联三重四级杆质谱检测中采用的离子源为电子轰击离子源或化学电离源，所述离子源温度为230-260℃，电子能量为65-75eV。

优选的，为了提高串联三重四级杆质谱检测的的准确性与安全性，步骤二和步骤三中串联三重四级杆质谱检测中采用的载气为纯度为99％～99.9999％的氦气，载气控制模式为恒压模式、恒流模式或恒线速度模式，碰撞气为纯度99％～99.999％的氮气。

优选的，为了保护灯丝，步骤二和步骤三中串联三重四级杆质谱检测中溶剂延迟3-6min。

优选的，为了提高串联三重四级杆质谱检测的的准确性，步骤二和步骤三中串联三重四级杆质谱检测中检测方式为全扫描、选择离子扫描或多离子反应检测，步骤二和步骤三中串联三重四级杆质谱检测中分辨率采用unit、wide或者widest分辨率。

优选的，经过相应的参数优化，选择226.9---->184和226.9---->128两对离子作为内标物萘-d₈的监测离子；选择226.9---->184和226.9---->128两对离子作为2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮监测离子。

依据本发明中优化后的溶液处理条件以及最佳色谱质谱参数的设定，可以准确测量出干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量，抗干扰性强，定量结果准确度高，重现性良好，检测限可达0.05mg/kg，能够满足欧盟以及中国GB9685中5.0mg/kg的限量要求。

具体实施方式

一种干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的测定方法，包括以下步骤，

步骤一，取1g干性食品模拟物于锥形瓶中，加入50mL含有0.5μg萘-d₈的甲醇溶液，溶解过程中在50℃下超声溶解30min，溶液充分快速溶解后过滤，用甲醇溶液洗涤滤渣，合并滤液，并浓缩定容至5.0mL,过0.2um有机滤膜得到测试液；

步骤二，对测试液进行气相色谱-串联三重四级杆质谱检测，取所得的仪器对萘-d₈响应信号为内标峰面积A_S，取所得的仪器对2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮响应信号为测试样品峰面积A；

步骤三，制取标准工作溶液，制备一组与含有0.5μg的萘-d₈内标物和0.5μg2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮标准工作溶液，然后对标准工作溶液进行气相色谱-串联三重四级杆质谱检测，根据检测所得到的萘-d₈的定量离值峰面积A_IS以及所对应的质量m_I0.5μg，结合检测所得到的2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮定量离子峰面积A_i以及所对应的质量m_i0.5μg，然后根据公式计算校正因子f；f＝(A_IS×0.5)/(A_i×0.5)

其中，气相色谱检测中，色谱柱涂层为聚乙二醇、聚苯乙烯或聚甲基硅氧烷材料，色谱柱长度为30-60m，色谱柱内径为0.18mm-0.25mm，涂膜厚度为0.20-0.30μm，进样量为0.5-2.0μL，气相色谱的初始温度80-110℃，保持0-4min，以15-25℃/min的速度升温至220-280℃，保持3-8min，载气流速为0.8-1.2mL/min；

串联三重四级杆质谱检测中采用的离子源为电子轰击离子源或化学电离源，所述离子源温度为230-260℃，电子能量为65-75eV，载气为纯度为99％～99.9999％的氦气，载气控制模式为恒压模式、恒流模式或恒线速度模式，碰撞气为纯度99％～99.999％的氮气，检测方式为全扫描、选择离子扫描或多离子反应检测，溶剂延迟3-6min，分辨率采用unit、wide或者widest分辨率；

选择226.9---->184和226.9---->128两对离子做为内标物萘-d₈的监测离子；选择226.9---->184和226.9---->128两对离子做为2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的监测离子；

步骤四，将步骤二中所得到的检测结果A_S和A以及步骤一中的样品质量m和所加内标物质量m_S0.5μg，结合步骤三中所得到的校正因子f然后根据公式X＝(A×m_S×f)/(A_S×m)计算得出干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的含量X₁，其中：

m_S为测试液中萘-d₈的质量，0.5μg，

m为干性食品模拟物的质量，1g，

X表示干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的含量，单位为mg/kg。

步骤五，重复步骤一到步骤四进行平行试验，得到平行测试结果X₂，以两次测试结果的算术平均值，即X＝(X₁+X₂)/2作为测试结果。

本发明实施过程中，碰撞能量见如下表1：

表1萘-d₈和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的碰撞能量

本发明首次建立了干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量的检测方法，所述测量方法为样品提取液经浓缩过滤膜后直接进样，不需要进行复杂的衍生化等前处理步骤，可以准确测量出干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量，抗干扰性强，定量结果准确度高，重现性良好。

以下为本发明的具体实施例中的优选参数：

气相色谱条件：

1)色谱柱：涂层为聚甲基硅氧烷材料，色谱柱长度为30m；色谱柱内径为0.25mm；涂膜厚度为：0.25μm；

2)进样量：1.0μL；

3)程序升温条件：初始温度100℃，保持3min，以15℃/min的速度升温至280℃，保持5min；

4)载气流速：1.0mL/min。

串联三重四极杆质谱条件：

1)离子源:电子轰击(EI)；

2)离子源温度：250℃；

3)电子能量：70eV；

4)载气控制模式：恒流模式；

5)检测方式：全扫描(SCAN)、选择离子扫描(SIM)或多离子反应检测(MRM)；

6)溶剂延迟：4min；

7)载气：纯度为99.9992％的氦气；

8)辅助加热温度：300℃；

9)碰撞气：纯度99.999％的氮气；

10)分辨率：unit分辨率；

11)碰撞能量见如下表2：

表2萘-d₈和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的碰撞能量

采用添加法来检测本方法的精密度和回收率：

在不含2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的干性食品模拟物中分别添加2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮为0.05mg/kg、0.50mg/kg、5.00mg/kg三个水平后按本发明的步骤进行样品前处理并测定，对每个水平重复添加并测定6次，并进行回收率和精密度计算，回收率和精密度试验结果详见表3。

表32-羟基-4-甲氧基二苯甲酮在干性食品模拟物中添加回收率和精密度

由表3可以看出，本方法的回收率和精密度良好。方法对各类模拟物测定的回收率高达89％～98％；精密度小于8％，定量结果准确可靠，精密度高。

从上述实施例与精度测试可以看出，本发明首次建立了干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量的检测方法，所述测量方法为样品提取液经浓缩过滤膜后直接进样，不需要进行复杂的衍生化等前处理步骤。此外，依据本发明中优化后前处理条件，以及最佳色谱质谱参数的设定，可以准确测量出干性食品模拟物中2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮迁移量，抗干扰性强，定量结果准确度高，重现性良好，检测限可达0.05mg/kg，能够满足欧盟以及中国GB9685中5.0mg/kg的限量要求。

以上所述仅为发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。