一种表面展示淀粉酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种表面展示淀粉酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将淀粉酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将淀粉酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示淀粉酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的淀粉酶，且酵母发酵培养后可直接作为淀粉酶制剂使用。