G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株及其构建方法

摘要

本发明涉及医学分子生物学相关技术，尤其是采用siRNA干扰技术构建细胞研究模型。本发明所述的G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株是含有靶向干扰G6PD基因表达的DNA双链片段和绿色荧光蛋白(green？fluorescent？protein,GFP)基因、可将Caki-1细胞株经siRNA干扰技术靶向沉默了内源性G6PD表达量80％以上的稳转细胞株；所述的DNA双链片段为：干扰F链5ˊ-GATCCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTCAAGAGATGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTA-3ˊ和干扰R链5ˊ-AGCTTAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACATCTCTTGAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGGG-3ˊ。本申请应用siRNA干扰技术沉默人肾透明细胞癌Caki-1细胞内源性G6PD表达80％以上，构建了G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株(Caki-1-G6PD？siRAN)。这一细胞模型可用于探究G6PD与肾细胞癌的相关性，以及G6PD在肾细胞癌发生发展中的具体作用及相关调控机制。