在乳酸乳球菌表面展示表达幽门螺杆菌蛋白的载体及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种具有在乳酸乳球菌表面展示表达幽门螺杆菌蛋白的载体及其构建方法和应用。该载体的构建方法：以幽门螺杆菌基因组DNA为模板，用PCR方法扩增hpaA基因；将得到的hpaA基因与表达载体pNZ8110-lysM经酶切后进行连接，连接产物用于转化大肠杆菌；筛选并鉴定阳性转化菌，从阳性转化菌中提取重组质粒pNZ8110-hpaA-lysM；用电穿孔法将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ3900菌株，经筛选和鉴定得到重组菌株L.lactis NZ3900/pNZ8110-hpaA-lysM；培养该重组菌株，用诱导剂Nisin诱导hpaA基因的表达。Western blots分析显示重组菌株细胞壁蛋白中含有表达的HpaA蛋白，且该蛋白具有免疫活性。本发明提供的表达载体及包含该载体的重组菌株可应用于抗幽门螺杆菌疫苗和诊断试剂的制备或食品加工。