以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成咖啡酸酰胺衍生物的方法及用途

摘要

本发明公开了以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成咖啡酸酰胺衍生物的合成方法及用途。合成方法将咖啡酸溶于乙酸酐中依次与吡啶、四氢呋喃和磺胺类药物反应得到酰胺化合物粗品，经过滤、洗涤、重结晶等工序得到咖啡酸酰胺衍生物。本发明的提取方法简单易操作提纯率高。通过试验合成咖啡酸酰胺衍生物对肺炎球菌、大肠杆菌，绿脓杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌的抑制作用可在制备抑菌作用的药物中应用。

说明书

技术领域

本发明涉及酰胺化合物的合成方法及用途。具体是以咖啡酸与磺胺类药物 为原料合成咖啡酸酰胺衍生物的方法及用途。

背景技术

酚酸类化合物，是指在同一苯环上有若干个酚性羟基的有机酸，酚酸具有 广泛的生理活性，咖啡酸及其衍生物是一类重要的酚酸，具有多方面的生物活 性，如抗氧化、清除自由基、抗紫外线辐射、抑菌效应中枢兴奋、凝血、解毒 以及抗病毒作用，在医药、农药、化妆品原料和食品添加剂等方面有着广泛的 用途。咖啡酸及其衍生物的抗菌活性很早就引起人们的注意，农业上将咖啡酸 作为天然杀菌剂。咖啡酸及其衍生物是天然的抗氧化剂，其抗氧化活性主要体 现为清除自由基、金属离子螯合，抑制脂质过氧化氢酶的形成和低密度脂蛋白 的氧化等诸多方面。利用它们的抗氧化性可以预防很多疾病，例如癌症，糖尿 病，心血管疾病，老年痴呆症和帕金森氏病等等。咖啡酸的衍生物中天然蜂胶 成分咖啡酸苯乙酯具有抗癌功效，是天然抗肿瘤药物研发的明星分子。

酰胺类物质是具有显著杀菌性能的物质之一，自第一个酰胺类杀菌剂萎锈 灵于1966年由有利来路公司(现科聚亚公司)成功开发以来，该类化合物作为杀 菌剂已有40多年的历史，且一直有结构新颖的品种报道。众多研究结果表明， 酰胺类杀菌剂主要是通过影响病原菌的呼吸链电子传递系统从而达到抑制病 原菌的生长，最终导致其死亡。

本发明设计并合成了一系列新型咖啡酸酰胺衍生物，并研究其对肺炎球 菌、大肠杆菌，绿脓杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌抑制作用。结果发 现：咖啡酸衍生物中含有二甲基、氯元素的化合物表现出比对照药物更强的杀 菌活性。本发明以一种重要的天然药物提取物为原料，合成具有良好的药物活 性的衍生物，在制备抑菌作用的药物中得到应用。

发明内容

本发明的目的是提供以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成一系列咖啡酸酰 胺衍生物的方法及用途。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

1.十六种咖啡酸酰胺衍生物结构如下：

2.十六种咖啡酸酰胺衍生物的合成方法，操作步骤如下：

步骤一.将咖啡酸溶于乙酸酐中，待完全溶解后，加入吡啶，60℃下搅拌 回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙酸乙 酯重结晶得到纯品，加入的咖啡酸、乙酸酐和吡啶的量摩尔数之比为 1∶10∶0.002。

步骤二.将步骤一得到的白色粉末二乙酰咖啡酸溶于二氯亚砜中，二乙酰 咖啡酸∶二氯亚砜的摩尔比为1∶20，在60℃油浴下搅拌回流8小时后停止反 应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释得到溶液。

步骤三.在冰浴条件下将磺胺类药物如磺胺甲恶唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺 胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪钠、磺胺氯吡嗪钠、磺胺喹恶林钠、磺 胺二甲氧嘧啶钠分别加入到步骤二的溶液中，加入吡啶，搅拌24小时后停止 反应，加入磺胺类药物和吡啶的量与步骤二得到的二乙酰咖啡酸量的关系是： 二乙酰咖啡酸∶磺胺类药物∶吡啶的摩尔数之比为1∶1.2∶0.002。

步骤四.待步骤三反应结束后，减压蒸去溶剂，在反应混合物中加入蒸馏 水，蒸馏水的加入量是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为1∶150，产 物沉淀析出，减压过滤，水洗沉淀，再用四氢呋喃和甲醇按体积比为1∶1 的混合溶液对沉淀重结晶得到乙酰咖啡酸衍生物；

或待步骤三反应结束后，减压蒸去溶剂，加入盐酸，盐酸的加入体积与步 骤1的咖啡酸重量比为6mL∶3.58g，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反 应，减压蒸去溶剂，冷却加入蒸馏水，蒸馏水的加入量是水与反应物咖啡酸衍 生物的摩尔数之比为1∶150，沉淀析出，减压抽滤，水洗，取沉淀，再用四 氢呋喃和甲醇按体积比为1∶1的混合溶液对沉淀重结晶得到乙酰咖啡酸衍 生物。

上述的以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成的咖啡酸酰胺衍生物对肺炎球 菌、大肠杆菌，绿脓杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌的抑制作用。

上述的以咖啡酸与磺胺类药物为原料合成的咖啡酸酰胺衍生物在制备抑 菌作用的药物中作原料应用。

本发明优点：

本发明以一种重要的天然药物提取物为原料提取方法简单易操作提纯率 高。合成具有良好的药物活性的衍生物对革兰氏阴性和阳性菌有明显的抑菌作 用，可以作为制备抑菌作用的潜在药物。在制备抑菌作用的药物中得到应用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行说明。

实施例1

乙酰咖啡酰磺胺甲恶唑的制备（化合物1）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4mL)， 60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙酸乙酯 重结晶得到纯品。向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃油浴下 搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰浴下加 入磺胺甲恶唑(5.8g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减压蒸去溶 剂，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比1：150），沉 淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇（V/V=1:1）重结晶得到此目标化合物，白色 粉末，产率70%,mp:244-246℃,MS:m/z 450,calcd,450.¹HNMR(300MHz,DMSO-d6,δppm): δ11.25(s,1H,SO₂NH),10.56(s,1H,CONH),7.79(d,J=9.1Hz,2H,C3”,5”-H),7.73(d,J= 9.18Hz,2H,C2”,6”-H),7.53(d,J=8.2Hz,1H,C2’-H),7.49(d,J=8.2Hz,1H,C5’-H),7.46 (s,1H,C6’-H),7.25(d,J=15.1Hz,1H,C2-H),6.70(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),6.03(s,1H, C4””-H),2.18(d,J=0.6Hz,9H,CH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.66(C-1””,3””), 164.25(C-5”’),151.45(C-1),150.09(C-3”’),145.10(C-3’),145.02(C-4’),143.50(C-3), 142.82(C-1”),139.91(C-4”),134.94(C-1’),133.82(C-3”,5”),129.26(C-6’),126.70(C-5’), 125.37(C-2’),125.11(C-2),119.12(C-2”,6”),106.00(C-4”’),20.82(C-2””,4””),12.70 (C-6”’).IR data(KBr pellets,cm^-1):3063.28(w,ν_N-H),1673.37(s,ν_C＝O),1629.53(s,ν_RCH＝CHR), 1596.42(s,ν_Ar),1534.25(s,ν_Ar),1497.49(w,ν_Ar).

实施例2

咖啡酰磺胺甲噁唑的制备（化合物2）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺甲恶唑(5.8g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减压 蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应，减压 蒸去溶剂，冷却，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比 为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目 标化合物，浅黄色粉末，产率80%,mp:258-260℃,MS:m/z 414,calcd 415,¹HNMR(300MHz, DMSO-d6,δppm):δ11.23(s,1H,SO₂NH),10.39(s,1H,CONH),9.44(s,1H,C3’-OH),9.14(s, 1H,C4’-OH),7.78(d,J=9.08,2H,C3”,5”-H),7.72(d,J=9.11,2H,C2”,6”-H),7.34(d,J= 15.55Hz,1H,C2-H),6.94(d,J=1.9Hz,1H,C2’-H),6.85(d,J=8.3,Hz,1H,C5’-H),6.69(d,J =8.1Hz,1H,C6’-H),6.45(d,J=15.6Hz,1H,C3-H),6.04(d,J=0.9Hz,1H,C4””-H),2.19(d, J=0.6Hz,3H,CH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.69(C-5”’),168.62(C-1),164.25 (C-3”’),151.45(C-3’),150.09(C-4’),145.10(C-3),143.57(C-1”),143.42(C-4”),142.82 (C-3”),139.91(C-5”),134.94(C-1’),133.82(C-6’),129.26(C-2),124.74(C-2”),123.26(C-6”), 123.15(C-5’),119.12(C-2’),106.00(C-4”’),12.70(C-6”’).IR data(KBr pellets,cm^-1): 3374.61(s,ν_O-H),3163.80(s,ν_N-H),3137.80(s,ν_C=O),1676.48(s,ν_RCH＝CHR),1620.57(m,ν_Ar), 1596.75(m,ν_Ar),1502.38(w，ν_Ar).

实施例3

乙酰咖啡酰对甲氧嘧啶的制备（化合物3）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺对甲氧嘧啶(6.4g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为 1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目标 化合物，白色粉末，产率67%,mp:266-267℃,MS:m/z526,calcd 526,¹HNMR(300MHz, DMSO-d6,δppm):δ11.37(s,1H,SO₂NH),10.56(s,1H,CONH),8.24(s,2H,C4”’,6”’-H), 7.88(d,J=12.4Hz,2H,C3”,5”-H),7.80(d,J=12.4,2H,C2”,6”-H),7.56(d,J=15.47Hz, 1H,C2-H),7.53(d,J=8.42Hz,1H,C2’-H),7.51(s,1H，C5’-H),7.30(d,J=8.4Hz,1H,C6’-H), 6.76(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),3.73(s,3H,OCH₃),2.24(d,J=2.5Hz,6H,COCH₃).¹³C NMR (75MHz,DMSO)δ168.66(C-1””,3””),164.25(C-1),151.45(C-2”’),150.09(C-3’),145.10 (C-4’),143.50(C-5”’),142.82(C-4”’,6”’),139.91(C-1”),134.94(C-3),133.82(C-4”), 129.26(C-3”,5”),126.70(C-1’),125.37(C-6’),125.11(C-5’),119.12(C-2”,6”),115.64(C-2), 106.00(C-2’),56.71(C-7”’),20.82(C-2””,4””)IR data(KBr pellets,cm-1):3058.72(w, ν_N-H),1771.47(s,ν_C＝O),1683.65(s,ν_RCH＝CHR),1635.01(s,ν_Ar),1589.28(s,ν_Ar),1506.06(s,ν_Ar).

实施例4

咖啡酰磺胺对甲氧嘧啶的制备（化合物4）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺对甲氧嘧啶(6.4g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，冷却加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此 目标化合物，浅黄色粉末，产率75%,mp:274–276℃,MS:m/z 441,calcd,442,¹HNMR(300 MHz,DMSO-d6,δppm):δ11.26(s,1H，SO₂NH),10.32(s,1H,CONH),9.41(s,1H,C3’-OH), 9.11(s,1H,C4’-OH),8.14(s,2H,C4”’,6”’-H),7.80(d,J=8.9Hz,2H,C3”,5”-H),7.71(d,J= 8.9Hz,2H,C2”,6”-H),7.33(d,J=15.5Hz,1H,C2-H),6.90(d,J=1.7Hz,1H,C2’-H),6.80 (dd,J=8.1,1.7Hz,1H,C5’-H),6.66(d,J=8.1Hz,1H,C6’-H),6.42(d,J=15.5Hz,1H,C3-H), 3.65(s,3H,OCH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.69(C-1),164.25(C-2”’),151.45(C-3’), 150.09(C-4’),145.10(C-5”’),143.57(C-3),143.42(C-4”’),142.82(C-6”’),139.91(C-1”), 134.94(C-4”),133.82(C-3”,5”),126.70(C-1’),124.74(C-6’),123.26(C-2),123.15(C-2”,6”), 119.12(C-5’),106.00(C-2’),20.82(C-7”’).IR data(KBr pellets,cm^-1):3592.84(s,ν_O-H), 3454.57(s,ν_N-H),1687.38(s,ν_C=O),1607.9(m,ν_RCH＝CHR),1588.33(s,ν_Ar),1538.48(s,ν_Ar), 1514.31(w，ν_Ar).

实施例5

乙酰咖啡酰磺胺间甲氧嘧啶的制备（化合物5）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺间甲氧嘧啶(6.4g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为 1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目标 化合物，为白色粉末，产率58%,mp:230-232℃,MS:m/z526,calcd 526,¹HNMR(300MHz, DMSO-d6,δppm):δ11.98(s,1H,SO₂NH),10.56(s,1H,CONH),8.33(s,1H,C2”’-H),7.85(d, J=9.25Hz,2H,C3”,5”-H),7.78(d,J=9.25Hz,2H,C2”,6”-H),7.55(d,J=15.7Hz,1H, C2-H),7.51(d,J=8.3Hz,1H,C2’-H),7.49(s,1H,C5’-H),7.27(d,J=8.3Hz,1H,C6’-H), 6.74(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),6.28(d,J=0.4Hz,1H,C6”’-H),3.76(s,3H,OCH₃),2.22(d,J =2.4Hz,6H,COCH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.64(C-1””,3””),164.27(C-1), 158.99(C-4”’),157.02(C-2”’),156.30(C-5”’),143.60(C-3’),143.54(C-4’),142.82(C-3), 139.96(C-1”),134.72(C-6”’),133.81(C-4”),128.74(C-1’),126.69(C-3”,5”),124.74(C-6’), 123.19(C-5’),119.43(C-2’),118.89(C-2),118.21(C-2”,6”),54.62(C-7”’),20.80(C-2””, 4””).IR data(KBr pellets,cm^-1):3067.36(w,ν_N-H),1770.25(s,ν_C=O),1673.85(s,ν_RCH＝CHR), 1627.53(s,ν_Ar),1593.06(s,ν_Ar),1531.47(m,ν_Ar).

实施例6

咖啡酰磺胺间甲氧嘧啶的制备（化合物6）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺间甲氧嘧啶(6.4g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数 之比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得 到此目标化合物，浅黄色粉末，产率68%,mp:274–276℃,MS:m/z 441,calcd,442, ¹HNMR(300MHz,DMSO-d6,δppm):δ11.36(s,1H,SO₂NH),10.48(s,1H,CONH),9.54(s, 1H，C3’-OH),9.26(s,1H,C4’-OH),8.42(s,1H,C2”’-H),7.92(d,J=8.9Hz,2H,C3”,5”-H), 7.86(d,J=8.9Hz,2H,C2”,6”-H),7.47(d,J=15.5Hz,1H,C2-H),7.05(d,J=1.9Hz,1H, C2’-H),6.95(dd,J=8.3,1.9Hz,1H,C5’-H),6.80(d,J=8.1Hz,1H,C6’-H),6.56(d,J=15.6 Hz,1H,C3-H),6.35(d,J=4.5Hz,1H,C6”’-H),3.83(s,3H,OCH₃).¹³C NMR(75MHz, DMSO)δ170.37(C-1),165.06(C-4”’),159.02(C-2”’),156.96(C-5”’),148.50(C-3’),146.10 (C-4’),143.98(C-3),142.41(C-6”’),134.28(C-4”),128.72(C-1”),126.45(C-3”,5”),121.67 (C-1’),119.23(C-6’),118.16(C-2),116.31(C-2”,6”),114.51(C-5’),91.35(C-2’),54.59 (C-7”’).IR data(KBr pellets,cm^-1):3492.87(m,ν_O-H),3397.39(s,ν_N-H),1665.27(s,ν_C＝O), 1627.42(s,ν_RCH＝CHR),1595.18(s,ν_Ar),1534.83(s,ν_Ar),1496.13(w,ν_Ar).

实施例7

乙酰咖啡酰磺胺嘧啶的制备（化合物7）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺嘧啶(5.7g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减压蒸 去溶剂，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为1：150）， 沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目标化合物，浅 黄色粉末，产率86%,mp:230-232℃,MS:m/z496,calcd,496.¹H-NMR(300MHz,DMSO-d6, δppm):δ11.89(s,1H,SO₂NH),10.78(s,1H,CONH),8.65(d,J=4.9Hz,2H,C4”’,6”’-H), 8.10(d,J=8.9Hz,2H,C3”,5”-H),8.05(d,J=8.9Hz,2H,C2”,6”-H),7.78(d,J=15.67Hz, 1H,C2-H),7.74(d,J=8.9Hz,1H,C2’-H),7.70(s,1H,C5’-H),7.50(d,J=8.98Hz,1H,C6’-H), 7.18(t,J=4.9Hz,1H,5”’-H),6.98(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),2.45(d,J=2.2Hz,6H,COCH₃). ¹³C NMR(75MHz,DMSO):δ168.68(C-2”’),168.61(C-1””),164.27(C-3””),158.80(C-1), 157.40(C-4”’,6”’),143.58(C-4’),143.55(C-3’),142.82(C-3),139.93(C-4”),134.71(C-1’), 133.82(C-3”,5”),129.44(C-1”),126.68(C-6’),124.72(C-5’),123.25(C-2’),123.15(C-2), 119.10(C-2”,6”),116.24(C-5”’),20.77(C-2””,4””).IR data(KBr pellets,cm^-1):3043(m, ν_N-H),1771(s,ν_C=O),1683(s,ν_C＝O),1635(m,ν_RCH=CHR),1590(s,ν_Ar),1527(m,ν_Ar),1505(m,ν_Ar).

实施例8

咖啡酰磺胺嘧啶的制备（化合物8）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺嘧啶(5.7g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减压蒸 去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应，减压蒸 去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为 1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目标 化合物，浅黄色粉末，产率89%,mp:289-292℃,MS:m/z 411,calcd,412,¹H-NMR(300MHz, DMSO-d6,δppm):δ11.57(s,1H,SO₂NH),10.38(s,1H,CONH),9.45(s,1H,C3’-OH),9.17(s, 1H,C4’-OH),8.43(d,J=7.4Hz,1H,C4”’-H),8.40(d,J=7.4Hz,1H C6”’-H),7.87(d,J= 8.9Hz,2H,C3”,5”-H),7.80(d,J=8.9Hz,2H,C2”,6”-H),7.37(d,J=15.5Hz,1H,C2-H), 6.955(t,J=4.8Hz,1H,C2’-H),6.94(d,J=1.5Hz,1H,C5’-H),6.85(dd,J=8.2,1.5Hz,1H, C6’-H),6.71(d,J=8.1Hz,1H,5”’-H),6.45(d,J=15.5Hz,1H,C3-H).¹³C NMR(75MHz, DMSO)δ165.02(C-2”’),158.82(C-1),157.44(C-4”’),148.49(C-6”’),146.10(C-3’),143.86 (C-4’),142.33(C-3),134.30(C-1”),129.38(C-4”),126.43(C-3”,5”),121.63(C-1’),119.12 (C-6’),118.98(C-2),118.52(C-2”,6”),118.36(C-5’)116.30(C-5”’),114.51(C-2’).IR data (KBr pellets,cm^-1):3486.34(s,ν_O-H),3386.56(s,ν_N-H),1664.28(m,ν_C=O),1593.05(s,ν_Ar), 1559.25(s,ν_Ar),1534.83(s,ν_Ar).

实施例9

乙酰咖啡酰磺胺氯哒嗪的制备（化合物9）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺氯哒嗪钠(6.9g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到 此目标化合物，黄色粉末，产率28%,mp:121-124℃,MS:m/z530,calcd,530.¹H NMR(300 MHz,DMSO)δ11.65(m,1H,CONH),10.54(s,1H,SO₂NH),7.76(d,J=9.02Hz,2H,C3”, 5”-H),7.71(d,J=9.02Hz,2H,C2”,6”-H),7.63(d,J=9.5Hz,1H,C5”’-H),7.49(d,J=15.6 Hz,1H,C2-H),7.47(d,J=1.9Hz,1H,C2’-H),7.45(dd,J=8.3,1.9Hz,1H,C5’-H),7.42(d,J =8.1Hz,1H,C6’-H),7.21(d,J=9.02Hz,1H,C4”’-H),6.65(d,J=15.6Hz,1H,C3-H),2.14(t, J=4.6Hz,6H,COCH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.70(C-1””,3””),164.28(C-3”), 161.78(C-3”’),154.72(C-6”’),146.24(C-4’),145.73(C-3’),145.42(C-3),143.58(C-1”), 142.80(C-4”),140.02(C-1’),133.79(C3”,5”),128.74(C-5”’),126.75(C-6’),124.76(C-5’), 123.17(C-2’),119.41(C-4”’),118.94(C-2),118.71(C-2”,6”),20.82(C-2””,4””).IR data (KBr pellets,cm^-1):3036.83(m,ν_N-H),1769.50(s,ν_C＝O),1686.70(m,ν_C=O),1628.60(s, ν_RCH＝CHR),1591.11(s,ν_Ar),1528.40(s,ν_Ar).

实施例10

咖啡酰氯哒嗪的制备（化合物10）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺氯吡嗪钠(6.9g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比为1： 150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到此目标化 合物，深黄色粉末，产率48%,mp:156-158℃,MS:m/z445,calcd,446,¹H-NMR(300MHz, DMSO-d6,δppm):δ11.33(s,1H,SO₂NH),10.36(s,1H,CONH),9.43(s,1H,C3’-OH),9.12(s, 1H,C4’-OH),7.78(d,J=9.02Hz,2H,C3”,5”-H),7.73(d,J=9.02Hz,2H,C2”,6”-H),7.64 (d,J=9.33Hz,1H,C5”’-H),7.45(d,J=9.33Hz,1H,C4”’-H),7.32(d,J=15.6Hz,1H,C2-H), 6.91(d,J=1.9Hz,1H,C2’-H),6.82(dd,J=8.3,1.9Hz,1H,C5’-H),6.67(d,J=8.1Hz,1H, C6’-H),6.42(d,J=15.6Hz,1H,C3-H).¹³C NMR(75MHz,DMSO):δ165.05(C-1),154.71 (C-3”’),148.50(C-4’),146.10(C-3’),144.02(C-6”’),142.43(C-3),128.68(C-1”),126.42 (C-4”),121.65(C-3”,5”),119.67(C-5”’),119.62(C-1’),119.53(C-6’),118.66(C-2),118.42 (C-4”’),118.38(C-2”,6”),116.30(C-5’),114.53(C-2’).IR data(KBr pellets,cm-1): 3448.56(s,ν_O-H),3386.56(s,ν_N-H),1658.42(m,ν_C=O),1624.91(s,ν_RCH＝CHR),1592.78(s,ν_Ar), 1536.58(s,ν_Ar),1522.59(s,ν_Ar).

实施例11

乙酰咖啡酰咖啡酰氯吡嗪的制备（化合物11）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺氯吡嗪钠(6.9g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到 此目标化合物，白色粉末，产率58%,mp:260–262℃,MS:m/z530,calcd,530,¹HNMR(300 MHz,DMSO-d6,δppm):δ11.76(s,1H,SO₂NH),10.61(s,1H,CONH),8.26(s,1H,C5”’-H), 8.24(s,1H,C3”’-H),7.91(d,J=9.0Hz,2H,C3”,5”-H),7.84(d,J=9.0Hz,2H,C2”,6”-H), 7.56(d,J=15.7Hz,1H,C2-H),7.52(d,J=8.2Hz,1H,C2’-H),7.51(s,1H,C5’-H),7.29(d,J= 8.2Hz,1H,C6’-H),6.75(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),2.22(t,J=7.1Hz,6H,COCH₃).¹³C NMR (75MHz,DMSO)δ168.64(C-1””),164.34(C-3””),147.90(C-2”’),145.95(C-6”’),144.14 (C-5’),143.60(C-4’),142.82(C-3),140.08(C-1”),137.49(C-4”),133.78(C-5”’),133.43 (C-3”’),132.75(C-1’),129.38(C-3”,5”),126.71(C-6’),124.74(C-5’),123.17(C-2),122.9 (C-2’)119.34(C-2”,6”),20.80(C-2””,4””).IR data(KBr pellets,cm^-1):3359.70(m,v_N-H), 1769.45(s,ν_C=O),1683.19(s,ν_C＝O),1624.45(s,ν_RCH＝CHR),1591.62(s,ν_Ar),1528.40(s,ν_Ar), 1503.70(s,ν_Ar).

实施例12

咖啡酰氯吡嗪的制备（化合物12）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺氯吡嗪钠(6.9g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇（V/V=1:1）重结晶得到 此目标化合物，黄色粉末，产率68%,mp:290-292℃,MS:m/z 445,calcd,446,¹H-NMR(300 MHz,DMSO-d6,δppm):δ11.44(s,1H,SO₂NH),10.17(s,1H,CONH),7.88(s,1H,C5”’-H), 7.85(s,1H,C3”’-H),7.51(d,J=9.26Hz,2H,C3”,5”-H),7.44(d,J=9.26Hz,2H,C2”, 6”-H),7.02(d,J=15.5Hz,1H,C2-H),6.61(d,J=1.9Hz,1H,C2’-H),6.51(dd,J=8.3,1.9Hz, 1H,C5’-H),6.36(d,J=8.1Hz,1H,C6’-H),6.12(d,J=15.6Hz,1H,C3-H).¹³C NMR(75 MHz,DMSO)δ165.21(C-1),148.50(C-2”’),147.81(C-3’),146.00(C-4’),145.92(C-6”’), 144.44(C-3),142.60(C-1”),137.50(C-4”),132.80(C-5”’),132.67(C-3”’),126.38(C-3”,5”), 121.68(C-1’),119.15(C-6’),118.01(C-2),116.29(C-2”,6”),115.84(C-5’),114.64(C-2′).IR data(KBr pellets,cm^-1):3425.33(s,ν_O-H),3385.42(s,ν_N-H),1666.08(m,ν_C＝O),1639.46(s, ν_RCH＝CHR),1589.46(s,ν_Ar),1542.87(s,ν_Ar),1521.54(w,ν_Ar).

实施例13

乙酰咖啡酰磺胺喹恶啉的制备（化合物13）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺喹恶林钠(7.3g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到 此目标化合物，白色粉末，产率42%,mp:242-244℃,MS:m/z546,calcd,546,¹H-NMR(300 MHz,DMSO-d6,δppm):12.01(s,1H,SO₂NH),10.56(s,1H,CONH),8.58(s,1H,C3”’-H), 8.04(d,J=8.8Hz,2H,C3”,5”-H),7.85(d,J=8.8Hz,2H,C2”,6”-H),7.83(d,J=15.7Hz, 1H,C2-H),7.74(d,J=8.5Hz,1H,C2’-H),7.69-7.62(m,1H,C6”’-H),7.55-7.50(m,1H, C5”’-H),7.56(d,J=10.30Hz,2H,C7”’,10”’-H),7.50(d,J=10.30Hz,2H,C8”’,9”’-H), 7.49(s,1H,C5’-H),7.27(d,J=8.5Hz,C6’-H),6.73(d,J=15.7Hz,1H,C3-H),2.21(d,J= 2.29Hz,6H,COCH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.64(C-1””),164.26(C-3””),146.57 (C-1),143.70(C-2”’),143.68(C-3’),143.42(C-4’),143.27(C-3),142.81(C-1”),139.95(C-4”), 133.80(C-5”’),131.39(C-6”’),129.21(C-3”’),128.78(C-1’),128.35(C-3”,5”),127.88 (C-8”’),127.03(C-6’),126.68(C-7”’),124.73(C-10”’),123.18(C-9”’),119.16(C-5’),118.63 (C-2’),118.52(C-2),118.06(C-2”,6”),20.81(C-3””,4””).IR data(KBr pellets,cm^-1): 3348.43(m,ν_N-H),1766.22(s,ν_C=O),1682.34(m,ν_RCH＝CHR),1629.58(s,ν_Ar),1590.84(s,ν_Ar), 1533.72(s,ν_Ar).

实施例14

咖啡酰磺胺喹恶啉的制备（化合物14）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺喹恶林钠(7.3g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应，减 压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之 比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶（V/V=1:1）得到 此目标化合物，黄色粉末，产率62%,mp:255-258℃,MS:m/z461,calcd,462,¹H-NMR(300 MHz,DMSO-d6,δppm):δ11.79(s,1H,SO₂NH),10.36(s,1H,CONH),9.44(s,1H，C3’-OH), 9.14(s,1H,C4’-OH),8.52(s,1H,C3”’-H),7.99(d,J=8.3Hz,2H,C3”,5”-H),7.82(d,J=8.3 Hz,2H,C3”,5”-H),7.87–7.75(m,1H,C6”’-H),7.71(m,1H,C5”’-H),7.66–7.59(d,J=7.3 Hz,2H,C7”’,10”’-H),7.50(d,J=7.5Hz,2H,C8”’,9”’-H),7.35(d,J=15.5Hz,1H,C2-H), 6.92(d,J=1.9Hz,1H,C2’-H),6.83(dd,J=8.3,1.9Hz,1H,C5’-H),6.69(d,J=8.1Hz,1H, C6’-H),6.43(d,J=15.6Hz,1H,C3-H).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ165.64(C-1),165.03 (C-2”’),148.51(C-3’),146.55(C-4’),146.10(C-3),144.19(C-1’),142.81(C-6”’),142.42 (C-5”’),139.95(C-4’),133.80(C-3”’),131.39(C-3”,5”),128.83(C-8”’),128.35(C-1’), 127.88(C-10”’),126.42(C-7”’),121.65(C-9”’),118.94(C-6’),118.59(C-2),118.14(C-2”, 6”),116.30(C-5’),,114.49(C-2’).IR data(KBr pellets,cm^-1):3525.53(s,ν_O-H),3171.06(s, ν_N-H),1664.57(s,ν_C=O),1589.73(s,ν_Ar),1529.88(s,ν_Ar),1496.92(s,ν_Ar).

实施例15

乙酰咖啡酰磺胺二甲氧嘧啶（化合物15）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4mL)， 60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙酸乙酯 重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃油浴下 搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰浴下加 入磺胺二甲氧嘧啶钠(7.5g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应，减压 蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数之比 为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶得到此目标化合物， 黄色粉末，产率56%,mp:228-230℃,MS:m/z556,calcd,556,¹H NMR(300MHz,DMSO)δ 11.00(s,1H,SO₂NH),10.54(s,1H,CONH),7.99(s,1H,C2”’-H),7.85(d,J=8.9Hz,2H,C3”, 5”-H),7.74(d,J=8.9Hz,2H,C2”,4”-H),7.51(d,J=15.7Hz,1H,C2-H),7.47(d,J=1.4Hz, 1H,C2’-H),7.42(dd,J=8.2,1.4Hz,1H,C5’-H),7.22(d,J=8.6Hz,1H,C6’-H),6.69(d,J= 15.7Hz,1H,C3-H),3.76(s,3H,OCH₃),3.56(s,3H,OCH₃),2.15(t,J=4.5Hz,6H,COCH₃). ¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ168.70(C-1””,2””),164.28(C-1),162.06(C-6”’),154.47 (C-4”’),150.82(C-2”’),143.56(C-3’),143.21(C-4’),142.81(C-3),139.97(C-1’),133.81 (C-4’),129.34(C-1’),128.72(C-5”’),127.60(C-3”,5”),126.74(C-6’),124.75(C-5’),123.18 (C-2’),119.10(C-2),118.52(C-3”,6”),60.70(C-7”’),54.52(C-8”’),20.81(C-2””,4””). IR data(KBr pellets,cm^-1):3339.38(s,ν_N-H),1770.97(s,ν_C=O),1702.74(s,ν_RCH＝CHR),1632.88 (s,ν_Ar),1583.01(s,ν_Ar),1532.01(w,ν_Ar).

实施例16

咖啡酰磺胺二甲氧嘧啶（化合物16）

将咖啡酸(3.58g,20.00mmol)溶于乙酸酐（20mL）中，待完全溶解后，加入吡啶(4 mL)，60℃下搅拌回流36小时后停止反应，减压抽滤得到白色粉末为二乙酰咖啡酸，用乙 酸乙酯重结晶得到纯品，向二乙酰咖啡酸(5.0g,18.90mmol)中加入二氯亚砜(20mL)，60℃ 油浴下搅拌回流8小时后停止反应，减压蒸去溶剂，加入四氢呋喃稀释(20mL)，然后在冰 浴下加入磺胺二甲氧嘧啶钠(7.5g,22.68mmol)，加入吡啶(4mL)，搅拌24小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，待反应结束后，加入盐酸(6mL)，60℃水浴下搅拌回流3小时后停止反应， 减压蒸去溶剂，冷却后加入蒸馏水（水的加入量可以是水与反应物咖啡酸衍生物的摩尔数 之比为1：150），沉淀析出，减压抽滤，取沉淀，四氢呋喃和甲醇重结晶得到此目标化合 物，目标产物为黄色粉末，产率56%,mp:248-251℃,MS:m/z471,calcd,472,¹HNMR(300 MHz,DMSO)δ10.81(s,1H,SO₂NH),10.71(s,1H,CONH),8.29(s,1H,C3’-OH),8.18(s, 1H,C4’-OH),8.09(d,J=9.02Hz,2H,C3”,5”-H),8.03(d,J=9.02Hz,2H,C2”,6”-H),7.97 (s,1H,C2”’-H),7.60(d,J=15.6Hz,1H,C2-H),7.20(d,J=1.4Hz,1H,ArH),7.11(dd,J= 8.2,1.4Hz,1H,ArH),6.96(d,J=8.1Hz,1H,ArH),6.74(d,J=15.6Hz,1H,C3-H),3.86(m, 6H,OCH₃).¹³C NMR(75MHz,DMSO)δ165.07(C-1),158.44(C-6”’),151.23(C-4”’),150.92 (C-2”’),148.49(C-3’),147.28(C-4’),146.09(C-3),144.46(C-1’),143.82(C-4’),142.35 (C-5”’),135.21(C-3”,5”),134.60(C-1’),130.18(C-6’),126.41(C-2),121.66(C-3”,6”), 118.89(C-5’),118.15(C-2’),60.71(C-7”’),59.45(C-8”’).IR data(KBr pellets,cm-1): 3458.76(s,ν_O-H),3251.11(s,ν_N-H),1664.72(s,ν_C＝O),1608.49(s,ν_Ar),1558.34(w,ν_Ar),1525.12 (s,ν_Ar).

药理实验例1：本发明合成的酰胺类化合物对细菌的抑制作用

1  材料、试剂

1.1 材料与试剂

（1）YA1/HHT4-YX-280B型不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器；Sw-CJ-IJ型净化工作台， 无菌工作台；FYL-YS-430L型恒温箱；Finnpipette移液器、锥形瓶、玻璃棒、试管、培养 皿、Ep管、接种环，打孔器，酒精灯。

（2）肺炎球菌、大肠杆菌，绿脓杆菌、痢疾杆菌、沙门氏菌和大肠杆菌均由广西大学 动科院药理实验室提供。

（3）LB肉汤培养基、营养琼脂蛋白胨、蛋白胨购于中国检验检疫科学研究院北京陆 桥技术有限责任公司；

（4）DMSO（广东光华化学厂有限公司）；乙醇（广东光华化学厂有限公司）；硫酸（分 析纯，广东光华化学厂有限公司）；BaCl₂（分析纯，广东合山化工厂）。

2 实验方法

2.1 实验样品：化合物1-16。

2.2菌液的制备：取一接种环试验菌接种于适宜的营养肉汤中，37℃培养18h，临用前 进行体积比为1:10稀释。

2.3待测化合物的配制：电子天平准确称取100mg化合物，用1mL二甲基亚枫（DMSO） 溶解，即成待测化合物原液。

2.4最小抑菌浓度（MIC）的测定：取灭菌EP管10支并编号，第1管加入用营养肉汤 0.9mL，其余各管均加入0.5mL，然后向第1管加入待测化合物原液0.1mL，混匀， 吸出0.5mL放入第2管，依此法逐管进行稀释至第9管，弃去0.5mL，第10管不加 药液作为生长对照管（用DMSO溶解的待测化合物需在生长对照管中0.1mL DMSO）， 最后分别向各管加50uL的稀释菌液，37℃恒温培养18h，观察细菌生长情况，对照 管中必须有细菌生长，细菌不生长的最低浓度为化合物对该细菌的最小抑菌浓度 （MIC）。

2.5结果判定标准：化合物对细菌的MIC越小，表明该化合物的抗菌活性越大，化合物 对不同种类的细菌均有抗菌活性，表明该化合物抗菌谱广。

3结果与分析

3.1最小抑菌浓度（MIC）的测定：抑菌作用如表1所示。

表1 化合物对6种细菌的抑菌作用

Table 1 The antibacterial activities of Syringea Reticulata extract to six bacteria

抗细菌试验结果显示：合成的化合物大部分不仅能够抑制革兰氏阴性菌的生长，也可 以抑制革兰氏阳性菌的生长。其中大部分化合物对于革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌和肺 炎球菌），革兰氏阴性菌（痢疾杆菌和大肠杆菌）作用比较明显。例如化合物9,12,14对肺 炎球菌有很好的抑制作用，MIC都小于阳性对照头孢霉素钠。

从抑菌活性与化合物的结构分析可以看出：咖啡酸衍生物比乙酰基咖啡酸衍生物的抑 菌活性好；杂环上的取代基是氯元素的合成产物比其他取代基（甲基，甲氧基）活性显著 提高；杂环上的取代基是甲基的合成产物比甲氧基的活性高，具有萘环的产物比其他取代 基的活性都好。本发明产品可以作为抗菌剂应用于食品、医药等行业，制备具有抑菌作用 的各种形式的产品。