一种由谷胱甘肽过氧化物酶克隆该基因的方法

摘要

一种由谷胱甘肽过氧化物酶克隆编码该酶的基因的方法，涉及由园林植物华北绣线菊克隆谷胱甘肽过氧化物酶基因的方法。本发明通过鉴定的抗寒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶克隆抗寒基因，比传统的基因克隆方法具有更高的特异性和准确性。方法：一、提取绣线菊总RNA；二、设计简并引物；三、基因中间片段的克隆；四、基因3’RACE克隆；五、基因5’RACE克隆；六、序列拼接获得基因全长，即完成谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆。本发明方法所克隆出的谷胱甘肽过氧化物酶基因受低温诱导，表达量显著增加，因此具有增强绣线菊抗寒能力的功能，为提高绣线菊抗寒能力和培育绣线菊新品种奠定基础，可应用于绣线菊抗寒基因工程和分子育种领域。