蚬壳烧制品的制造方法以及以其为有效成分的用于改善肝功能损伤的组合物

摘要

课题：本发明提供以蚬壳为原料同时生成被确认具有肝功能损伤改善效果的由烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白构成的粉体组合物的方法。解决方法：以加热温度200℃至300℃、加热时间20分钟至60分钟烧制蚬壳，然后将经烧制的蚬壳粉碎，得到由霰石和贝壳硬蛋白构成的混合粉末体。

说明书

技术领域

本发明涉及蚬壳烧制品的制造方法，以及以其为有效成分的用于 改善肝功能损伤的组合物。

背景技术

蚬自古以来作为具有滋养强壮的功效以及对化痰祛湿、反胃吐食、 胃痛吞酸、痰贝喘咳嗽、湿疮、溃疡等具有药效的物质，而在家庭料 理或民间疗法中广泛被使用。

着眼于其药效，进行关于蚬来源的提取物或生成物的制造方法， 以及以其为有效成分的组合物的具体技术开发(参考专利文献1的 0002段至0005段)，将蚬壳烧制为纯粹的方解石(calcite)，将其作为 用于改善肝功能损伤的组合物已公知(例如参考专利文献1)。

此外，作为进一步研究的成果，注意到以作为贝壳的主要组分的 统称为贝壳硬蛋白(conchiolin)的蛋白质为主的间基质的药效性，确 认了用酸溶解碳酸钙后得到的贝壳硬蛋白水解产物的肝损伤减轻效果 (例如参考专利文献2)和脂肪分解促进效果(例如参考专利文献3)。

另一方面，尽管技术领域不同，但为了将贝壳粉末作为工业用材 料使用，为了除去贝壳硬蛋白分解产生的臭气，在贝壳硬蛋白热分解 温度(550℃)以上的温度烧制贝壳粉末的技术也是公知的(例如参考 专利文献4的0011段)。

另外，为了消除贝壳硬蛋白，将其间隙利用为用于吸附有效物质 的空间，在非氧化气氛下于300℃～500℃烧制(干馏)2～8小时的技术 也是公知的(例如参考专利文献5的0019段、0025段至0028段)。

上述公知技术中，为了使得目标物质生成为极其纯的物质，有人 以蚬壳来源的方解石为目的(专利文献1)，有人以贝壳硬蛋白为目的 (专利文献2和专利文献3)，将这些物质的生成方法作为权利要求的 范围。

此外，为了得到如上所述的目标物质(例如烧制碳酸钙)，研究了 积极消除或除去被确认为相同效果的物质(例如贝壳硬蛋白)(参考专 利文献2、专利文献3和专利文献5)，迄今为止还没有同时制造这两 种物质并利用的技术思想。

特别地，上述专利文献1的技术中，观其权利要求的范围，其仅 为方解石的制造方法，根据上述专利文献4和专利文献5的技术知识 可知贝壳硬蛋白基本上完全热分解、消除。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：特开2001-204433号公报(专利第3475411号)

专利文献2：特开2003-24008号公报

专利文献3：特开2006-213606号公报

专利文献4：特开2011-74315

专利文献5：特开2010-41990号公报(专利第4245655号)

专利文献6：特开2001-19642号公报

发明内容

发明要解决的问题

本领域公知，为了较纯粹地生成来自蚬壳的目标物质，需要较多 的热能，并且产生废液，蚬壳的利用率也仅限于部分利用。

另一方面，尽管被消除或除去的物质(贝壳硬蛋白)也是本发明 人的作为目的的用于改善肝功能损伤的组合物有用的物质，但同时生 成能够利用的状态(微粉体混合物)的技术思想以及用于生成的烧制 技术均未被现有技术公开。

本发明人综合上述公知技术所公开的技术知识，进行专心研究， 以蚬壳为原料生成了被确认具有改善肝功能损伤效果的由烧制碳酸钙 和贝壳硬蛋白构成的粉体组合物，并发现在能够使这两种物质的效果 协同的同时，能够进一步有效利用可能成为废弃物的蚬壳，控制能量 消耗和制造成本，减少伴随产生的废弃物。

并且，当人经口摄取时，为了使碳酸钙通过胃酸(盐酸)被溶解 吸收，希望制得使每单位重量的表面积增加的微粉体，另一方面还发 现，如果能制成微粉体，即使不转化为强碱性的石灰(ライム)，不仅 是方解石，霰石(aragonite)也具有一定的改善肝损伤的效果。

另外，还发现：通过一定条件下的烧制，通过贝壳硬蛋白的部分 热分解使得贝壳硬蛋白和霰石的结合破坏，从而容易破坏贝壳坚固的 壳体构造，并且将烧制贝壳机械地微粉体化，由此能够同时生成作为 蚬壳来源的有效成分的烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白。

解决问题的方法

本发明人针对上述问题，根据公知技术中没有的技术思想，开发 了以蚬壳为原料同时生成被确认具有改善肝功能损伤效果的由烧制碳 酸钙和贝壳硬蛋白构成的粉体组合物的方法，成功将本发明具体化。

本申请权利要求1的发明为，一种蚬壳烧制品的制造方法，其特 征在于，以加热温度200℃至300℃、加热时间20分钟至60分钟烧制 蚬壳，然后将经烧制的蚬壳粉碎，制成由烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白构 成的粉末体。

本申请权利要求2的发明为，一种蚬壳烧制品的制造方法，其特 征在于，权利要求1的碳酸钙为霰石。

本申请权利要求3的发明为，一种用于改善肝功能损伤的组合物， 其以根据权利要求1或权利要求2制造的蚬壳烧制粉末体为有效成分。

另外，尽管以120℃至450℃的热风干燥珍珠，然后将经干燥的珍 珠粉碎，制得0.10μm至50μm的粉体，将其作为主要成分的滋养强壮 剂的制法和其利用方法的相关技术(参考专利文献6)是公知的，但是 同一技术的对象不是贝壳而是珍珠，与上述温度条件的目的和其效果 相关的技术公开不足，并且针对贝壳硬蛋白的技术思想完全没有公开， 因此，这与本发明人所达到的从蚬壳得到用于改善肝功能损伤的组合 物的本发明，以及其技术思想是有本质上的区别的。

发明效果

根据本发明的方法，在蚬壳中，通过贝壳硬蛋白的部分热分解使 得贝壳硬蛋白与霰石的结合破坏，容易破坏贝壳的坚固的壳体结构， 并且通过机械地微粉体化该烧制贝壳，能够得到由碳酸钙和贝壳硬蛋 白构成的混合粉末体。

并且，根据本发明的方法，通过以蚬壳为原料生成被确认具有改 善肝功能损伤效果的由碳酸钙和贝壳硬蛋白构成的粉体组合物，能够 提供全部有效利用蚬壳的、协同利用该两种物质的效果的用于改善肝 功能损伤的组合物。

具体实施方式

基于实施例说明本发明的实施方案。

作为本发明的烧制品的原料(起始原料)的蚬壳为，准备生的蚬， 并且采用通过公知的适当方法剥除贝肉制得仅为贝壳的物质。但是， 如果是通过适当的洗涤和干燥加热方法被杀菌的物质的话，也可以有 效利用以前成为废弃物的贝壳。

蚬壳在烧制处理之前进行充分洗涤，然后，利用公知的适当的干 燥方法使其干燥之后，使用使得加热温度为200℃至300℃的合适的公 知加热机，以部分破坏霰石与贝壳硬蛋白的结合的方式，尽可能均匀 地加热作为对象的蚬壳的全部20分钟至60分钟左右(根据贝壳的大 小、厚度，或者加热处理的环境、季节等一些条件考虑)。

另外，本发明的烧制温度的下限200℃是确保考虑到完全杀灭贝类 上附着的肠出血性大肠杆菌、灭活所生成的维罗毒素所必要且充分的 温度。

本申请的加热温度优选为贝壳本体的温度，但是由于多数的实用 加热炉中为检测炉内的气氛温度进行加热控制，因此此处的加热时间 指投入蚬壳的炉内温度达到加热温度后的时间，因此，大体上贝壳本 体的温度在200℃至300℃的范围，将该状态保持20分钟至60分钟。

如上所述谨慎地实施了被控制温度的加热处理而完成烧制的蚬壳 在既定场所自然冷却，或者使其不骤冷而利用适当公知的冷却装置冷 却至常温，然后，通过公知的粉碎方法将其全部粉碎为大体上100μm 左右，得到烧制贝壳粉体。

对于粉体化处理，根据目的使用喷射式粉碎机等进行微粉碎，能 够得到粒径在0.1μm至20μm范围内的粒度分布的微粉末体，但是粉 碎机上附着或残存的粉碎物增加的同时，也产生加工成以微粉末体为 原料的健康辅助食品等的情况下的处理困难等的问题。因此，实际使 用上优选约100μm以上的粉体。

实施例

利用电热式烧制炉，以200℃、40分钟烧制Yamato(ヤマト)蚬 的洗涤完成的贝壳，通过自然放热冷却至常温，然后利用微粉碎机进 行粉碎，得到烧制粉末体(A)。这时，以使得粒径d₉₀(累计值90％ 的粒度)＝10μm的方式进行粉体化或分级处理。

然后，利用电热式烧制炉，以360℃、120分钟烧制上述相同的原 料，通过自然放热冷却至常温，然后，利用喷射式微粉碎机进行粉碎， 得到烧制粉末体(B)。这时，以使得粒径d₉₀(累计值90％的粒度)＝10μm 的方式进行粉体化或分级处理。

利用喷射式微粉碎机粉碎未烧制的Yamato蚬，以使得与上述烧制 粉末体(A)、(B)相同程度的粒径d₉₀(累计值90％的粒度)＝10μm 的方式进行粉体化或分级处理，得到未烧制粉末体(C)。

进一步地，作为参考例，利用电热式烧制炉，以500℃、120分钟 进行烧制，通过自然放热冷却至常温，然后利用喷射式微粉碎机进行 粉碎，得到烧制粉末体(参考)。这时，以使得粒径d₉₀(累计值90％ 的粒度)＝10μm的方式进行粉体化或分级处理。

对于上述烧制粉末体(A)、(B)以及未烧制粉末体(C)、烧制粉 末体(参考)，进行X射线衍射(粉末X射线衍射法定性分析)时， 碳酸钙的状态为：其中粉末体(C)和粉末体(A)为100％霰石，粉 末体(B)为霰石＜方解石，而粉末体(参考)为100％方解石。

然后，测定上述粉末体的真比重(单位：g/cm³)时，粉末体(C) 为2.83，粉末体(A)为2.82(参考：霰石的理论值为2.9)。另一方面， 粉末体(B)为2.66，粉末体(参考)为2.56(参考：方解石理论值 2.7)。

并且，将上述各粉末体0.5g投入0.1摩尔/升的醋酸40ml中，进行 搅拌30分钟，然后测定溶解残渣的比例。残渣中含有未溶解的碳酸钙 和贝壳硬蛋白，残渣比例为粉末体(C)30.1重量％，粉末体(B)5.7 重量％，粉末体(A)14.9重量％。

如上所述，确认如下：与未烧制的粉末体(C)相比，本发明生成 的粉末体(A)、(B)的碳酸钙的溶解性非常好，蚬壳的碳酸钙(霰石) 的贝壳壳体结构或结晶结构部分破坏，因此溶解性提高。另一方面， 与粉末体(A)相比在更高温下烧制的粉末体(B)，由于进行较高温 且长时间的烧制，因此贝壳硬蛋白由于热而部分消除。

接下来，分析粉末体(A)和粉末体(参考)的贝壳硬蛋白的状态。 由于贝壳硬蛋白为不溶性蛋白质，因此利用氨基酸自动分析法通过水 解分析构成氨基酸组成。其结果为，从利用烧制炉以500℃、120分钟 烧制成的粉末体(参考)中完全没有检出氨基酸，另一方面，从粉末 体(A)检出构成贝壳硬蛋白的氨基酸合计为0.85g/100g，其重量构成 为天冬氨酸16.5％、甘氨酸36.5％、酪氨酸8.2％、苯丙氨酸5.9％、谷 氨酸4.7％、脯氨酸4.7％等。

从上述分析确认，如果也包含根据公知的专利文献(专利文献4、 专利文献5)确认的知识，那么大体上通过将蚬壳来源的霰石充分变性 为方解石的烧制(大体上在360℃以上的加热温度下烧制)，贝壳硬蛋 白热分解或消除，该粉末体成为如粉末体(参考)那样的单纯碳酸钙 粉体，另一方面，根据本发明方法的蚬壳烧制粉末体(粉末体(A)) 中，为贝壳硬蛋白残存的粉体。

此外，与未烧制的蚬壳(粉末体(C))相比，根据本发明方法的 蚬壳烧制粉末体(粉末体(A))具有优异的溶解性，由此确认根据本 发明方法的蚬壳烧制粉末体(粉末体(A))与未烧制的蚬壳(粉末体 (C))均为100％霰石或主要由霰石构成，然而其为具有不同物理性质 的物质。

另一方面，根据专利文献1，公知的蚬壳来源的粉末体中没有残存 贝壳硬蛋白(以及构成其的氨基酸)，并且确认生成了具有与未烧制的 蚬壳粉末体不同物理性质的新的蚬壳来源的粉末体。由于氨基酸促进 肝脏中醇的分解是公知的，因此，本发明的方法没有经历公知技术的 水解等的碳酸钙除去步骤，并且根据专利文献1中没有残存贝壳硬蛋 白的技术思想，可以将以往成为废弃物的蚬壳制成含有氨基酸的有效 碳酸钙材料。

另外，贝壳来源的贝壳硬蛋白(以及其构成氨基酸)的研究中， 贝壳种类所产生的构成氨基酸的不同或其碳酸钙壳体构成的不同一直 以来是前提事项，贝壳种类中本发明特定为蚬壳固有的碳酸钙、贝壳 硬蛋白的混合粉末体的制造方法，特别是具有通过经口摄取改善肝功 能损伤效果的粉末体的简便的制造方法。

(非专利文献)

非专利文献1：“有关贝壳中含有的不溶性蛋白质的氨基酸组成”， 北海道大学水产学部研究汇报，19(1)：p52-61(「貝殻中に含まれる 不溶性蛋白質のアミノ酸組成について」，北海道大學水産學部研究 彙報，19(1)：p52－61)

此外，关于蚬壳来源的碳酸钙的改善肝功能损伤效果，尽管专利 文献1中已经确认，但是同一专利文献中为100％方解石的粉末体。本 发明为在不使贝壳硬蛋白消除的温度条件内进行使其成为不是100％ 的霰石而是霰石＞方解石的烧制，如果确认根据本发明的粉末体能够 适合作用于肝功能，则能够提供以专利文献1为首的公知技术中不存 在的新的蚬壳烧制碳酸钙材料。因此，使用上述粉末体(A)和粉末体 (C)，施用给实验小鼠(C57BL/6小鼠)，分析对于病发酒精性肝损伤 的肝功能的作用。

对于实验小鼠，经口施用乙醇以使其病发急性酒精性肝损伤，此 时施用粉末体(A)和粉末体(C)，测定评价其血脂。分为CTRL组 (仅施用水的对照组)、AFL组(仅施用乙醇的组)、T-A组(施用乙 醇+粉末体A的组)、T-C组(施用乙醇+粉末体C的组)的4组(每组 11只)，连续施用18天，并且在实验前和实验最后一天分析血清分离 的中性脂肪值(甘油三酯：TG)与总胆固醇值(TC)。

对于乙醇，于早晨腹腔内注射施用10％的乙醇溶液1.0ml，对于 CTRL组于早晨腹腔内施用生理盐水1.0ml。以0.10mg/ml将粉末体(A) 和(C)加入至蒸馏水中搅拌，于下午用导管经口施用0.5ml。

分析结果如下表所示，确认在T-A组和T-C组之间TG、TC均存 在显著差异，对于TG，可以看出T-A组较CTRL组下降，确认显著的 肝功能损伤(酒精性肝损伤)改善效果。

[表1]

                  单位：mmol/L

  CTRL组 AFL组 T-C组 T-A组 中性脂肪(TG) 0.990～1.310 1.480～1.920 1.550～1.790 0.280～0.640 总胆固醇(TC) 2.070～2.770 3.460～4.810 3.000～4.530 2.320～2.880

CTRL组：早晨施用1.0ml生理盐水，下午仅施用蒸馏水0.5ml

AFL组：早晨施用10%乙醇溶液1.0ml，下午仅施用蒸馏水0.5ml

T-C组：早晨施用10%乙醇溶液1.0ml，下午施用0.10mg/ml的粉 末体（C）搅拌水溶液0.5ml

T-A组：早晨施用10%乙醇溶液1.0ml，下午施用0.10mg/ml的粉 末体（A）搅拌水溶液0.5ml。

另一方面，尽管也为霰石和贝壳硬蛋白的混合粉末体，但没有明 显观察到未烧制的粉末体（C）对于肝功能损伤的作用，并且可见其与 本发明的粉末体（A）的结果的显著差异。因此，确认根据本发明的加 热条件，即加热温度200℃至300℃、加热时间20分钟至60分钟的烧 制，能够得到具有与未烧制的蚬壳粉末体完全不同的功能的烧制粉末 体。

如上所述，根据本发明的蚬壳烧制粉末体能够得到有效改善肝功 能损伤的碳酸钙和贝壳硬蛋白的烧制混合粉末体，并且能够得到与未 烧制的蚬壳粉末体，或者与专利文献1的发明产品100%方解石的蚬壳 烧制粉末体完全不同的蚬壳来源的粉末体。

此外，根据本发明的方法烧制蚬壳所得到的粉末体作为物品包含 于本发明内自不必说，含有该粉末体为有效成分的，以保持提高肝功 能、改善损伤或通过抑制血脂而降血脂为目的的医药品、食品或饮料 也包含在本发明的范围内。

此外，本发明的加热条件，即加热温度200℃至300℃、加热时间 20分钟至60分钟是为了使得本发明的粉末体成为同时含有烧制碳酸 钙和贝壳硬蛋白的状态，因此尽管加热方法不同，例如过热蒸汽或感 应加热、热压等的加热条件能够获得较低温和较短时间，但是本发明 人均衡考虑，只要这些条件以得到同时含有烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白 的粉末体为目的，也可包含在本发明的范围内。

反之，对于较上述过热条件更高温、长时间的加热，尽管以制得 同时含有烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白的蚬壳烧制粉末为目的也在本发明 的范围内，但是以本发明人所得到的技术知识，通过更高温、长时间 的烧制贝壳硬蛋白将消除，由于实际应用上需要更高成本，因此不能 够认为那些方法具有优于本发明的创造性。

如本说明书中以上所述，根据本发明的方法得到的蚬壳烧制粉末 体为同时含有烧制碳酸钙和贝壳硬蛋白的蚬壳烧制粉末体，并且在有 助于改善肝功能损伤的材料这点上，其为与未烧制的贝壳粉末体、或 者为专利文献1的发明产品的100％方解石的粉末体完全不同的具有显 著新颖性和进步性的物质，这是无论任何人根据公知技术的简单组合 均不能够容易得到的发明。

产业上利用的可能性

根据本发明，即使与公知技术相比较，也能够促进成为废弃物的 蚬壳的进一步有效利用，并且能够通过简单的方法从蚬壳制造以碳酸 钙和贝壳硬蛋白为有效成分的用于改善肝功能损伤的组合物。