一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法

摘要

本发明涉及一种山芪参胶囊的五次发酵制备方法，所述山芪参胶囊的活性成分包括重量份为葛根10.0-30.0、黄芪8.7-25.5、山药5.0-15.0、桑叶2.5-7.5、丹参2.5-7.5的中药原料经益生菌接种，置于高温有氧和低温无氧条件下，五次发酵制成的发酵液，与0.0035-0.0105重量份的吡啶甲酸铬混合而成。本发明采用采用人体肠道内的多种益生菌，五次发酵，产品经长期临床和实践证明，发酵中药相比传统中药药效提高4-28倍。

说明书

技术领域

本发明属于保健食品领域，特别涉及一种山芪参胶囊的五次发酵 制备方法。

背景技术

山芪参胶囊为效果显著、安全低毒、配方精简的辅助降血糖药物， 为中国国家药监局批准上市的保健食品，该产品已经申请专利 CN2011104129944,是由精选的葛根、黄芪、山药、桑叶、丹参等5味 中药材经过科学配比制备而成，经功能试验和人体试食试验均表明本 发明产品具有显著的辅助降糖效果，经多年的临床应用表明，有效率 达到99%以上；经安全性试验表明，本发明产品安全低毒，符合国家规 定的人体安全性标准。然而，由于中药在人体内需要消化分解过程， 加之中药中有较多的无治疗活性的大分子物质，对于产品的疗效会有 较大影响，因而，只有对山芪参胶囊的制备工艺的不断改进，才能进 一步提高该药物的疗效。

发明内容

本发明提供了一种具有更高治愈率的山芪参胶囊的五次发酵制备 方法，具体的技术方案为：

本发明的山芪参胶囊的五次发酵制备方法，保留原有山芪参胶囊 所需的中药原料组合及配比，即葛根10.0-30.0、黄芪8.7-25.5、山 药5.0-15.0、桑叶2.5-7.5、丹参2.5-7.5，经益生菌接种，置于高温 有氧和低温无氧条件下，五次发酵制成的发酵液，与0.0035-0.0105 重量份的吡啶甲酸铬混合而成，接入的菌种重量占总重量的10-15%， 第五次发酵至每ml活菌数达到个10⁵-10⁹，所述五次发酵的条件为：

第一次发酵：将各中药原料单独发酵，将各益生菌种分别接种于 培养基中，培养基的重量份组成包括K₂HPO₄ 0.5-1.5，MgSO₄ 0.5-1， NaCl 1.5-2.5、NaHCO₃ 0.1-0.3g，起始pH值为6.2-7.2，培养温度25-27 ℃，摇床转速120-180转/分钟，培养时间170-230小时，获得的发酵液 经灭菌、过滤和冷冻处理得第一次发酵液、待用，；

第二次发酵：取各个药材原料的第一次发酵液，将各益生菌种分 别接种于培养基中，继续单独发酵，培养基同第一次发酵，起始pH值 为6.2-7.2，接种量6-12％，培养温度25-27℃，摇床转速140-200转/ 分钟，培养时间160-200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理， 得第二次发酵液、待用；

第三次发酵：取各个药材原料的第二次发酵液，混合，将各益生 菌种分别接种于培养基中，起始pH值为6.2-7.2；培养基同第一次发 酵，接种量5-12％，培养温度25-27℃，搅拌转速120-160转/分钟，培 养时间120-200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第三 次发酵液、待用；

第四次发酵：取第三次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基 中，培养基同第一次发酵，起始pH值为6.2-7.2，接种量5-12％，培 养温度25-27℃，搅拌转速100-190转/分钟，培养时间100-180小时， 获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得第四次发酵液、待用；

第五次发酵：取第四次发酵液，培养基同第一次发酵，起始pH值 为6.2-7.2，将各益生菌种分别接种于培养基中，在37℃左右发酵12 小时，获得的发酵液过滤，浓缩，干燥，即得。

为了获得更好的发酵效果，本发明的中药原料在发酵前，可先经 二氧化碳超临界提取后经益生菌接种，其中萃取温度45-60℃、解析压 力6-8Mpa、解析温度30-40℃、萃取压力20-35Mpa、萃取时间2-3小时。

本发明的益生菌选自但不限于高温放线菌、酵母菌、嗜热链球菌、 嗜酸乳杆菌、明串珠菌、保加利亚乳杆菌、地衣芽孢杆菌、农杆菌、 青春双歧杆菌的一种或组合，均为已被市售或其他方式公开菌种。

本发明中益生菌的较佳的重量份配比为酵母菌1-3、嗜热链球菌 1-3、嗜酸乳杆菌1-3、明串珠菌1-3、保加利亚乳杆菌1-3。

本发明的各次发酵中，中药原料与培养基按1∶3-6混合获得最佳 效果。

本发明的更优选的中药原料重量份配比为葛根16.0-24.0、黄芪 14.0-21.0、山药8.0-12.0、桑叶4.0-6.0、丹参4.0-6.0，与 0.0056-0.0084重量份的吡啶甲酸铬配伍使用。

最佳的是按如下重量份中药原料与280mg的吡啶甲酸铬制成1000 粒胶囊，葛根800g、黄芪700g、山药400g、桑叶200g、丹参200g。

本发明的有益效果为：采用五次发酵，模拟中药在人体内的消化 分解过程，采用现代生物工程技术，在人体外建立一个“工业化肠胃 系统”，采用人体肠道内的多种益生菌，对中药进行预消化、分解和转 化，把大分子的中间物质，分解转化成为能够被直接吸收的有效小分 子物质。人体试食证明，本发明方法制得的产品相比传统山芪参胶囊 药效提高4-28倍。下面通过试验例对本发明做进一步说明：

试验例人体试食试验

1材料和方法

1.1样品：五次发酵法山芪参胶囊（试食组服用）和传统山芪参胶囊（对 照组服用）均由北京阳光一佰生物技术开发有限公司提供。食用方法 为每日2次，每次2粒。

对照组数据引用专利CN2011104129944试食试验的“试食组”数据。

1.2受试者选择

1.2.1纳入标准：征集经饮食控制或口服降糖药后病情稳定、不需要更 换药物品种及剂量、只服用维持量降糖药的成年II型糖尿病例，年龄 在18-65岁，空腹血糖≥7.8mmol/L，或餐后2小时血糖≥11.1mmol/L。

1.2.2排除标准

1.2.2.1I型糖尿病人。

1.2.2.2年龄在18-65岁以外者，妊娠或哺乳妇女，对受试样品过敏 者。

1.2.2.3有严重心、肝、肾等并发症，或合并有其他严重原发疾病，精 神病患者，服用糖皮质激素或其它影响血糖药物者。

1.2.2.4不合作者，无法判断疗效或资料不全者。

1.2.2.5近3个月内有糖尿病酮症、酸中毒以及感染者。

1.2.2.6短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判定者。

1.3试验设计与分组：随机分为受试组和对照组。各组采用自身对照设 计，两组间对照设计。

1.4试食方法：54例受试者，在原服用的降糖药物品种及剂量均不变 的基础上，加服五次发酵山芪参胶囊，服用方法均为每日二次，每次2 粒。试食者原饮食习惯不变。

1.5仪器与试剂：CYSMEX-SY18001型血球计数仪，Ci8200雅培生化- 免疫工作站，长春迪瑞-H500全自动尿液分析仪。

结果：

表1试食前后空腹血糖比较（mmol/L,X±S）

表5餐后2小时血糖比较（mmol/L,X±S）

#表示自身前后比较P<0.05  *表示两组间比较P<0.05

表6空腹尿糖结果（X±S）

表7糖尿病症状治愈率比较

结果与判定

实验周期1个月，结果表明，五次发酵法山芪参胶囊能使II型糖 尿病人的空腹血糖平均下降1.70+1.97mmol/L（下降17.0%），餐后血 糖下降3.90±3.62mol/L（下降22.8%），有效率提高达8.6-18.6%。

具体实施方式

最佳实施例制备1000粒胶囊

中药原料：葛根800g、黄芪700g、山药400g、桑叶200g  丹参 200g；

吡啶甲酸铬280mg；

培养基：K₂HPO₄∶MgSO₄∶NaCl∶NaHCO₃=1∶0.5∶2∶0.2；

中药原料：培养基=1∶4；

益生菌的重量份配比：酵母菌∶嗜热链球菌∶嗜酸乳杆菌∶明串 珠菌∶保加利亚乳杆菌=1∶1∶1∶2∶1∶2

具体方法为：

A超临界萃取

取所有中药原料经二氧化碳超临界提取，其中萃取温度40-60℃、 解析压力6-8Mpa、解析温度30-45℃、萃取压力20-30Mpa、萃取时间 1-3小时。

B五次发酵

第一次发酵：将各中药原料单独发酵，将各益生菌种分别接种于 培养基中，起始pH值为7，培养温度25℃，摇床转速140转/分钟，培 养时间200小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理得第一次发酵 液、待用，；

第二次发酵：取各个药材原料的第一次发酵液，将各益生菌种分 别接种于培养基中，继续单独发酵，起始pH值为7，接种量10％，培 养温度25℃，摇床转速200转/分钟，培养时间160小时，获得的发酵液 经灭菌、过滤和冷冻处理，得第二次发酵液、待用；

第三次发酵：取各个药材原料的第二次发酵液，混合，将各益生 菌种分别接种于培养基中，起始pH值为7；接种量10％，培养温度25 ℃，搅拌转速140转/分钟，培养时间120小时，获得的发酵液经灭菌、 过滤和冷冻处理，得第三次发酵液、待用；

第四次发酵：取第三次发酵液，将各益生菌种分别接种于培养基 中，起始pH值为7，接种量10％，培养温度25℃，搅拌转速140转/分 钟，培养时间180小时，获得的发酵液经灭菌、过滤和冷冻处理，得 第四次发酵液、待用；

第五次发酵：取第四次发酵液，培养基同第一次发酵，起始pH值 为6.2-7.2，将各益生菌种分别接种于培养基中，在37℃左右发酵12 小时，获得的发酵液过滤，浓缩，干燥，即得。

C成囊

将五次发酵后的活性物质与吡啶甲酸铬充分混合后，加入适量辅 料，按照常规胶囊制备技术，制得1000粒。

以上所述实施例仅仅是本发明的优选实施方式进行描述，并非对 本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域 普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入 本发明的权利要求书确定的保护范围内。